Cytiva 在提供端对端的企业解决方案方面居于领先地位，拜耳在复杂疗法的技术和工艺开发方面具备强大的专业知识，此次强强联合可使双方充分发挥各自优势，相得益彰。双方以实际行动推进和加速细胞和基因治疗行业的发展，不断提高新型疗法的可及性。近日，全球生命科学领域的先行者 Cytiva（思拓凡）宣布与拜耳携手，正在合作开发第一个用于异体细胞治疗的端到端模块化生产平台。随着越来越多的细胞治疗从实验室走向临床，两家公司已决定签署为期多年的开发协议，以加速提供生产解决方案，满足全球日益增长的需求。“ 拜耳制药产品供应高级副总裁兼生物技术全球总监 Jens Vogel 表示：“通过与 Cytiva 的合作，我们计划打造一个独特、灵活、模块化的细胞治疗生产平台，它可以快速推进各种细胞疗法的‘产业化’发展，从而实现高效率、标准化和规模效益。””“ Cytiva 细胞和基因治疗副总裁 Catarina Flyborg 表示：“合作是推进和加速新型疗法开发，并最终帮助患者改善生活的关键。身为新型疗法生产技术领域的引领者，Cytiva 拥有强大的科技实力。通过本次合作，我们可以借助拜耳在细胞治疗开发方面积累的深厚专业知识，共同打造新一代的生产解决方案，以满足异体细胞治疗的开发需求。””在开发自动化和模块化异体细胞治疗生产平台方面，Cytiva 和拜耳拥有相同的愿景。双方都坚信平台将有助于行业建立新的生产标准，并很早就计划为异体细胞治疗设计创新设备和自动化解决方案，为本次合作奠定了基础。双方计划同时开发设备和软件，并重点关注生产的速度、灵活性，以及 “即插即用”的稳健操作环境；最终目标是通过设备和工艺的模块化设计，在提高生产设施的效率的同时，加速新型疗法的上市。本次合作中，双方将会共享人才、资源和设施，充分利用拜耳的异体细胞治疗生产技术路径，其开发的产品也将纳入支持技术概念验证测试的候选之一；Cytiva 将利用其在设备和耗材制造方面的专业知识以及技术路径，来设计全新的生产平台，并在设计完成后推动平台的商业化发展。

 2022年7月21日IKA新品研讨会（上午的线下，下午的线上，同日举行）新人，新品，新气象，助力科研共成长，时代更迭，新品层出，IKA以敏锐的动作独特的眼光于生命、混合、材料各领域推出全线新品。本次我们走进IKA在IKA十余台新机中畅游，身临其境感受新品的魅力，无论是线下“茶话会”还是线上研讨会，大家都乐在其中。学到了知识的同时交到了朋友。IKA新品研讨会——上午的线下上午十点由IKA产品经理钱畅主持会议开场并抽取幸运合作伙伴。德泉IKA产品助理董葳对T 18 digital分散机；G-L离心机；ROTAVISC me-vi HELI Complete粘度计产品进行讲解。IKA北区销售总监李龙对T 25 easy clean digital分散机；IKA Multi Drive control；LR 1000 control System反应釜进行了教科书式讲解。德泉IKA产品经理钱畅对MICROSTAR 30 control；MATRIX Orbital Delta Plus；生物反应器进行了生动形象的讲解。交流答疑，经过讨论处理了产生的各种问题，期待下次与各位合作伙伴面对面交流。IKA新品研讨会——下午的线上这次的线上代理商会获得了不小的关注，大家答题抽奖忙的不亦乐乎。线上参会人数随着讲解产品和抽奖的进行达到了700人。台前幕后，准备仪器中，公司的小朋友来帮忙并感受畅姐的单独辅导。居然有人说主播兔牙可爱主播表示“开心”。会议结束大家依依惜别，相聚总是短暂的，下次我们必然带着满怀热情再次见面。感谢各位同行小伙伴们的支持与关注，希望大家能够交到朋友学到知识，不枉此行。我们后续还会有一些列走进各大品牌实验室的直播，希望大家持续关注。

生命诞生于3d环境，所以传统的2d细胞培养方法，虽然可以保证细胞的生长和对外界刺激产生生理反应，但是和实际生活环境的巨大差异会导致大部分生理功能受限。比如，2d培养环境下的细胞间的相互作用是xy轴的，只是细胞层之间的作用，缺乏z轴方向的影响，这样就没有养料、氧气和外界刺激物（如：药物处理）的梯度渗透作用。而3d培养环境下细胞可以变成细胞球，从而可以体现出z轴细胞之间的力作用和各种物质的渗透梯度，和体内的差异相较2d细胞层会大大缩小，从而提高体外细胞实验的准确性。最近的统计表明每年会有370万新增癌症病例在欧洲发生，这些疾病会导致20%的死亡率。利用体外培养的肿瘤细胞来高通量的筛选新的有效的药物对于挽救癌症病人非常重要，而3d培养的肿瘤细胞球是合适的模型，但是这种细胞模型也有其瓶颈。因为3d细胞球的培养方案不统一，而且生长环境较之2d复杂，所以最终养成的球体异质性会较之2d细胞层严重，而药物的筛选需要有尽量均一的样本，这样最终得到的药物敏感数据才准确可信。为了解决这样的情况，需要对培养出来的肿瘤球进行挑选，然后放到孔板中，但是传统的挑选方法是用人为的用肉眼挑选，这样会导致效率的低下，而且个人的差异会导致标准不统一，再者如果直径500微米一下的球体挑选难度就会更大。此外，对3d球体在镜下和摄像头下的成像也容易受到光源、培养基浓度和培养器皿的形状而影响，从而更加增加观察者肉眼判读的不统一性。1、2、3、4、5、6、7、8、9、10leica s9i体视镜独有的fusionoptics融合光学系统，可以同时兼顾长景深和高分辨率，而3d球体因为有z轴的深度，所以使用这种技术可以保证完整而清晰的观察到球体。且放大倍率可以到55x，实现9：1的变倍比，实现总览到细节的快速切换。此外，该机型搭配了10mp的摄像头。光学素质和高成像的分辨率可以方便为深度学习软件来分析。再加之有122 mm工作距离，从而有足够的空间来搭配上图中的自动化显微操作系统和注射器。 细胞球的精确分割是整个细胞选择培养流程的重中之重。在自动选择过程中需要兼顾灵敏性及准确度问题，以排除尺寸过小、过大或外形不规则的细胞球个体。由于细胞球通常不会彼此接触或重叠——这一特点恰巧符合u-net 神经网络的设计，因此通过u-net 神经网络训练的深度学习模型可以很好的解决自动地选择细胞球这一难题。而同为leica旗下的aivia人工智能图像分析软件，是一款具有处理深度学习模型的软件，此外其还为使用者提供了python 接口，用户可以调用公开的三方模型或分析工具，如发布在github 上的资源，也可以根据实验需要编写符合特定需求的插件，制定一体化的分析流程，提高整体分析流程的效率。经过这套系统转移后的球体状态如何呢？作者通过leica sp8共聚焦检测了形态和活力相关的标记物（用calcein am、eth-d1和hoechst3342），通过短时间（转移前后马上对比）和长时间（0、24、48小时），发现通过spheroidpicker的转移操作几乎不会影响细胞球的活力。 而这套系统的最终效果如何呢？要求专家和spheroidpicker挑选面积为21,000-29,000 μm2、最小圆度为0.815的小球。对比最终结果，发现spheroidpicker对挑选面积和圆度的范围控制，其操作28次，其中26个小球被成功挑出，25个转移成功，成功率更高。3d球体是现在最有前途的体外筛药模型，让细胞xyz空间展现出较之2d单细胞层更多更准确的生理功能，但是其培养方法的不统一造成较难获得均一化个体，需要后期的挑选才可以作为可信的筛药对象，而借助能拥有光学素质能兼顾清晰和3d景深leica s9i体视镜加上深度学习软件（leica aivia可以用来开发此功能），可以自动化的来做挑选和转移的工作，从而让3d球体成为可信高效的体外筛药模型。参考文献：1. horvath, p. et al. screening out irrelevant cell-based models of disease. nat. rev. drug discov. 15(11), 751–769. https:// doi. org/ 10.1038/ nrd. 2016. 175 (2016).2. brüningk, s. c., rivens, i., box, c., oelfke, u. & ter haar, g. 3d tumour spheroids for the prediction of the effects of radiation and hyperthermia treatments. sci. rep. 10(1), 1653. https:// doi. org/ 10. 1038/ s41598- 020- 58569-4 (2020).3. carragher, n. et al. concerns, challenges and promises of high-content analysis of 3d cellular models. nat. rev. drug discov. 17(8),606. https:// doi. org/ 10. 1038/ nrd. 2018. 99 (2018).4. szade, k. et al. spheroid-plug model as a tool to study tumor development, angiogenesis, and heterogeneity in vivo. tumour biol.37(2), 2481–2496. https:// doi. org/ 10. 1007/ s13277- 015- 4065-z (2016).5. sawant-basak, a. & scott obach, r. emerging models of drug metabolism, transporters, and toxicity. drug metab. dispos. 46(11),1556–1561. https:// doi. org/ 10. 1124/ dmd. 118. 084293 (2018).6. cesarz, z. & tamama, k. spheroid culture of mesenchymal stem cells. stem cells int. https:// doi. org/ 10. 1155/ 2016/ 91763 57 (2016).7. nath, s. & devi, g. r. three-dimensional culture systems in cancer research: focus on tumor spheroid model. pharmacol. ther.163, 94–108. https:// doi. org/ 10. 1016/j. pharm thera. 2016. 03. 013 (2016).8. cisneros castillo, l. r., oancea, a.-d., stüllein, c. & régnier-vigouroux, a. evaluation of consistency in spheroid invasion assays.sci. rep. 6, 28375. https:// doi. org/ 10. 1038/ srep2 8375 (2016).9. friedrich, j., seidel, c., ebner, r. & kunz-schughart, l. a. spheroid-based drug screen: considerations and practical approach.nat. protoc. 4(3), 309–324. https:// doi. org/ 10. 1038/ nprot. 2008. 226 (2009).10. bresciani, g. et al. evaluation of spheroid 3d culture methods to study a pancreatic neuroendocrine neoplasm cell line. front.endocrinol. 10, 682. https:// doi. org/ 10. 3389/ fendo. 2019. 00682 (2019).11. istvan grexa et al. spheroidpicker for automated 3d cell culture manipulation using deep learning. scientific repotrs (2021) 11:14813. https://doi.org/10.1038/s41598-021-94217-1

