动物毛发不容易降解,同时含有大量的线粒体,所以是考古研究、法医研究和
线粒体研究等领域的重要性实验材料。目前市场上专门用于毛发样品DNA提取的
产品很少,它具有下列特点:
1.充分 的酶法降解和快速的柱式提取相结合,前者使DNA充分释放,后者使杂
质充分被去除。
2. DNA 回收率- -般在0.5 ug/ 100 mg左右(理论产率- -般是0.1-1.5ug之间)。
3. DNA纯度高,OD比值- -般在1.6-1.8之间。
4.提取的 DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
5.适合于动物的各种毛发。
1将 30-50 mg左右毛发充分剪碎(成芝麻大小就可以),最后转移到一个干净
的1.5 ml塑料离心管中。注意:最好从靠近根部的地方剪取样晶。
2加入1 mL柱式毛发DNAout溶液A (使用之前取本次实验所需的溶液A
现加入自备的-疏基乙酶,Bβ-疏基乙酶 的终法度为5%)和20 uL白酶K
溶液(10mg/mL), 37C保温10小时(一般过夜保温就可以)。注意:最好
让反应体系处于摇晃状态,此保温长度-般可以让毛发溶化。
3加入03 mL的柱式毛发DNAout溶液B和0.2 mL的自备氧仿,报蔼器上
叔荡30秒充分混匀。
4.12,000rpm室温离心3分钟,小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5在上清液中加入等体积的柱式毛发DNAout溶液C,上下颠倒30秒充分湿匀。
6将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-08 mL混台液转移到
离心吸附柱中,室温放置2分钟,12,000rpm 室温1分钟,弃穿透液。再把
剩余的一半上柱,重复此操作。
7. 将0.7 mL通用洗杜液加入到离心吸附柱中,12,000 rpm室温离心半分钟,
弃穿透液。
&将0.3 mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12 ,000 rpm离心半分钟(此步
为第二次洗涤,一般可以省略)。
9. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10.将离心吸附柱放置在-新的1.5 mL塑料离心管中,加入30 uL DNA洗脱液
3.0。
11.12,000rpm 离心1分钟,管底即为毛发DNA溶液,可立即用于PCR,也可
长期保存在一20C.注意:由于头发中DNA的含量十分少,所以电泳检测时
即使全部上样也只能看见十分微燜的DNA条帶。
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企业名称
上海钦胜生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
27000000202008180010
成立日期
2020-08-18
注册资本
100
经营范围
从事生物科技、医疗科技领域内的技术开发、技术咨询、技术转让;仪器仪表、机电设备、机械设备、玻璃制品、电子产品、医疗器械、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)的销售。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】
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上海市松江区余山镇陶干路701号5幢
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