柱式血液RNA提取试剂盒

本产品具有下列特点:

1.比血液RNAout更加简单快捷,直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品，

不需裂解红细胞等任何预处理步骤，整个提取过程只需要十分钟左右,

可以全在室温下进行。

2.产量和纯度更高, 0D260/280均在2.0左右,产率-一般为2-5 ug/mL

人血。

3.每次微量提取的最大样品处理量可以达到1.5mL，高于进口的同类产

品。

4.与常用的抗凝剂(包括肝素，EDTA,柠檬酸钠，草酸钠)兼容，得到的

RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。

1蒋02-15 m新鲜成朝冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑科商心管中。

2.1000-15000 室温离心3分钟弃b请恤韵)。如果此时血液網胞风

诧体飘大于02 ml。则需要成少血施的使用量，具体减少量酱机据具

体情况决定。四为名个个体优其是患者)血被中白细胞教目遊别很大。

3.将1mL 路被A加入到血资规赛沉淀中。用移随枪充分教打沉论使细响

#0.3 ml的溶被B加入到离心管中，刷烈繭荡30秒

5和0.2 mL就仿加入到商心管中。剧残值区30秒。

6. 12000-15000 g室温商心3-5分钟，蒋上清随为无色成良红色。约

0.5-0.9 m15廖劐另一干净商心管中。注意:转移的液体不要超过0.7

ml.否则下一-步不能加入等体职的溶液C.为防止污染。最好留100uL

左右的上清液。下层有机相一般星深红色。中间层为自色，耆有DNA,

张白质和其他细胞破碎物，避免触及成吸取。

%加入等体职的路液c.充分颠例湿匀。

8. 分两次将溶波转移到商心吸附柱中。每次转移后200015000 g室温

商心率分钟，弃穿透液。

9加0.7 ml通用洗柱施，室温商心半分钟，齐穿造液。

10.如果有必要。可以再加0.3皿通用洗性液。室鼴商心率分钟，弃穿造

施。住意:增加此步可以进-步提高RNA的纯度。

11.室温1000 15000 g商心半分钟。此步十分重要，否期或留的通用德

柱液公影响RNA的石艘反应。

12.将商心吸射桂转移到一-个自备的RNaselree的收集管中。加入so- 100

山RHA洗脱施，室温放置1-2分钟。.

13. 1000-15000室温商心半分钟.商心管中溶液即为RNA神品。可以

立即使用成存放于-80C待用。

14. RNA完整性的电体检测:如果酱要贩Narten杂交，强烈建设用户使

用甲醒变性胶通行RNA电泳,四为非变性胶不能分离所有的RNL分子

(BioTechniquts, 28: 414, 2000)。

15. RNA产量产率测定:将5 10 L RNA路于TE缓中液中中17 5-8.2之

间检测其在00:260的光吸数。通过光吸收可以得出RNA浓度(1

0D260的RNAm40 re/mL)。過面计算出RNA的产量(体度x体相)

和产率RNA产量/组织用量。人血RNA产率- -般为2-5 ug/ml.

6 RNA纯度测定:无污染的总RNA的0D260/0D280-量在20左右具

体款值与其碱基组虎和溶流成分等多种因素有划。高于此范關刚分開表

示样晶可能有蛋白质污來，但-最不影响RT-PCR等反应。