北京德泉兴业商贸有限公司作为Cytiva 思拓凡品牌的代理商将继续秉承公司及品牌理念，以客户为中心，为您提供优质的实验室解决方案。凝胶过滤层析 (GF)，也称为尺寸排阻层析 (SEC)，基本原理是根据样品分子大小和形状进行分离的一种常用的纯化方法，属于非吸附性层析。图1: Cytiva全新一代Increase系列分子筛预装柱，专门为小规格制备纯化及分析而设计根据应用目的的不同，凝胶过滤层析主要可以分为以下三种方法：1分析型凝胶过滤层析：对于分辨率有很高的要求，上样体积一般在柱体积的0.3% - 0.5%；使用柱子的高度一般为30cm。而在快速纯度检测和筛选的实验中，常用的是15cm柱高的柱子，可以在提供足够分辨率的前提下，缩短运行时间，节省样品和缓冲液。2制备级凝胶过滤层析：对于分辨率有较高的要求，上样体积一般在柱体积的0.5% - 4%。同时，运行时流速较低，使用的柱子高度也比较高 (一般≥ 60cm)。经过纯化后的样品将被直接置换到合适的缓冲液条件中，用于后续的实验或储存。3脱盐与缓冲液置换：与上述精细分离不同，脱盐或缓冲液置换属于组分分离，即，将大分子样品与小分子或离子进行分离的过程，因此对于分辨率的要求相对不高。上样体积可达柱体积的30%。SephadexSephadex填料是早期发现的一种填料，按照交联度的不同，用Sephadex G加数字来区别，数字越小交联度越大，形成的孔径越小，对应的分离范围越小。Sephadex G系列填料目前一般主要用于脱盐与缓冲液置换，且有多种分离范围、颗粒大小可以选择。粗颗粒 (Coarse)流速较快，细颗粒 (Fine)流速较慢，分辨率较高。图2.不同上样量对于脱盐实验结果的影响SepharoseSepharose填料是高流速大分子分离。作为琼脂糖基质的填料，具有非特异性吸附低、回收率高等特点，分离范围宽阔，从10kD – 2×104kD，适合分子量大小差异大而对分辨率要求不高的样本。Sepharose和2,3二溴丙醇反应而成的Sepharose CL系列填料，增强了Sepharose的物理和化学稳定性。特别适合含有机溶剂的分离，能承受较强的在位清洗，并可以高温消毒，同时在流速方面也比传统的Sepharose填料有了明显的提升。Sepharose Fast Flow填料为粒径90μm的高度交联的琼脂糖填料，大大加强了机械性能，流速特快，适合工业规模生产。该填料经去电荷处理，非特异性吸附特低，回收率也得到了了提高。极高的化学稳定性，可用多种促溶剂、有机溶剂工作及1-2M NaOH进行在位清洗。SephacrylSephacryl填料是葡聚糖与N,N-亚甲基二乙酰胺交联而成的一种新型葡聚糖填料。目前Cytiva提供5种不同分离范围的Sephacryl填料：Sephacryl S-100 HR、Sephacryl S-200 HR、Sephacryl S-300 HR、Sephacryl S-400 HR、Sephacryl S-500 HR，选择性广阔。排阻极限甚至可以达到108，不仅可以用于分离一般的蛋白，也可以用于分离蛋白多糖、质粒、甚至较大的病毒颗粒。同时经济型HiPrep 16/60、26/60 Sephacryl S-100，200，300，400，500HR预装柱提高了分辨率和重复性，具有较好的分离特性。SuperoseSuperose填料是分离范围广的填料，同时宽广的分离范围配合高分辨率，能一次性分离生物分子大小差异大的混合物。刚性相比传统填料有了极大的提升，在高粘性液体如8M尿素下也能保持流速，适合糖类、核酸、病毒，特别是包涵体蛋白在促溶剂中的纯化。Superose填料的颗粒细小，大小分布集中，允许高流速纯化，所以适合中、高压层析系统使用。图3.用于精细分离的凝胶过滤层析产品的分离范围SuperdexSuperdex由葡聚糖和琼脂糖的复合基质高度交联形成，是目前Cytiva产品中分辨率、选择性最高的凝胶过滤层析填料。该填料流速快且反压低，同时较低的非特异性吸附提高了回收率的表现能力。Superdex可以在高粘性洗脱液 (如8M尿素)在相对较高的流速下运行。在常用的水性缓冲液和添加剂 (如去污剂、变性剂)中化学稳定，并可以耐受1M的NaOH清洗。Increase平台系列预装柱：进一步缩小了填料粒径，提高了填料的耐压性能，提升了分辨率的同时有效缩短了分离纯化所需的时间。❖相同流速下更高分辨率：提高蛋白的纯度与分析数据的精度图4. 与Superdex Peptide相比较，新一代Superdex 30 Increase在相同流速下提高了50%分辨率❖相同分辨率下更高流速：节省实验时间，同等分辨率下时间更短，或通量更高图5. 与Superdex Peptide相比较，新一代Superdex 30 Increase在相同的分辨率下，只需要1/3的实验时间。❖批次差异更小，获得更好的可重复性图6. 在Superdex 30 Increase预装柱上重复注射由蛋白质和肽组成的样品混合物，并显示了运行1、50、150、250和350的结果。 蛋白质和肽的峰标记为1-5。Cytiva针对不同的实验目的，提供了3种不同规格的预装柱：适应于不同的上样量以及应用目的，Cytiva SEC Increase预装柱提供了丰富的选择与卓越的性能，为每一次蛋白纯化，样品分离都保证了不凡的表现。

酸类化学试剂是科研实验重要支撑，广泛应用于化工、环监、疾控、高校、食品、检测等行业实验室。日常实验中酸的使用：混合实验：盐酸、硫酸等稀释实验：盐酸、硫酸等移液实验：盐酸、氢氟酸、高氯酸等消解实验：盐酸、硝酸、硫酸、混合酸等滴定实验：盐酸、硝酸等滑动查看更多实验酸类试剂大多具有强烈的腐蚀性和挥发性，实验过程中会有酸蒸汽或混合酸雾产生，危害实验人员健康。化学吸入风险酸雾是指的是一种雾状的酸类物质，通常在空气中酸雾的颗粒很小，粒径为0.1~10 μm，肉眼无法察觉，具有较强的腐蚀性。经常吸入酸蒸气或酸雾会引起呼吸道或支气道管炎等。特别是盐酸、硝酸、硫酸等酸类。酸类化学品危险概述向下滑动阅览🔽盐酸  hcl侵入途径吸入、食入。健康危害高浓度盐酸对鼻粘膜和结膜有刺激作用，会出现角膜浑浊、嘶哑、窒息感、胸痛、鼻炎、咳嗽，有时痰中带血。盐酸雾可导致眼睑部皮肤剧烈疼痛。慢性影响浓盐酸具有强挥发性和腐蚀性，高浓度对人体有极度伤害,具有刺激性气味，对人体是有害的。硝酸  hno₃侵入途径吸入、食入。健康危害吸入硝酸气雾产生呼吸道刺激作用，可引起急性肺水肿。口服引起腹部剧痛，严重者可有胃穿孔、腹膜炎、喉痉挛、肾损害、休克以及窒息。眼和皮肤接触引起灼伤。慢性影响 长期接触可引起牙齿酸蚀症。慢性影响长期接触可引起牙齿酸蚀症。硫酸  h₂so₄侵入途径吸入、食入。健康危害对皮肤、粘膜等组织有强烈的刺激和腐蚀作用。蒸气或雾可引起结膜炎、结膜水肿、角膜混浊，以致失明；引起呼吸道刺激，重者发生呼吸困难和肺水肿；高浓度引起喉痉挛或声门水肿而窒息死亡。口服后引起消化道烧伤以致溃疡形成；严重者可能有胃穿孔、腹膜炎、肾损害、休克等。皮肤灼伤轻者出现红斑、重者形成溃疡，愈后癍痕收缩影响功能。溅入眼内可造成灼伤，甚至角膜穿孔、全眼炎以至失明。慢性影响牙齿酸蚀症、慢性支气管炎、肺气肿和肺硬化。——以上摘自msds(化学品安全技术说明书)安全使用 科学防范国家卫生健康委员会颁布的gbz 2.1-2019明确规定化学品职业接触限值pc-twa。pc-twa:以时间为权数规定的8h工作日、40h工作周的平均容许接触浓度。操作注意事项：1熟悉所操作酸的特性；2操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程；3密闭操作，尽可能机械化、自动化；使用全自动密闭仪器，如消解仪、瓶口分液器等......4注意通风；需要在通风柜内进行操作5操作转移过程中建议操作人员佩戴过滤式防毒面具、穿橡胶耐酸碱服、戴橡胶耐酸碱手套。12依拉勃净气型通风柜依拉勃净气型通风柜顶部安装过滤系统，使用专门针对酸类的be+过滤器，从源头捕捉实验产生的酸蒸气和酸雾使实验人员接触化学品浓度接近为0ppm，不超过其pc-twa值的1%，远低于职业健康标准规定。同时，过滤效能也高于标准jg/t 385-2012规定。safety you can see!安全无小事，实验工作中务必要根据酸类化学品的特性正确操作和存储，同时对实验后的废酸液进行收集（收集后的废液可根据酸碱中和反应原理进行处理），以减少不必要的伤害。依拉勃无管过滤技术50余年持续投入研发创新为实验人员的健康提供安全防护让实验人员享受纯净呼吸

北京德泉兴业商贸有限公司作为Cytiva 思拓凡品牌的代理商将继续秉承公司及品牌理念，以客户为中心，为您提供优质的实验室解决方案。帮助您获取生命科学研究及药物研发全方位的解决方案。直播时间5 月 17 日 19:00 - 20:00直播主题仪器使用的避坑指南 —— Molecular Devices 售后技术讲座参与方式长按识别二维码即可预约报名简介近年来，Molecular Devices 以其特有优势备受广大科研人员青睐，为进一步增加用户对 MD 仪器的深入了解，提高仪器使用效率，加快实验进程，特意举办此次技术讲座。内容涵盖了日常仪器使用注意事项，仪器日常保养等。MD Service 团队，懂技术，更懂您。日程安排时间主题演讲嘉宾19:00-19:25高通量成像/筛选仪器的基础维护与保养李炜19:25-19:50酶标仪的维护与保养田龙洁19:50-20:00售后服务产品介绍周怡喆演讲嘉宾李炜技术服务专家毕业于上海第二工业大学，光电技术专业。拥有 10 年仪器生产制造及产品开发经验。现任 Molecular Devices 公司技术服务专家。主要负责克隆筛选系统与高内涵成像系统的仪器硬件技术支持工作。田龙洁高级维修工程师及维修支持现任 Molecular Devices 公司高级维修工程师及维修支持一职，对酶标仪有超过十年的服务经验，目前主要负责酶标仪的返厂检修与对团队的技术支持。周怡喆售后服务销售拥有 10 年仪器售后服务销售经验，现任 Molecular Devices 公司售后服务销售。主要负责酶标仪、高内涵等产品的售后合规服务以及维保服务销售工作。长按识别二维码即可预约报名美谷分子仪器视频号目前新一期视频为您介绍我们的新品高内涵成像分析系统 HT.ai 。德泉兴业期待与您相见好玩的、划算的、有用的、前沿的帮助您获取生命科学研究及药物研发全方位的解决方案产品覆盖微孔板检测分析、高通量筛选、高内涵成像、高效克隆筛选等。关注德泉兴业，了解更多实验室仪器实验信息！科检测病毒分离纯化-扫码关注德泉-研灵活省时广泛应用”咨询电话：010-83659275了解更多产品信息~

