柱式骨骼DNA提取试剂盒

本产品是专门用于从动物骨骼(包括骨粉)样品中提取DNA的产品，20

次规格足够50次微量提取。

它具有下列特点:

1.微量提取，--次可以处理300mg左右的骨骼(但需要先将骨粉变成骨

粉)。

2. 柱式操作，方法简单，整个过程只需要40-60分钟。

3. 得到的DNA分子量不均匀，- -般在20 Kb到100 bp之间，具体取决

于骨骼的新鲜程度，骨粉的加工方法等。.

4.得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。

1.骨粉的制备:用自备酒精将骨骼表面擦洗干净，以防污染物对后续PCR

的影响，然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、

商品化的骨粉，可以跳过此步，直接进入下一一步。

2. 用天平称取0.2克骨粉，转移到2 mL塑料离心管中。

3.加入1mL溶液A到骨粉中，充分振荡30秒混匀。(注意:溶液A在4C

放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65C水浴使沉淀彻底溶解并充

分摇匀后再取用，且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠，需使劲振荡混匀。)

4.65C水浴放置30分钟。

5.加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备氯仿，充分振荡30秒混匀。.

6. 12,000 rpm室温离心3分钟，小心将上清液转移到一个新的塑料离心

管中。

7.加入0.5 mL溶液C,颠倒混匀。

8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要12,000 rpm室

温离心1分钟，并弃收集管中的穿透液。

9.加入0.5 mL通用洗柱液到离心吸附柱中, 12,000rpm室温离心1分钟，

弃收集管中穿透液。

10.再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000rpm室温离心1分

钟，弃收集管中穿透液。

11.12,000 rpm室温离心半分钟，弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,

否则残留的液体会抑制后续的PCR。

12.将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5 mL塑料离心管中，在离心吸

附柱的滤膜的中部加入30 uL DNA洗脱液，然后室温放置2分钟。如果

先将DNA洗脱液预热到60-80C再使用，效果更佳。

13.12,000-15,000 g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为骨骼DNA。

14.取少量进行电泳检测。注意:一般DNA都呈现弥散状，分布在20 Kb到

100 bp 这一广泛的范围，其比例跟骨骼(或骨粉)的新鲜程度、加工过

程(对骨粉)等因素密切相关。

15. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20°C长期保存。