柱式海洋动物DNA提取试剂盒

本产品是针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒，可用于鱼类、虾

类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取，可以有效去除海

洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。

本产品主要特点是:

1.使用本 试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作,如:

酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等试验。

2.操作简单安全， 1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需

要使用苯酚氯仿等有机试剂。

3.应用广 泛,适用于多种动物细胞和动物组织等。

4.性价 比高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。

注意:使用前请先在柱式海洋动物DNAout溶液C中加入17mL自备的无水

乙醇，在专用洗柱液中加入60mL的自备无水乙醇。

1. 切取不多于30 mg的海洋动物组织材料，放入装有200 uL柱式海洋动

物DNAout溶液A的离心管中，涡旋振荡15秒。注意:根据提取的组

织不同，起始1 I也稍有不同，腮的细胞较大,一般建议提取t不超过

20 mg。如果儒要去除RNA,可加入40山RNase A (10 mg/mL)

溶液(客户自备) ,振荡15秒,室温放置5分钟。

2.加入20μL蛋白酶K溶液(20 mg/ mL),涡旋混匀,简短离心以去除管盖

内壁的水珠。在56C下放置，直至海洋动物组织完全溶解，简短离心以

去除管盖内壁的水珠，再进行下一一步骤。生t:不同动物组织裴屏时间不

网，是常懦0.5-2小时即可鬼威。庸贝齟织0.5小时本可裂解完全,

虾利类趄织1小时。每小时蒋测合禅晶2-3次,每次振蔡澜匀15

秒。

3.加入200uL柱式海洋动物DNAout溶液B,充分颠倒混匀，70C放置

10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。柱t: 加入

柱式滴祥动物DNAout濤液B时可会护生白色祝捷,一般70C放时

会椭失,不剑响后制实验。如海球吏瘸亮,说噢氟隐裂解不韧扁,可

施导哦提取DNA少糊取出的DNA不执。

4.在混合液中 加入200uL无水乙醉，充分颇倒混匀，此时可能会出现繁状

沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。

5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入- -个硅胶膜离心吸附柱中(吸附柱放

入收集管中) , 12,000 rpm (~13,400xg) 离心30秒，倒掉废液，

将吸附柱放回收集管中。

6. 向离心吸附柱中加入500山柱式海洋动物DNAout 溶液C, 13,000

rpm (~13,400xg) 离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。

7.向吸附柱中加入 600山专用洗柱液，12,000 rpm (-13.400xg) 离

心30秒，例掉度液，将吸附柱放入收集管中。

8. 重复上步操作一次。

9. 将硅胶膜吸附柱放回收集管中，12,000 rpm (~13,400xg)离心2分

钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残

余的专用洗柱液。拄t: 这一步的目的是特附柱中我余的专用执柱液去

除,酬其中的乙拽会影响后簇的川板皮(嘴切、PCR制)实验. 

10.将硅胶膜离心吸附柱转入-个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空

淌加50-200 μL专用DNA洗脱液，室温放置2-5分钟，12,000 rpm

(-13,400xg)离心1分钟，将溶液收集到离心管中。拄;专用DNA

物脱波的体积不应少于50山,体飘过小影响回收效率.为增加描因龃

DNA的得率,可将离心得到的穿液再加入吸附柱中,血制放量2分钟,

12,000 rpm (-13.400xg)离心1分钟.扶脱掖屿H位对于洗肌软

率有很大影响.著用规地水块聪液虚保延其pH值在7.0-8.5藏内，

pH着低于7.0会降低泱脱效率;且DNA产物应保存在-20C,以脚DNA