病毒载体在基因治疗、细胞治疗、溶瘤病毒疗法和肿瘤疫苗等领域显示出很高的应用潜力。病毒颗粒作为递送遗传物质的合适载体可将目的基因传递至培养的细胞或是完整活体中。常用的病毒载体有腺病毒、慢病毒及腺相关病毒（AAV）。 腺相关病毒（AAV）在基因治疗方面的重要性逐渐凸显，越来越多的临床试验将其用于各种治疗。AAV是一种体积小、无包膜的细小病毒，在20-25nm的衣壳中基因组大小为∼4.7kbp。AAV最早发现于20世纪60年代，被认为是腺病毒培养的污染物。然而，随着发现AAV只有在腺病毒存在下才能复制，以及后来的单纯疱疹病毒1型（HSV-1）的存在，腺病毒和AAV之间的联系很快建立起来。在确定AAV可以转化哺乳动物细胞后，研究人员开始生产重组AAV（rAAV）。含有腺病毒DNA的质粒可以独立于辅助病毒复制AAV。这一发现推动了该领域的发展，并真正开启了AAV的基因治疗领域。 图 1.AAV的生产及纯化方案。由图1可知，从上游生产到AAV最终纯化产品，不论是工艺开发阶段、最终生产还是纯化过程，我们都需要监测一系列关键质量属性，包括体外转导滴度、病毒基因组滴度、病毒物理滴度、宿主细胞蛋白和 DNA 残留等。目前现行的许多检测技术都是劳动密集型的，精度低，自动化程度低。此外，分析通常耗时多且成本高昂。简化的高精度分析（如 SPR）可以通过高度自动化来优化现有的工艺流程。接下来，就跟着小编一起看一下如何应用Biacore进行AAV的总滴度分析。图 2. 左：使用 Biacore 直接偶联法进行 AAV2 滴度分析；右：使用Biacore捕获法进行AAV5滴度分析 如图2所示，我们在AAV2的滴度检测中尝试了直接偶联法，抗AAV2抗体被氨基偶联在CM5芯片上。待测AAV2样品流过芯片表面，通过建立的标准曲线测定病毒滴度。而AAV5采用了捕获法进行检测，抗AAV5抗体被捕获在Protein A芯片上。随后将稀释的AAV5样品注入芯片表面上，并根据校准曲线评估病毒滴度。不论是哪种方法都是基于特异性抗体与完整病毒颗粒的结合来进行的。接下来我们通过一系列实验结果一起评估下Biacore检测效果如何？ 图 3.使用Biacore T200对AAV2进行滴度分析。标准曲线的范围为 3.6 × 108 至 9.2 × 1010 VP/mL。在方法开发过程中，我们发现在推荐的实验条件下连续多次检测至第10天，芯片上固定的抗体依然足够稳定。如图3所示，即使两个标准曲线之间间隔有66个检测样本，它们依然能做到完美重合。如此好的稳定性使得只做一次标准曲线用于后续1天内全部样品评估的想法变为可能。严谨的小编也为大家做了个测试，通过在每次实验中包含的内部阳性对照样本来监测固定化芯片的性能。图4显示了在同一固定传感芯片表面上运行的十天内的阳性对照的响应水平。阳性对照的响应水平的相对标准偏差低于4%。这种高度的稳定性有助于节省昂贵的标准品并且缩短检测的总时长。图 4.三个独立实验，使用同一张预固定传感芯片在十天中阳性对照的响应值。对照重复测量的相对标准偏差小于4%。同样的，让我们再来看看捕获法的稳定性是否也能经得住考验。图 5.使用Biacore T200对AAV5进行滴度分析。该图显示了两条校准曲线基本重叠，标准曲线的范围为 9.1 × 109 至 5.8 × 1011 VP/mL。我们在AAV5 滴度测定时尝试了捕获法，这种方法需要在每个cycle中重新捕获抗 AAV5 抗体。这样，每个cycle的抗体都被认为是崭新的，从而避免了固定在芯片表面的抗体活性降低的顾虑。用于捕获抗AAV5抗体的传感芯片Protein A非常稳定，可以在不改变表面分子性能的情况下重复用于多种实验。随后我们将Biacore AAV2滴度测定法与ELISA测定的结果进行比较。我们对上游收获样品和下游工艺样品进行了分析（图6）。结果显示Biacore测定与ELISA之间存在良好的相关性。而Biacore测定的批内精密度为3%，明显优于ELISA的≥20%的精密度。图 6.上游和下游样品中AAV2滴度的ELISA和Biacore测定结果的比较。同样AAV5的检测结果我们也与ELISA进行了比较 我们对一组上游和下游AAV5工艺样品进行了Biacore分析，并将结果与ELISA结果进行对比。ELISA结果与Biacore测定的滴度相关度略低于AAV2（图7），可能是由于不同方法实验条件的差异，ELISA在标准缓冲液条件下运行，而Biacore测定使用的是经过优化的缓冲液条件，从该组样品实验结果来看，Biacore测定的精密度为2%，而ELISA为15%。图 7.不同类型上游和下游AAV5样品中病毒滴度的ELISA和Biacore测定数据的比较。如果使用 Biacore 8K 系列进行 AAV2 滴度分析可以显著提高检测通量。 Biacore 8K 系列配备 16个流通池和 8 个并行运行的进样针。这种并行设计使得实验人员可以进行平行浓度分析。在平行浓度分析实验中，校准曲线在多个通道上运行，每个通道设有一个校准点。实验人员只需要一个cycle就可获得校准曲线。通过平行法获得校准曲线加上八个样品并行检测，可显著缩短总检测时间。图 8.Biacore 8K 可以实现并行检测 8 个样品，显著缩短运行时间总结腺相关病毒（AAV）是一种越来越常用的将核酸引入活细胞的载体，研究者们主要将其应用于基因治疗领域。标准的滴度分析使用ELISA，这种测定需要大量的手动操作，并且在精度和可重复性方面存在一定的挑战。Biacore基于中美日三国药典推荐的表面等离子共振技术（SPR），在对两种腺相关病毒（AAV）血清型滴度分析的性能测试中均可提供稳定性好重复性佳的结果，并且与使用ELISA的既定方法具有良好的相关性。与ELISA相比，Biacore 滴度测定的重复性明显更好。Biacore 检测更加自动化，手动操作时间大大缩短，样品制备简单，自动进行智能化数据评估。另外，您可以多次重复使用Biacore 传感芯片。对于AAV2的滴度分析，您可以使用单条标准曲线使用同一张预固定传感器芯片至少10天，这样可以大大节省标准品和检测成本。我们在AAV5测定中测试了捕获法的可行性，使用的传感器芯片Protein A也非常稳定，可以重复用于多种分析。您可以将这两种检测应用于任何支持浓度分析的Biacore 系统。在 Biacore  8K 或 Biacore  8K+ 系统上并行检测可显著提高样品通量并缩短总运行时间。Biacore 不仅是质量控制的适合工具，也是工艺优化的好伙伴。

Molecular Devices 今年重磅推出新一代高内涵成像分析系统 ImageXpress Confocal HT.ai，其具有现代化的机器学习的分析功能。具有 7 色高强度激光光源和机器学习功能的可扩展、高通量的高内涵筛选解决方案。01:18____ImageXpress Confocal HT.ai 智能化共聚焦高内涵成像分析系统采用了具有 8 个成像通道的 7 色激光光源，实现了高扩展性的多通道成像分析，同时通过缩短曝光时间保持高通量。水镜系统提高了图像分辨率，并将像差最小化。这些特点让科学家可以看到更深入的厚组织样品，提升了 3D 类器官和球体实验的成像强度和通量，展现了更多其他技术无法洞悉之密。同时，MetaXpress  软件和 IN Carta  软件的强大组合简化了高级表型分类和 3D 图像分析的工作流程，具有机器学习的分析功能和直观的用户界面。__主要特点实验检测更灵活2更高的激发功率提供了更高的信号，更短的曝光时间，更快的 3D 样品采集速度。AgileOptix 转盘共聚焦技术消除了失焦光线的干扰，并提供了对厚组织样本更深入的了解。更短的曝光时间可实现高达两倍的扫描速度提高。利用激光进行 CFP 和 YFP 的 FRET 实验扩展了研究可选择性。“智能”加速分析精准、灵活、高效、简便，ImageXpress Confocal HT.ai 智能化共聚焦高内涵成像分析系统助力探索更多可能。点击“阅读原文”下载产品宣传册，希望获取更多信息，请在公众号或留言区留言。

药物冻干，电池爆炸；耐低温橡胶是如何在高寒环境下使用，哪种巧克力甜甜味美还不会在夏天熔化?纵观我们身边的任何物质都会经历温度变化的过程，材料随着温度变化其性质也会发生变化，影响制备工艺和使用性能，生产生活中无时无刻不都在上演着材料的“冰与火之歌”。为了对材料进行表征分析，热分析技术已经成为一种强有力不可或缺的分析手段。梅特勒托利多作为主要的热分析仪器制造商之一，将为大家详细介绍热分析技术及其应用。1 热分析技术概述物质在温度变化过程中可能发生一些物理变化（如玻璃化转变、固相转变）和化学变化（如熔融、分解、氧化、还原、交联、脱水等反应），这些物质结构方面的变化必定导致其物理性质相应的变化。因此，通过测定这些物理性质及其与温度的关系，就有可能对物质结构方面的变化作出定性和定量的分析，还可以被用来确定物质的组分及种类，测定比热容、热膨胀系数等热物性参数。图1-1 材料随温度变化发生的反应国际热分析和量热协会（ICTAC, International confederation for thermal analysis and calorimetry）于2004年对热分析提出新的定义：热分析是研究样品性质与温度间关系的一类技术。我国于2008年实施的国家标准《热分析术语》（GB/T6425-2008）中对热分析技术定义为：热分析是在程序控制温度下（和一定气氛中），测量物质的物理性质与温度或时间关系的一类技术。经过一百多年的发展，热分析技术凭借其快速、高效、低成本的优异特点，应用领域不断扩展，已逐渐成为新材料研究、产品设计和质量控制的必备的常规分析测试手段。根据测定的物理性质不同，国际热分析与量热协会ICTAC将热分析技术分为9类17种，如表1所示：表1-1 热分析技术分类在实际应用中，热分析技术还和其他分析仪器进行联用，例如红外光谱、拉曼光谱、气相色谱、质谱等分析方法，通过多种方式对物质在一定温度或时间变化过程内对材料进行结构和成分进行分析判断。2 重点热分析技术介绍2.1 差热分析（DTA, Differential thermal analysis）差热分析(DTA)是一种利用试样和参比物之间的温差与温度或时间的关系来评价试样的热效应。DTA曲线的纵坐标为试样和参比样的温度差（∆T），理论上单位应该为℃或者K。但因为记录的测量值通常为输出的电势差E，根据温度差与E的关系（公式（1）），转换因子b不是常数，而是温度T的函数，且其他传感器系统也存在类似的情况。公式（1）中，测量的温度差与热电偶输出的电势差E成正比，一些分析软件中DTA采集的信号经常为电势差的单位（μV）表示。现在DTA主要用于热重分析仪（TGA）等的同步测量，市场上已经难觅单独的DTA仪器。2.2 差示扫描量热法（DSC, Differential Scanning Calorimetry）2.2.1 DSC原理及规定差示扫描量热法（DSC）是在程序控制温度下和一定气氛中，测量输送给试样和参比物的热流速率或加热功率(差)与温度或时间关系的一类热分析技术。测量信号是被样品吸收或者放出的热流量，单位为毫瓦(mW)，热流指的是单位时间内传递的热量，也就是热量交换的速率，热流越大热量交换的越快，热流越小热量交换的越慢，热流可由式（2）得到公式（2）中，∆T为试样与参比物的温度差，R_th为系统热阻，系统的热阻对于特定的坩埚、方法等是确定的。通过该公式就可以测得热流曲线，也就是DSC曲线。对DSC曲线上的峰进行积分就能够得到某个转变过程中样品吸收或者放出的热量。DSC信号的方向根据ICTA规则(∆T=Ts-Tr)，规定为吸热朝下放热朝上，一般图片上标有^exo。反-ICTA(∆T=Tr-Ts)规则为吸热朝上，放热朝下，一般图片上标有^endo，不同规则的DSC曲线如图2-1所示。当样品吸收能量，这个过程被称作是吸热的，例如熔融和挥发过程。当样品放出能量，这个过程被称作是放热的，例如结晶和氧化分解过程。图2-1 DSC曲线：(a) ICTA规则，吸热向下； (b) 反-ICTA规则，吸热向上相比之下，DTA仅可以测试相变温度等温度特征点，DSC不仅可以测相变温度点，而且可以测得热量变化。DTA曲线上的放热峰和吸热峰无确定物理含义，而DSC曲线上的放热峰和吸热峰分别代表放出热量和吸收热量。通过DSC可以检测吸热或放热效应、测得峰面积(转变或反应焓值∆H)、确认所表征的峰或其他热效应所对应的温度（如玻璃化温度Tg、结晶点Tc、熔点Tm）以及测试比热容Cp，也可利用调制DSC测得潜热、显热以及可逆热流和不可逆热流，通过动力学可以计算得到活化能Ea。公式（3）中，DSC测得的总热流是由两部分组成的，一部分是由于温度升高引起的显热流，样品没有发生结构的变化；热流的第二部分是由于样品内部结构变化引起的潜热流，ΔHp表示这个反应完全发生所吸收或放出的热量。其中，C_p为样品的比热容，β为升温速率，ΔH_p为反应过程的焓变， dα/dt表示这个反应进行的程度。通常我们把没有发生反应时的热流曲线叫做DSC的基线，其实就是显热流曲线。由于物质的比热容都会随着温度的升高而增大，因此随着温度的升高DSC曲线应该向吸热方向倾斜，这个斜率就取决于样品的比热容随温度的变化率。图2-2 DSC热流曲线示意图2.2.2 DSC分类DSC分为热流式和功率补偿式，当前热流式DSC较为普遍，梅特勒托利多DSC均为热流式。热流式差示扫描量热法（Heat-flux type Differential Scanning Calorimetry, 简称热流式DSC），又称为热通量式DSC，是在按程序控制温度和一定气氛下，给样品和参比品输送相同的功率，测定样品和参比品两端的温差∆T，然后根据热流方程，将温差换算成热流差作为信号进行输出。功率补偿式DSC是在程序控温和一定气氛下，使样品与参比物的温差不变，测量输给样品和参比物功率（热流）与温度或时间的关系。热流式DSC采用单炉体，而功率补偿式DSC采用两个独立的炉体，分别对试样和参比物进行加热，并有独立的传感装置。图2-3 (a)热流式DSC和(b)功率补偿式DSC测量单元示意图2.2.3 DSC典型曲线图2-4为典型的DSC测试曲线示意图。在测试开始曲线出现了“1 启动偏移”。在该区域温度状态发生瞬时改变，有恒温变为升温，启动偏移的大小与样品热容及升温速率有关。在“3 玻璃化转变”区，试样热容增大，出现了吸热台阶。“4 冷结晶”区产生放热峰，“5 熔融”产生吸热峰，通过对峰面积的积分可以得到结晶焓和熔融焓。随着温度升高后为“6 分解”。图2-4 典型的DSC测试曲线示意图：1 初始基线漂移与样品热容成正比；2 无热效应时的DSC曲线(基线)；3 无定形部分的玻璃化转变； 4 冷结晶； 5 结晶部分的熔融； 6 在空气气氛中氧化降解了解更多，请点击链接差示扫描量热仪(DSC)www.mt.com/cn/zh/home/products/Laboratory_Analytics_Browse/TA_Family_Browse/DSC.html2.3 热重分析（TGA, Thermogravimetric Analysis）热重分析（TGA）是在一定控温程序和气氛下，测量试样质量与温度和时间之间的关系，可以获得样品质量随温度的函数。在此之前，人们使用TG作为这项技术的缩写。通过TGA可以检测样品质量的变化（增重或失重），分析质量变化台阶，以及在失重或增重曲线中确认某一台阶所对应的温度。TGA信号对温度和时间的一阶微变，表示为质量变化的速率为DTG曲线，是对热重信号的重要补充，当DTG曲线峰向上时试样质量增加，曲线峰向下试样质量会减小。热天平是热重分析仪中的重要部件，热天平具有三种不同的设计：上置式设计：天平位于炉体下方，试样支架垂直托起试样坩埚；悬挂式设计：天平位于测试炉体上方，测试坩埚放在下垂的支架上；水平式设计：天平与炉体处于同一水平位置，坩埚支架水平插入炉体。根据天平可达到的分辨率，可将天平分为半微量天平（10 μg）、微量天平（1 μg）、超微量天平（0.1 μg）。当样品以不同方式失去物质或与环境气氛发生反应时，质量发生变化，在TGA曲线上产生台阶或在DTG曲线上产生峰。典型的热重曲线如图2-5所示。在“1 挥发”区可为部分组分（水、溶剂、单体）的挥发；“2 分解”具有明显的失重台阶为聚合物的分解；“3 切换气氛”后，在“4 炭燃烧”表现为炭黑或碳纤维的燃烧台阶；“5 残留物”区质量变化微弱，主要为灰分、填料、玻璃纤维等残留。图2-5 典型的TGA测试曲线示意图：1 挥发；2 聚合物分解；3 气氛切换； 4 炭燃烧台阶； 5 残留物了解详情，请点击链接热重分析仪(TGA)www.mt.com/cn/zh/home/products/Laboratory_Analytics_Browse/TA_Family_Browse/TGA.html2.4 热机械分析（TMA, Thermomechanical Analysis）热机械分析TMA测量样品在设定应力/负载条件，样品尺寸变化与温度变化的关系。在TMA测试中，样品受恒定的力、增加的力或调制的力；而膨胀法测量尺寸变化则是使用能实现的小载荷来测量的。TMA具有不同的形变模式如图2-6所示，依据试样尺寸和特性进行选择：膨胀模式(A)：是TMA常用的测量模式。测试基于温度的膨胀系数。通常测试时探头施加一个非常小的力于样品上。压缩模式(A)：这种模式下，样品受力更大。穿透模式(B)：其目的在于测试样品的软化点。拉伸模式(C)：薄膜和纤维套件用于进行拉伸模式测试。可以测试由于收缩或者膨胀产生的较长形变。三点弯曲模式(D)：用来研究刚性样品弹性行为的理想模式溶胀模式(E)：许多样品在接触液体时会产生溶胀。通过溶胀套件可以测定样品在溶胀时发生的体积或长度变化。体积膨胀(F)：液体同固体一样也会发生膨胀。图2-6 TMA不同形变模式根据不同的测试模式，我们可以使用TMA检测热效应（溶胀、收缩、软化、膨胀系数的变化），确定某表征的热效应的温度、测量形变台阶高度以及测定膨胀系数。TMA的典型测试曲线示意图如图2-7所示。图2-7 典型的TGA测试曲线示意图：1 玻璃化转变温度以下的热膨胀；2 玻璃化转变温度(斜率改变)；3 玻璃化转变温度以上的热膨胀；4 塑性变形了解更多信息，请点击链接热机械分析仪(TMA)www.mt.com/cn/zh/home/products/Laboratory_Analytics_Browse/TA_Family_Browse/TMA_SDTA_1.html2.5 动态机械分析（DMA, Dynamic Mechanical Analysis）动态热机械分析（DMA）是一种测试材料机械性能和粘弹性能的重要技术，可用于热塑性树脂、热固性树脂、弹性体、陶瓷和金属等材料的研究。DMA测试在程序控温和周期性变化的应力下，测试动态模量和力学损耗与时间温度的关系。在DMA测试中，试样受到周期变化的振动应力，随之发生相应的振动相变。除了完全弹性的试样外，测得的应变都表现为滞后与施加应力的变化。这种滞后成为相位差即相角δ差。DMA仪器测量试样应力的振幅、应变的振幅以及相位差这三个物理量。图2-8 周期性的力作用下应力与应变的关系应力与应变之比称为模量，DMA分析得到的结果为复合模量M^*，复合模量由储能模量和损耗模量组成：储能模量（M^'）：试样弹性特性的反应，是试样能否完全恢复形变的尺度损耗模量（M^”）：试样粘性特性的反应，是试样在形变过程中热量的消耗（损失）；损耗模量大表明粘性大，阻尼强。损耗因子（tanδ）：损耗模量和储能模量之比，反映的是振动吸收性，也称振动吸收因数。梅特勒托利多的DMA 1提供了六种不同的形变模式。对于特定的应用，适合的模式取决于测试需求、样品的性质和几何因子。包括以下六种测试模式：3-点弯曲模式(A)：这种模式用于准确测试非常刚硬的样品，例如复合材料或热固性树脂，尤其适合于玻璃化转变温度以下的测试。单悬臂(B)：这种模式非常适合于条形高刚度材料(金属或聚合物)。单悬臂模式是玻璃化转变温度以下的理想测试方法，而且是测试粉末材料损耗因子的推荐模式。双悬臂模式(C)：这种模式适合于低刚度的软材料，特别是比较薄的样品，例如膜材料。拉伸(D)：它是薄膜或纤维的常规形变模式。压缩(E)：压缩模式用于测试泡沫、凝胶、食品以及静态(TMA)测试。剪切(F)：剪切模式适合于测试软样品，例如弹性体，压敏胶，以及研究固化反应。图2-9 DMA不同形变模式图2-10为典型热塑性塑料的DMA曲线。在不同状态下储能模量和损耗因子会发生不同的变化。在玻璃态下，储能模量为几个GPa的数量级。损耗因子很小。在玻璃化转变区域，材料的机械性能发生了显著的变化：储能模量通常降低几个数量级并且损失因子显示出明显。 然后是材料在橡胶区域变得柔软。在更高的温度下，热塑性塑料变得更软并开始流动。这时储能模量进一步降低，而tanδ显着增加。因此DMA可以测定材料的玻璃化转变温度、机械模量、阻尼；粘弹性行为和力学性能，包括蠕变或应力松弛，研究样品的机械行为，以及交联固化反应等。图2-10 典型热塑性塑料的DMA曲线了解更多信息，请点击链接：动态热机械分析仪(DMA)www.mt.com/cn/zh/home/products/Laboratory_Analytics_Browse/TA_Family_Browse/DMA.html2.6 热分析技术应用总结针对不同的材料以及想要测试的属性或热效应，所采用的热分析方法也存在差异，未得到理想的结果需要根据实际样品情况和测试需求来选择不同的热分析方法。表2-1合适的热分析技术选择作者：热分析技术应用顾问 邵艳茹参考文献J.O. Hill. For Better Thermal Analysis and Calorimetry III [M]. ICTA, 1991.热分析术语[S]. GB/T 6425-2008.陆立明. 热分析应用基础[M]. 东华大学版社.E. Ezm, M.B. Zakaria. State of the art and definitions of various thermal analysis techniques. [in] Thermal Analysis, 2021, 1-39.刘振海, 陆立明, 唐远旺. 热分析简明教程[M]. 科学出版社.UserCom, Mettler Toledo International Inc.

Molecular Devices新品发布Molecular Devices 今年重磅推出新一代高内涵成像分析系统 ImageXpress Confocal HT.ai，其具有现代化的机器学习的分析功能。具有 7 色高强度激光光源和机器学习功能的可扩展、高通量的高内涵筛选解决方案。01:18____ImageXpress Confocal HT.ai 智能化共聚焦高内涵成像分析系统采用了具有 8 个成像通道的 7 色激光光源，实现了高扩展性的多通道成像分析，同时通过缩短曝光时间保持高通量。水镜系统提高了图像分辨率，并将像差最小化。这些特点让科学家可以看到更深入的厚组织样品，提升了 3D 类器官和球体实验的成像强度和通量，展现了更多其他技术无法洞悉之密。同时，MetaXpress  软件和 IN Carta  软件的强大组合简化了高级表型分类和 3D 图像分析的工作流程，具有机器学习的分析功能和直观的用户界面。__主要特点实验检测更灵活18 个激光激发成像通道提供更大的实验扩展灵活性，以及更高的图像亮度。同时，独特的 QuickID 技术可以灵活地获取各种格式和大小的图像，并且可以根据不断变化的研究需求进行缩放。自动化水镜系统提供了更大的数值孔径和匹配的折射率，以提高分辨率和减少像差。高通量获取更高质量图像2更高的激发功率提供了更高的信号，更短的曝光时间，更快的 3D 样品采集速度。AgileOptix 转盘共聚焦技术消除了失焦光线的干扰，并提供了对厚组织样本更深入的了解。更短的曝光时间可实现高达两倍的扫描速度提高。利用激光进行 CFP 和 YFP 的 FRET 实验扩展了研究可选择性。“智能”加速分析3IN Carta 图像分析软件可进行复杂的分割和分类。Phenoglyphs 模块提供了一种强大的可训练分类，而 SINAP 提供了任何图像类型的可训练分割。使用 MetaXpressPowerCore 软件进行多线程并行处理，将分析速度提高最高可至 40 倍。将时间从几个小时减少到几分钟，消除了 3D 分析作为瓶颈的问题。精准、灵活、高效、简便，ImageXpress Confocal HT.ai 智能化共聚焦高内涵成像分析系统助力探索更多可能。点击“阅读原文”下载产品宣传册，希望获取更多信息，请在公众号或留言区留言。

自50多年以前就开始为制药企业生产定制的制冷设备。如今，LAUDA已针对制药冻干设备的应用开发了一套低温温控系统。借此可以在 -80 °C 下和缓地冷冻药物。这份订单来自 Martin Christ Gefriertrocknungsanlagen GmbH 公司，该公司是世界的冻干机公司之一，在这一领域拥有70多年的经验。Martin Christ 相信 LAUDA 的专业技术实力能够可靠地提供低温设备。来自 LAUDA HKS部门的Kryopac 二级回路温控系统的专家们，完全按照客户的要求进行规划和制造，提供了所需的冷却能力。 在全球范围内，药品和疫苗对于疾病治疗和人类健康都是最基本的。鉴于许多药物在水中溶解后保质期很短，所以制药行业为了能长期保存药物而使用对产品和缓的冻干法。为了给一家国际性的制药企业制造冻干设备，Martin Christ 很快就找到了LAUDA。除了 LAUDA 的全面专有技术之外，从多年前就开始的成功合作经验也把两家企业紧密的联系在一起。“我们是超低温温度控制专家，在该领域积累了多年的宝贵经验”，LAUDA HKS部门的项目经理Ralph Herbert 强调道。Kryopac制冷系统适应了终端客户的特殊要求。图中显示了完整的系统。（图片：LAUDA） 液态氮可以使温度低至 -115 °C LAUDA Kryopac 二级回路温控系统为冻干机提供精确的温度控制，通过它可以安全地掌控低温反应。对于这台制冷设备特别重要的是，单独控制隔板和冰冷凝器的温度。其核心就是Kryopac 系统 –一台专门为液态氮的挥发而研发的热交换器。液态氮在 -196 °C 时沸腾，因此非常适合作为制冷剂用于要求最低温度的应用。根据Kryopac 设备的结构，在二次冷却回路中可以达到 -115 °C。这样就可以快速而准确地达到冻干机所需要的-80 °C。液氮也是一种不易燃的制冷剂，不仅是终端客户选择，而且也是一般制药行业选择。液氮的其它优点还包括经济因素以及安全和环境技术因素，如低投资成本和无废料。视应用的技术要求而定，可以通过调整 LAUDA 所设计的控制系统来减少氮的需求，并因此明显降低运营成本。使用液氮作为制冷剂允许温度为-196°C。这意味着很快就能达到所需的-80°C。（图片：LAUDA）Kryopac 系统的加热技术源自经受考验、被众多客户所推崇的 LAUDA 传热单元。它产生经过温度控制的液体流，并且以紧凑、完全绝缘以及可以连接开关柜的系统状态交付。优点：不存在热交换器内的冷冻问题。对于 MartinChrist 的客户来说，精确的温度控制、紧凑的结构和极高设备可用性是特别重要的。LAUDAKryopac 二级回路温控系统毫无问题地满足了这些要求。冻干法充分利用了物理现象 因为原始物质的化学性质不会变化，所以冻干法是一种特别具备保护性的保存方法。这样，制药产品中所有的有效成分都可以保持不变。此种类型的保存方式首先应用在实验室、食品工业或考古学的样品制备方面，例如例如保存湿皮革或木材。 Kryopac 设备的冷却系统在- 80°C下以30 kW的冷却能力对装有药物的容器进行冷却，并在两个半小时内冻结药物。在抽成真空的过程中，因生成真空而造成的排气过程，会重新导入热量。因此产生一种物理现象，被称作升华：之前没有液化，但冷冻的水会挥发。药物直接从冷冻状态被干燥。由此产生的水蒸气以冰晶体的形式沉淀在冻干机的冰冷凝器上。Kryopac设备将冰冷凝器的温度保持在 -80 °C。一个完整的冻干过程一般要持续 48 小时。 在将冻干机交付终端客户之前，Kryopac 设备首先在 LAUDA 接受完整的检测，然后作为完整的系统在 Martin Christ 再次接受全面的测试。然而，这并不是合作的终点。鉴于该项目的成功合作和实施，Martin Christ 已订购另外两套LAUDA Kryopac 二级回路温控系统。可以通过一个显示屏直观地设置和操作 LAUDA Kryopac 设备。（图片：LAUDA）处于打开状态的LAUDA Kryopac 二级回路温控系统。交付前，将手工对所有部件进行细致的绝缘处理。（图片：LAUDA）北京德泉兴业商贸有限公司为LAUDA劳达授权代理商。德国劳达在新型的液体恒温设备及高精度的测试领域，劳达处于全球性的行业。劳达具有将近60年的设计生产经验，独特的产品系列覆盖了从全部紧凑型实验室恒温浴到工业级循环冷却设备，可以完全根据客户的需求设计出制冷能力超过400 kW的冷却/加热系统。LAUDA是一家可以确保在全部温度范围内提供合适工作温度的公司。其全球客户超过10,000家。公司在全球100多个国家设有代表处，在 7 个国家设有12家制造厂，在19个国家设立了销售和服务机构，并且具有全球性的代理商网络。公司总部设在德国的韦茨拉尔 (Wetzlar)。关注德泉兴业，了解更多实验室仪器实验信息！

胃癌是我国最常见的消化系统恶性肿瘤之一，患病率高，进展较快，严重影响人民健康。目前，由于胃癌的肿瘤异质性和化疗药物的耐药等问题，进展期胃癌综合治疗效果欠佳，因而开发新型胃癌治疗药物意义重大。曲妥珠单抗（trastuzumab）通过与HER2受体的细胞外区域结合， 抑制HER2同源二聚，从而阻止HER2 介导的信号转导，并且促进抗体依赖的细胞毒性作用，导致表达HER2 的细胞死亡，在胃癌中显示出生存获益。但是，许多接受曲妥珠单抗治疗的HER2阳性胃癌患者由于细胞敏感性不足和耐药性导致患者的用药反应差，对于临床治疗仍然具有巨大的挑战。2021兰州大学第二医院萃英生物医学研究中心焦作义团队在Nature Communications发表题为“Hyperactivation of HER2-SHCBP1-PLK1 axis promotes tumor cell mitosis and impairs trastuzumab sensitivity to gastric cancer”的研究论文，报道了HER2下游存在的一条新的信号通路HER2/Shc1/SHCBP1/PLK1，该信号通路的异常激活与曲妥珠单抗耐药密切相关。并据此筛选发现了新型的SHCBP1-PLK1复合体的抑制剂茶黄素-3, 3’-双没食子酸（TFBG），可显著增敏曲妥珠单抗治疗胃癌的疗效。如图1所示，HER2和其他表皮生长因子受体（ERBBs）始终使用Shc1（一种细胞内支架蛋白）募集细胞质靶标激活下游途径，包括促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）途径，并通过增加细胞增殖，转移和侵袭来促进肿瘤发生。SHCBP1是一种Shc1结合蛋白，在HER2激活后与支架蛋白Shc1脱离。释放的SHCBP1在Ser273磷酸化后进入细胞核，从而对HER2级联反应，然后通过与PLK1结合促进有丝分裂相互作用因子MISP的磷酸化来调控细胞有丝分裂。同时，Shc1被募集到HER2进行MAPK或PI3K途径激活。HER2-SHCBP1-PLK1这一关键的信号通路驱动曲妥珠单抗敏感并在治疗上具有针对性。图1 胃癌治疗靶点HER2下游新的信号通路HER2/Shc1/SHCBP1/PLK1据此研究人员采用虚拟筛选和SPR的方法，寻找抑制SHCBP1–PLK1结合的天然产物。在用Biacore进行小分子筛选时，将PLK1偶联到CM5芯片上，40个小分子化合物以100uM的浓度进样，经过分子量校正后通过与阳参的对比可以得到候选的小分子抑制剂（图2）。图2 Biacore对40个小分子化合物进行亲和力筛选最终研究人员选择了亲和力最强的小分子TFBG，与PLK1的亲和力为4.67 ×10-7M（图3）。TFBG对SHCBP1–PLK1互作的抑制也通过后续的Co-IP和细胞FERT实验得到了验证。在动物实验中，TFBG治疗与曲妥珠单抗联合显示出显著的生长抑制和肿瘤消退，表明在HER2阳性胃癌治疗中的潜在临床应用。图3 Biacore检测TFBG与PLK1的亲和力回顾整篇文章，研究人员采用LC-MS/MS、免疫组化、FERT、原位杂交等多种方法明确了HER2下游新的信号通路HER2/Shc1/SHCBP1/PLK1，然后以抑制SHCBP1–PLK1互作为目标，找到了小分子抑制剂TFBG，最后在细胞实验和动物实验中，TFBG联合曲妥珠单抗的方案都显示了显著的抗肿瘤效果，为胃癌临床靶向治疗提供了新思路，也对天然药物研发产生了有力推动作用。图4 文章整体思路高灵敏度的Biacore在小分子抑制剂的筛选和表征中可以输出可靠的数据，无人值守的操作能够满足高通量筛选的需求，兼具了数据质量和筛选效率。智能的筛选分析模块可以自动对样品进行分子量校正，方便直接用响应值的高低进行比较，并且可以根据需求自动进行排序或者划分阈值线，直观地呈现筛选结果，极大地提高实验效率，保证在药物开发过程中的高效性。Biacore，for a better life参考文献：Shi, Wengui et al. “Hyperactivation of HER2-SHCBP1-PLK1 axis promotes tumor cell mitosis and impairs trastuzumab sensitivity to gastric cancer.” Nature communications vol. 12,1 2812. 14 May. 2021, doi:10.1038/s41467-021-23053-8关注德泉兴业，了解更多实验室仪器实验信息！

2022年3月9日，由北京德泉兴业商贸有限公司举办的“2021年度BMI产品线奖励大会”在北京丰台梦都酒家二层多功能会议厅顺利举办，北京德泉总经理祁连军、销售总监姜欣然、产品部经理卢晓冰及销售团队经理刘昊宇、周涛、田伟及各位销售和技术支持等出席了大会；Cytiva思拓凡作为德泉的优质厂商，长期以来一直与北京德泉保持着密切和良好的合作关系，参加本次大会的有Cytiva产品支持团队、北区销售团队及渠道部团队等相关领导和人员。本次大会以感谢Cytiva长期以来对北京德泉的支持、表彰销售在2021年对BMI产品线的大力推广、激励销售在2022年继续努力为目的，取得了圆满成功。在会上，祁连军总经理回顾了过去一年，在公司全体销售及各部门人员的共同努力下，北京德泉整体销售业绩获得了突飞猛进的发展，同时也表示非常感谢大家的辛苦付出，在Cytiva等各大合作品牌的共同支持下，希望德泉在新的2022年继续稳中进取，期待未来可以取得更好的成绩。2021年，经过大家共同的努力，Cytiva BMI产品线在北区、南区、东区的科研市场占比quan guo di yi，取得了可喜可贺的成果，北京德泉作为Cytiva的优质代理商起到了很大的推动作用。BMI产品线市场同质化竞争虽较为严重，但在整个科研环境的良性转变下，对我们来说是挑战也是机遇。希望2022年在大家共同的努力下，BMI产品线可以继续保持此优异成绩。本次大会共有10名销售代表获奖，分别是姜欣然、刘昊宇、周涛、田伟、马源、李伟、李阳、张嘉楠、刘天骄、张桂玉，他们共同谱写了北京德泉2021年BMI 产品线的优异成绩，不仅实现了自己的进步，也为用户提供了更好的服务和便利；希望在2022年，能带动更多销售进步和发展。BMI产品线为生物分子实验提供了一整套的解决方案，包括有：蛋白质免疫印迹实验Western Blot所需的整套电泳（垂直电泳SE系列、全湿和半干转印TE系列、电源等）、化学发光凝胶成像一体化成像仪IQ500、超灵敏多功能成像仪IQ800、激光扫描成像仪Typhoon等，覆盖了基因、蛋白、组织、生物体等全方面的成像需求，是诸多用户认可的实验室优质设备；未来，北京德泉也会继续携手Cytiva以优质的售前、优质的产品、优质的售后为用户提供更好的服务。北京德泉兴业商贸有限公司是一家以用户为中心、致力于帮助用户解决问题的仪器代理商，在总经理祁连军的带领下已走过了20个年头，在全国各地均有分公司成立；目前合作有Cytiva思拓凡蛋白纯化多功能成像、BECKMAN流式细胞仪离心机、Leica莱卡显微镜、IKA实验室分析仪器、LAUDA水浴、MERCK纯水、梅特勒天平酸度计等诸多知名品牌产品，可以帮助用户提供多套实验室整体解决方案；公司配备有专业的技术支持团队、售后维修团队、销售工程师团队及商务、内勤等多部门，是一个有实力、有活力、有激情的大家庭，欢迎与我们联系

什么是ChIP技术？1.1简介染色质免疫共沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation, ChIP）是一种检测在体内自然染色质环境下蛋白和DNA相互作用的有效方法。这种技术广泛应用于检测特定基因调节蛋白结合在基因组中的具体位置或者基因调节区域和蛋白的修饰是否相关。。因其能真实、完整地反映结合在DNA序列上的靶蛋白的调控信息，是目前基于全基因组水平研究DNA-蛋白质相互作用的标准实验技术，日益成为研究真核细胞中转录调控情况的重要途径。1.2技术原理在活细胞状态下，通过在特定时间点上用甲醛交联等方式固定蛋白质－DNA 复合物，相当于这一时间点上细胞内蛋白和DNA相互作用的关系被瞬时“快照（snapshot）”下来。并将其用Bioruptor超声波破碎仪随机超声打断为一定长度的染色质小片段，然后通过免疫学方法将蛋白质-DNA复合物与特定DNA结合蛋白的抗体孵育，将与抗体特异结合的蛋白-DNA复合物洗脱下来，最后将洗脱得到的特异DNA与蛋白解交联，得到特异性地富集目的蛋白结合的 DNA 片段，通过对DNA片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。1.3适用研究1.31 筛选调控蛋白在基因组上的结合靶点：针对转录因子、DNA/RNA 聚合酶、转录复合物等调控因子蛋白进行特异性的富集，分离纯化与之结合的靶 DNA 片段并测序，分析筛选到准确有效的靶位点、靶基因数据；1.32 揭示差异化表观遗传变异的原理：通过对不同表型组织内组蛋白、转录因子蛋白及其他结合蛋白进行染色质免疫共沉淀测序并定量分析靶基因表达调控水平或针对同种组蛋白进行甲基化、磷酸化、泛素化修饰所导致的结合位点变异进行分析，即可准确揭示差异化表观变异原理；1.33研究表观遗传变异疾病：借助染色质免疫共沉淀测序技术结合生物信息分析揭示由蛋白与 DNA 相互作用变异而引起的疾病的原理，明确表观遗传修饰在癌症等表观遗传变异疾病的发生发展过程中的具体作用机制。1.4超声打断为何推荐要使用Bioruptor超声波破碎仪比利时Diagenode生产的Bioruptor plus非接触式细胞破碎仪，其超声源是一块附着在水槽下面的半导体金属块，绝非普通的压电陶瓷。其独特的ACT( Adaptive Cavitation Technology) 聚焦超声技术以及高效的超声效能，能快速处理各种样品，得到满意的超声结果。仪器可选配1.5ml适配器（如上图），可同时处理6个样本，适配器中每个样本的填装体积以及浓度，更是针对ChIP或ChIP-seq技术特别优化过的，与实验室所需的上样量与上样浓度完全衔接，符合实验室需求。自带电磁阀式冷循环机，与超声仪主机交错启动，可保证在处理测序DNA或chromatin样本片断化时，让样本处于恒定冰冷水浴条件下，同时完全不干扰超声波传到到样本的效率，其高性价比、高通量、高功率、低干扰的优异设计，都是为了让实验的结果更正确、重复性更佳。此外更考虑到实验与应用的多元性，厂家特别设计出适合极小量样本的0.65ml适配器，一次可以处理12个样本，是市面上能处理体积最小的适配器，完全是让珍贵样本也能进行ChIP实验特别订制的，也彻底解决了无法处理微量珍贵样品进行ChIP或测序实验的困境。仪器还含有自动过热断电保护及仪器寿命监控系统，可确保仪器在操作过程中的正常运作以及保护测序样本不过热产生质变的危险，可让仪器正常使用情况可超声效率维持长久不衰减。北京德泉兴业商贸有限公司为Diagenode授权代理商。Bioruptor厂家提供了各种实验的方案技巧，可以官网免费下载，或者联系代理商获取，减少因为摸索超声条件而浪费了得之不易的样本。北京德泉兴业是一家以代理进口实验室仪器为主的专业设备公司，自成立以来，一直致力于提升国内实验室硬件水平以及为客户提供高效的实验解决方案。德泉兴业的经营范围涵盖了生命科学、理化分析、生物制药以及当下最为关注的食品安全和环境保护，为高校、医院、科研院所等提供优质产品和服务。

Integral系列型号特色一览LAUDA INTEGRAL T温度：-30℃~150 ℃详情：紧凑的半密闭循环系统强劲的浸入式压力泵调节压力限制值的旁路阀独立的内循环系统优势：快速通气和排气高输出压力和工作压力对于压力敏感的应用提供保护即使通向负载的液压回路受阻，在旁路阀的加持下，设备功能仍不受影响LAUDA INTEGRAL XT温度：-90℃~320 ℃详情：设备参与温度变化的液体量小液压系统带有冷油层密封强劲的磁力耦合变量泵集成可调的旁路阀调节内部流量优势：快速冷却和加热循环温度范围宽和较长的导热液体寿命提供8个级别的变量泵保护压力敏感的负载应用即使在非常高的压力损失和极低的流量下依然能保持优异的性能稳定 更轻松Integral工艺过程恒温器Integral系列的优点远程本地按键操作二合一01设备上直接操作:设备皆标配有TFT显示屏，可直观进行温度控制。02通过Command远程触屏控制器操作:可选配的Command触屏控制器可以让您在最远50米的地方通过Libus线缆连接来进行控制操作。03通过桌面和移动设备进行操作:您可以将Integral工艺过程恒温器集成到贵公司的网络中，并通过智能手机、平板或桌面电脑上的应用程序或者网络浏览器登陆设备控制。集成旁路阀旁路阀为您的温度控制工作提供更多的灵活性。标配集成的旁路阀可以对压力和流量进行优化，从容的调节流量以满足众多不同的应用。LAUDA INTEGRAL T当调节旁路阀时，设备显示屏上的压力数值可以实时看出变化情况。强劲有力、结实耐用的浸入式压力泵确保操作过程安全可靠,无泄漏。独立的内部导热液体循环泵确保了加热和冷却功率输出。LAUDA INTEGRAL XT针对那些具有较高管路压力损失的应用，旁路阀可以增加内部流量从而确保快速、动态的加热或制冷。针对那些压力比较敏感的应用，也可以在旁路阀的帮助下得到所需要的安全压力限制值。4 大应用领域关于 LAUDA我们是 LAUDA——精确温度控制领域的专家。我们的温度控制设备和加热/冷却系统是许多应用的核心。作为全方位服务供应商，我们在研究、生产和质量控制中保证使用温度。我们是值得信赖的合作伙伴，特别是在汽车、化学/制药、半导体和实验室/医疗技术行业。65年来，我们每天都以崭新面貌在全球范围内提供我们专业咨询和创新的环保设计方案，满足我们的客户。

喜迎东奥叮咚~各位老师和小伙伴充实的学期结束后，多彩的寒假准时到来，祝愿大家都能拥有一个快乐的假期！寒假期间也要记得注意出行安全，遵守疫情防控要求。也祝福参与冬奥志愿的师生度过一个难忘的冬奥年！

ÄKTA™ pilot 600是一款可实现GMP和非GMP不同环境需要的全自动液相层析系统（图1）。它作为一款中试型设备，可进行从小试到生产的过渡，并实现高至40倍的工艺放大，使得工艺放大更快捷。ÄKTA™ pilot 600作为 ÄKTA™ 层析系统系列产品的一部分，非常容易实现小试放大和中试生产。今天，我们将结合实际应用案例带领大家了解 ÄKTA™ pilot 600。图 1. ÄKTA™ pilot 600 系统提供两个型号，红色标签为非 GMP 版本和蓝色标签 GMP版本ÄKTA™ pilot 600 是一款灵活可变的中试层析系统,目前该产品提供两种型号， 分为非 GMP 型号和GMP 型号。非 GMP 型号适合非 GMP 环境的工艺开发，而 GMP 型号适合 GMP 环境的规模放大。由于采用模块化设计，两种型号均能根据特定需求进行相应配置。非 GMP 型号具有标准配置，也可以使用升级模块，可依据客户的需求轻松进行升级。当需求发生改变时，可以通过简单地添加或移除该模块，完善系统设置。非 GMP 型号提供通用产品文档和操作说明书。如有要求，可以提供验证文件。GMP 型号系统在确认订单时确定最终的设备配置。系统交付时已经完成设备的安装、校准和性能测试。对应的工业级别文件套装也会随设备仪器到货，该文件根据客户订购的设备配置进行设计，符合 ASME-BPE 行业标准，适用于 GMP 环境使用的卫生级设备，还可以提供产品验证文件及变更控制通知服务。在将来任何时间，系统配置还可以使用自定义升级包进行升级。ÄKTA™ pilot 600采用UNICORN™ 软件，操作简便，易于上手。交互式操作界面可以实时查看系统状态或进行状态的修改，并且可以针对异常参数发出报警。并且该系统可以支持内径从26mm到200mm层析柱的使用，尤其是与 Axichrom™ 智能层析柱配合使用时，可通过专用装柱接口实现智能装柱，有助于保障装柱成功率。首先，我们先了解一下 ÄKTA™ pilot 600  智能层析系统的5大特点：01模块化设计当客户需求随工艺优化发生变化时，系统可以添加对应的功能模块。可以由客户自己或 Cytiva工程师轻松完成模块装配。添加或删除的模块会自动更新到系统运行界面当中。当工艺步骤中需要外接传感器时，可以通过I/O box进行扩展，该设备最多连接两个I/O box，用于连接至少四个模拟或八个数字的外部传感器或设备，图2为配置ÄKTA™ pilot 600 GMP 型号的PID。图2.高配置ÄKTA™ pilot 600 GMP 型号的PID02GMP符合性ÄKTA™ pilot 600所有过流部件的材料实现全流程可追溯，并可提供可追溯材料的证明文件，保证过流部件材质的安全性。ÄKTA™ pilot 600GMP 型号还可提供符合ASME-BPE认证标准的行业文档（表1），保证其卫生级的设计标准。所使用的UNICORN™软件开发流程依据GAMP5和21 CFR Part11进行设计，而且经过权威的第三方认证，保证其在GMP 环境下使用的合规性。表1. 符合 ASME-BPE 标准的 ÄKTA™ pilot 600 GMP 型号文档内容示例03简洁直观的流程图UNICORN™ 中的流程图在每个操作节点仅提供必要信息，帮助快速浏览系统功能、操作和报警概述。流程图中绿色流路表示有流量的开放式流路，绿色虚线表示无流量的开放式流路，灰色表示封闭的流路（图3）。您可以从流程图直接给出指令，实时进行变更。为简化操作和方便控制，关键部位提供图形接口，如层析柱阀门可显示流路方向。图3.UNICORN™ 中的流程图实时显示流路状态及所连接的模块04良好的线性放大ÄKTA™ pilot 600的流速和压力范围可兼容从内径 26 mm 至 200 mm 的层析柱，实现生产规模的40倍放大。通过UNICORN™ 软件还可实现命名、编程阶段、流路图、在线检测器等功能和其它实验室级别的 ÄKTA™ 系统一致。可以大大简化工艺转移和操作，还可以将小试得到结果和方法进行无缝放大。下图为实际应用案例，使用MabSelect™ PrismA蛋白A层析填料， 将生产规模放大20倍，从70 mL的HiScale™ 26层析柱放大到 1400 mL 的AxiChrom™ 100层析柱（图4）。图4.使用ÄKTA™ avant 150在HiScale™ 26层析柱上和使用ÄKTA™ pilot 600在AxiChrom™ 100层析柱上进行mAb捕获的层析叠加图。最终实现了从使用ÄKTA™ avant 150在HiScale 26层析柱 上进行小规模工艺开发，到使用ÄKTA™ pilot 600在AxiChrom™ 100层析柱上进行放大，实现了20倍的多维度放大（表2）。表2.使用ÄKTA™ avant 150的HiScale™ 26层析柱和使用ÄKTA™ pilot 600的AxiChrom™ 100层析柱的回收率和杂质去除对比05简单的方法编辑UNICORN™ 软件提供模块编程和文本编程两种编辑方法，模块编程提供多种预定义方法。您也可以使用预编程的阶段模块，轻松创建新方法。编辑方法时，可以将阶段模块拖拽 进行编程，方便编辑与总览。这种创建方法适合绝大多数运行和日常操作，比如我们以装柱为例。您只输入需要装填的层析介质种类、Axichrom™层析柱的规格、筛网规格材质以及装柱高度（图5）。模块编程会把其它的装柱参数进行默认展示，按照要求我们调节层析介质均浆浓度，将层析介质均浆缓慢引流倒入Axichrom™层析柱，按照（图6）进行连接管路及柱位，就可以实现一键智能装柱了。同时编辑好的阶段模块， 可以被修改并保存为定制的阶段模块，可进行修改，并可进行用户自定义阶段保存，提高定制化程度。此外，具体工艺操作也可以使用文本编程（图7）。比如，我们参考小试工艺进行优化，把体积流速改为线性流速，进行编程方便今后的放大。通过运用 Watch 的监测功能， 还可以对工艺过程进行各种逻辑编程。图5.模块编程方法进行智能装柱图6.连接管路与对应的柱位图7. 文本编程方法进行线性流速设定接下来我们为大家简单介绍 ÄKTA™ pilot 600 的使用。准备工作ÄKTA™ pilot 600系统公用工程检查（220V 电源）管路连接检查（入口与溶液瓶连接，柱位与层析柱连接，排废口与废液瓶连接，收样口与收集瓶连接）溶液检查（纯化水、纯化缓冲液、清洗液等）ÄKTA™ pilot 600系统运行在准备工作完成后我们将启动层析系统。首先打开仪器的主电源后，电源指示灯保持常亮状态，说明仪器准备就绪。电脑开机，双击桌面上 UNICORN™ 图标，进入操作界面，待仪器自检完毕后可以使用。将系统 pH 电极位置上的假电极拆下并更换为 pH 电极，并进行pH校准。之后柱位切换为 Bypass，设置合适的流速与流路，确保所有溶液与系统连接管道内以及系统管路内无气泡。打开气泡陷阱（air trap）上的手阀，将所用溶液采用fill命令，填充满气泡陷阱，然后关闭手阀，再将命令改为inline 。气泡陷阱可有效保护层析柱，防止柱效降低。再根据具体工艺需求进行平衡、上样、洗脱、清洗等操作。对于需要执行自动方法生产的客户来说，可以使用 UNICORN™ 强大的方法编辑功能，实现从排气到清洗保存过程的全自动运行。连接上已经装填好的层析柱，在柱效测试合格后，就可以进入正常的实验和生产过程了！

11.11双十一狂欢节通知:德泉兴业双十一优惠活动直播，11月11日下午13:30，届时会有IKA漩涡混匀，离心机，瑞宁移液器，Cytiva电泳，MD微孔板，贝克曼离心机限量抢购，SI漩涡混匀器，满减优惠券，买就赠耗材等限量抢购，优惠力度非常大！扫描下图二维码进入直播间，期待各位来捧场！双11直播间大放送NEW二维码识别进入直播间免费领礼品活动

走进北医三院基础医学中心走进北医三院基础医学中心，疾病相关外泌体定量分析平台，超速离心机技术及其在外泌体研究中的应用，感谢老师对德泉的信任和对贝克曼和希森美康的认可。北医三院基础医学中心-现场会议内容超速离心机技术及其在外泌体研究中的应用主讲人：王星宇-贝克曼产品经理-北京德泉兴业商贸有限公司疾病相关外泌体定量分析平台主讲人：王晓丹-希森美康医用电子有限公司贝克曼Beckman Allegra X-15R 台式冷冻离心机文末活动Activities introduce活动介绍参加活动方式：评论区留言您使用过贝克曼离心机的型号和所在地址（发送的留言仅供后台查看不对外公布）活动内容：1）参与抽奖（礼品为茶具套装，金士顿U盘，计时器，保温杯）2）免费维修保养及性能检测3）免费离心机使用培训

图1：图中显示了间接免疫荧光的典型工作流程，上皮细胞粘附在盖玻片上生长。培养后细胞被固定，因此用化学交联剂（如甲醛）将其杀死。再用清洁剂进行透化处理，使抗体穿过细胞膜。用正常血清、奶粉或牛血清白蛋白来进行封闭，可减少抗体与非靶向结构的非特异性结合，从而减少假阳性信号。接下来与一抗进行孵育，特异性识别靶向分子上的表位。在第二个培育步骤中，应用荧光耦合二抗，与一抗结合来实现靶向结构的可视化观察。抗体孵育后，用dapi或hoechst等嵌入dna的染料进行细胞核染色。在显微镜载玻片上涂有封固介质（例如mowiol或prolong gold）的盖玻片后，if即已准备好进行显微镜观察。图2：有两种方法通过免疫荧光显示靶向结构：在两种变体中，一种特异的一抗用于识别靶分子上的特定表位。在此图中，目标分子由几个相同的蛋白质亚单位（=大分子）组成，因此会在每个亚单位上表现出几个相同类型的表位。为方便简化，此处只描绘了一个表位。表1：此处的多色间接if示例演示了如何在同一个细胞中同时标记三种不同的蛋白质。三种蛋白质的一抗必须来自不同的物种，以便用三种不同的荧光色素耦合二抗来进行检测。二抗的荧光色素必须在波长光谱上有所区分才能在显微镜下进行不同的分析。图一 常见荧光蛋白和荧光素的发射光谱图二 在近红外一区，利用新型荧光标记可以获得更多信号。cos-7细胞图像，使用sir-actin（657 – 740nm探测范围）、af750-tom20（760 – 790nm）、af790-tubulin（810 – 850nm）标记。样本由苏黎世大学的jana döhner和urs ziegler提供。左：使用传统的gaasp探测器。右：使用stellaris 8。 点他，点他cell dive超多标免疫荧光应用 | 基于空间蛋白组学建立结肠癌预后判断新方法点击查看多色扩展 更少妥协 | stellaris白激光点击查看徕卡显微系统leica microsystems  徕卡显微系统是全球显微科技与分析科学仪器之领导厂商之一，总部位于德国维兹拉(wetzlar, germany)。主要提供显微结构与纳米结构分析领域的研究级显微镜等专业科学仪器。自公司十九世纪成立以来，徕卡以其对光学成像的追求和不断进取的创新精神始终得到业界广泛认可。徕卡在复合显微镜、体视显微镜、数码显微系统、激光共聚焦扫描显微系统、电子显微镜样品制备和医疗手术显微技术等多个显微光学领域。  自创立至今，徕卡的光学足迹已遍及全球100多个国家。目前，徕卡在欧洲、亚洲与北美有6大产品研发与生产基地，在20多个国家设有销售或服务支持中心，以及遍布全球的经销商服务网络。德泉兴业合作品牌 期待更多交流与您相见好玩的、有用的、前沿的助力您获取生命科学研究及药物研发解决方案关注德泉兴业，了解更多实验室仪器实验信息！

  在2021年5月29日至5月31日，清华大学医学院基础医学系在北京举办“2021年清华大学医学院基础医学系博士生论坛”，北京德泉兴业商贸有限公司作为赞助商携手合作品牌“Leica徕卡显微镜”助力中国医学研究，本次会议邀请来自清华大学医学院的专家学者和博士研究生进行主题报告，共同分享研究成果，研讨基础医学和生命科学领域的新动向和新问题。  为期三天的会议为来自清华大学专家学者及博士研究生搭建了一个紧密高效，同时轻松愉悦的沟通环境，通过叙述主题报告及问答互动的形式，各位老师从学生角度出发，启迪学生如何构思论文、思考论点和增加数据积累，从而更好提升自己的研究成果及论文质量。与此同时，老师言传身教，在会议现场亲自示范，分享经验，引导学生以这样的思路为出发点进行学术研究，使所有参会者都收获满满，得益颇多。清华大学的教育理念和教学模式的确卓越非凡，深具借鉴意义。Leica徕卡显微系统特邀报告主题：Leica时间：2021年5月29日13：30~14：00报告人：徕卡显微系统北区生命科学应用主管德泉兴业携手Leica显微镜进行实验技术应用分享 徕卡显微系统Leica Microsystems  徕卡显微系统是全球显微科技与分析科学仪器之领导厂商之一，总部位于德国维兹拉(Wetzlar, Germany)。主要提供显微结构与纳米结构分析领域的研究级显微镜等专业科学仪器。自公司十九世纪成立以来，徕卡以其对光学成像的追求和不断进取的创新精神始终得到业界广泛认可。徕卡在复合显微镜、体视显微镜、数码显微系统、激光共聚焦扫描显微系统、电子显微镜样品制备和医疗手术显微技术等多个显微光学领域。  自创立至今，徕卡的光学足迹已遍及全球100多个国家。目前，徕卡在欧洲、亚洲与北美有6大产品研发与生产基地，在20多个国家设有销售或服务支持中心，以及遍布全球的经销商服务网络。清华大学医学院基础医学系博士生论坛赞助商证书颁发   未来德泉兴业将会积极整合资源与专业技术，推动健康和生命科学的发展进程，为构建人类命运共同体贡献智慧和力量。德泉兴业合作品牌 期待更多交流与您相见好玩的、有用的、前沿的助力您获取生命科学研究及药物研发解决方案关注德泉兴业，了解更多实验室仪器实验信息！

点击上方蓝色文字关注我们凝心聚力，赢在未来5.19贝克曼生物制药用户交流会圆满结束   德泉兴业讯 2021年5月19日下午13:00，为期半天的“贝克曼生物制药用户交流会”在北京格兰云天国际酒店圆满结束，精彩的大会报告为此次交流会划上了圆满的句号。   生物制药、细胞治疗是当今全球对于人类健康具前途的技术和产业，同时在整个中国产业升级的大时代下更是得到迅速的发展和壮大。针对生物制、细胞治疗的发展现状和应用热点，企业单位实验室的60多位行业老师齐聚此次会议共同进行交流和探讨。流式会议回顾老师入场签到流式细胞术在生物医药中的应用-于化龙（贝克曼库尔特应用专家）细胞治疗质量体系的建设与法规关注点-顿昕（北京睿知而行科技有限公司 顾问专家）中场互动答疑贝克曼CytoFlex样机Cytoflex流式样机探讨流式细胞术在CAR-T工艺开发中的应用-徐其龙（永泰生物 Car-T项目工艺开发经理）生物制药中细胞生长状态全自动检测方法概述-史艳轻（贝克曼库尔特应用专家）智能分选CytoFlex SRT新品介绍-张建 （贝克曼库尔特应用经理）恭喜此次“流式专场”会议幸运中奖人员   贝克曼库尔特生命科学事业部一直致力于改善全世界人类的健康，为客户带来前沿的技术进展。此次技术交流会，特别感谢讲师们无私的分享，讲师们分享了自己多年以来总结的经验以及新的应用技术，相信此次“生物制药流式专场交流会”能给各位老师们带来不少借鉴和参考。接下来，我们会筹备“流式关怀周”活动，带着硬件工程师上门“呵护”您的仪器，具体细节可以关注我们后续的通知，也欢迎更多的老师加入到我们举办的活动中来。活动方式宠粉活动来啦，参与活动赢取礼品哦！活动时间：5月20号-5月31号参与方式：1.关注“德泉兴业”留言您此次“贝克曼流式专场生物制药行业交流会”感受或您与 贝克曼流式细胞仪 之间的故事，活动期间内点赞数高的 5 位朋友，送出贝克曼精美礼品一份~期待更多会议与您相见好玩的、有用的、前沿的帮助您获取生命科学研究及药物研发全方位的解决方案关注德泉兴业，了解更多实验室仪器实验信息！

MT生命科学行业产品体验会现场报道德泉与梅特勒-托利多联手在生命科技药园举办的“MT生命科学行业产品体验会”，热情的客户在现场同德泉一起交流了产品技术知识及相关应用，由梅特勒的精英讲师们带领体验了真机操作，跟随小编一起去看看现场吧。活动现场小伙伴们认真学习样机火热体验中感谢同仁们的大力支持和信赖,感谢梅特勒-托利多厂家的支持。德泉力求打造无忧服务及全面的解决方案。

您有新销售入职需要普及产品知识吗？您有用户恰巧需要我们的产品，不知道如何选型吗？您需要开拓您的销售领域吗？为期5天的线上会议等你前来我们免费为您开放本次 “德泉技术解决方案线上交流会”将采用线上的形式将我们的产品与技术解决方案带到您的身边，诚挚邀请您百忙之中参加此次会议。会议时间2021年02月22日-26日（周一到周五）13:30-16:00会议安排周四会议安排周五会议安排特邀贝克曼厂家，详细分享敬请周五下午参加...参会方式2021年02月22日-26日（周一到周五）13:30-16:00非常感谢大家的陪伴，为期五天的线上交流会已经进行到第四天，我们收到了一位小伙伴的感谢：反馈此次学到很多以下是其中一位小伙伴晒的笔记，市场部代表德泉兴业各位产品经理真的特别感谢你们对我们线上会议支持，很高兴你们能有所收获看了以上的笔记是否收获颇多未参加的小伙伴欢迎前来参加报名方法可以电话联系我们我们会把参会方式发送给您

2020年1月23日北京德泉公司正式成为美国BROOKFIELD博勒飞中国总代理,负责其品牌的销售、市场、服务等工作。BROOKFIELD品牌LAB系列和HEP系列产品包括：粘度计、流变仪、质构仪、水分仪以及粉体流动测试仪等问题Q粘度计每次开机，都会进行自动调零。然而，用户经常发现粘度计开机自动调零结束后，仪器显示扭矩不归零，怎么回事？在自动调零不为零时，进行粘度测量，会导致什么结果？建议A要解决这个问题，我们需要明白可能导致问题出现的原因所在，再进一步掌握正确执行粘度计开机自动调零的必要步骤。1原因解析正确执行粘度计的自动调零步骤之后，仪器显示扭矩不为零，可能由以下原因造成：仪器的机械零件磨损 --- 轴尖和宝石轴承座磨损所引起。轴尖和宝石座是用来承托粘度计的传感器和转轴、转子的重量。正常情况下，两者之间应该光滑，摩擦力很小。但由于长期使用的接触磨合或操作不注意使轴尖用力磨坏宝石座表面，造成宝石座表面变得凹凸不平，从而会使得两者的接触不是一点而是一个面，增加了摩擦阻力，从而影响了仪器的精确度。在仪器的操作显示上会出现开机后，出现扭矩不是“0” 的现象（表盘粘度计则表现为指针不在“0”位）。一般而言，仪器自动调零后的扭矩百分比在+/- 0.2之间，则视为正常。自动调零前，仪器未调整至水平状态，或未卸下转子，或转子已经浸入在样品中。特别是转子浸入样品中的自动调零，则仪器显示不是“0” ，而是常为负数。日常使用中，须严格禁止此类操作！2操作解析粘度计测量前，必须进行自动调零。这个过程设置了测量体系的起点读数。因此，粘度计每次开启后都会进行自动调零。此外，我们也可以在任何时候通过设置菜单进行仪器的自动调零。自动调零之前，必须确保粘度计处于水平状态，并且卸下所有的转子和连接头。当按下Next按键，粘度计将运转大约13秒。在自动调零之后，按下Next按键，粘度计将会转到粘度测试设置界面（Configure Viscosity Test）。自动调零后，仪器显示扭矩超出±0.2%，则代表了仪器的零点不在零位。此时所测得的数据自带零点偏移的测量误差，从而导致测量结果不准。提示：为了确保零位准确，在进行自动调零的过程中请勿触碰仪器。DVNext流变仪数显水平调节演示3方案建议当出现粘度计自动调零而扭矩不为零的现象，我们可以先从上述可能的原因中进行分析或推断，排除并非由于仪器未调整至水平状态，或未卸下转子，或转子已经浸入在样品中等不恰当操作因素所造成之后，建议联系Brookfield维修服务中心，做进一步的问题确认与解决。厂家进一步确认与解决的必要性，主要体现在于问题确认的同时，会进行必要的维修或保养，消除掉一些潜在但尚未外现的问题，使仪器恢复正常并达到良好的工作状态。

 细胞器间的互作也是个有意思的东西，我们之前分享过脂滴LD和过氧化物酶体的文章，还分别整理分享过线粒体、内体的故事，这次整理分享一篇算是内体和线粒体互作的文章把，具体内容如下： MCF-7细胞诱导凋亡后，细胞色素C从线粒体释放，内溶酶体（Rab5标记，我们之前分享的内体相关文章把Rab5归为早期内体marker）定位到线粒体（TOM70标记）  HeLa细胞上，凋亡发生时也观察到了内溶酶体定位到外膜损伤的线粒体（这回没有细胞色素C，用了IMS-RP – 绿色本来在线粒体内，和线粒体（白色）共定位，发生凋亡后绿色弥散到整个细胞） 看内溶酶体和线粒体空间关系细节：凋亡发生后内溶酶体定位到了线粒体内部，还发现内溶酶体和BAX接近（凋亡发生时BAX在线粒体上组装出孔洞结构） 内溶酶体在线粒体内部，这个现象挺有意思，用电镜字再确证一下：凋亡发生时，线粒体内部的确出现了空泡，；免疫金法确证凋亡发生时内溶酶体在线粒体内部  空间上看了凋亡过程中内溶酶体的分布，开始看看时间上内溶酶体在整个凋亡过程中的位置，发现：内溶酶体定位到线粒体发生在凋亡早期，它定位到内溶酶体之后线粒体外膜才发生损伤，而后线粒体形态改变（之前分享的那篇关于BAX/BAK的science里也观察到了凋亡发生后线粒体形态发生改变）  BID是另一个线粒体外膜损伤marker，又分别用Tf-546和Bodipy-CHOL标记内溶酶体，看到了内溶酶体进入线粒体的过程 内溶酶体可以被胆固醇染料Bodipy-CHOL标记，而线粒体外膜不含胆固醇，所以作者推测凋亡过程中内溶酶体定位到线粒体会改变线粒体膜成分，实际验证一下：未诱导凋亡的细胞用皂苷（胆固醇选择性透化剂）透化后，染线粒体外膜蛋白TOM20和线粒体内的一种蛋白TRAP1，无法染色线粒体内蛋白TRAP1；而诱导凋亡后，只有经过皂苷透化的细胞可实现TRAP1染色（PFA固定的凋亡细胞没法实现TRAP1染色，排除了凋亡细胞是因为BAX/BAK组装出的孔洞造成TRAP1染色的可能性），暗示凋亡后线粒体那有了皂苷可透化的胆固醇成分，应该是内溶酶体把胆固醇带过去改变了线粒体膜成分  看看内溶酶体定位和凋亡关键分子事件（BAX聚集、细胞色素C释放）的关系  内溶酶体和线粒体、凋亡关键分子事件的时空关系看完差不多了，开始看它在凋亡中的作用，沉默Rab5后，凋亡过程中定位到线粒体的BAX增加 沉默Rab5后，凋亡细胞线粒体细胞色素C释放减少  HeLa细胞上也发现当Rab5被沉默后，凋亡细胞线粒体BAX聚集增加、细胞色素C释放减少  沉默Rab5的细胞在表达Rab5可rescue细胞色素C释放，但过表达Rab5并不能促进细胞色素C的释放  做的还挺细，除了看凋亡过程中线粒体细胞色素C的释放，还看了smac的释放，沉默Rab5后，smac释放也受到影响  文章到这刚两层，继续往内溶酶体的上游挖，作者发现是去泛素化酶USP15调节内溶酶体定位到凋亡细胞的线粒体 沉默USP15抑制内溶酶体定位到凋亡细胞线粒体后，凋亡细胞线粒体细胞色素C释放减少  沉默USP15抑制内溶酶体定位到凋亡细胞线粒体后，BAX定位到凋亡细胞线粒体增加 刚才是HeLa上沉默USP15，在MCF-7上再做一遍：沉默USP15后，内溶酶体定位到线粒体减少、细胞色素C释放减少 沉默USP15后线粒体外膜仍会损伤，但耗时变长  接着挖调控Rab5的蛋白丰富文章：这回找的是调节Rab活性的GEF（GTP exchange factor），先看ALS2，将其沉默，发现并不影响Rab5定位到凋亡细胞线粒体、影响BAX、细胞色素C行为 另一个GEF Rabex-5在诱导凋亡后会定位到线粒体  沉默Rabex-5影响内溶酶体、BAX、细胞色素C行为 – 又找到一个调控内溶酶体的蛋白 接着描摹内溶酶体对凋亡调控的细节（同时也丰富文章）：凋亡发生后BAX构象发生改变，N端会暴露，二聚之后寡聚，沉默一系列内溶酶体蛋白后，凋亡细胞BAX N端暴露减少、BAX寡聚减少，暗示内溶酶体调节BAX构象  凋亡过程中，BAX通过在线粒体表面组装出孔洞结构调节线粒体通透性，组装行为依赖BAX构象变化、寡聚，既然内溶酶体影响BAX N端暴露和寡聚，那么它很可能影响线粒体通透性，还是通过染线粒体内蛋白TRAP1看内溶酶对线粒体通透性的影响，发现：沉默前面挖到的一系列内溶酶体调控蛋白后，TRAP1染色受抑制，暗示内溶酶体调控线粒体通透性（还看到了沉默内溶酶体后细胞死亡减少） 最后又换了比较新型的凋亡诱导剂（Vx是BCL-2抑制剂，S63845是MCL-1抑制剂）看文章挖出来的内溶酶体在凋亡过程中的行为 细胞器间互作是个有意思的东西，有点跨界的意思 - 找到一个点（这篇是内溶酶体），和经典通路（内源凋亡通路）建立关联就成文了。可以参考这个思路，看看自己关注的细胞器能不能和别人的方向发生点故事，读读文线，把两条技术路线交叉一下就OK了…… Tim Sen Wang, Isabelle Coppens, Anna Saorin, Nathan Ryan Brady, Anne Hamacher-Brady. Endolysosomal Targeting of Mitochondria Is Integral to BAX-Mediated Mitochondrial Permeabilization during Apoptosis Signaling [J]. Developmental Cell, June 22, 2020.

细胞的死亡方式多种多样，之前分享过凋亡、铁死亡，这次整理分享一篇关于程序性坏死（necroptosis）的文章，具体内容如下：如上图，各种因素可以触发程序性坏死，但程序性坏死的关键分子事件是坏死小体的形成：RIPK1和RIPK3形成坏死小体，引起MLKL寡聚、磷酸化，磷酸化的MLKL向细胞膜转位，引起膜损伤，最终细胞死亡（Berghe T V , Linkermann A , Jouan-Lanhouet S , et al. Regulated necrosis: the expanding network of non-apoptotic cell death pathways[J]. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 2014, 15(2):135-147.）作者关注程序性坏死的效应分子MLKL，追踪诱导剂TSI触发程序性坏死后MLKL的行为：TSI刺激细胞后MLKL寡聚、磷酸化、膜转位，MLKL磷酸化滞后于RIPK3的磷酸化，细胞膜损伤（用LDH释放表征）滞后于MLKL磷酸化细胞膜损伤（用Annexin V结合表征）后一段时间，细胞才死亡（用PI染色表征）用识别不同MLKL表位的抗体继续追踪MLKL的行为：未受到TSI刺激时MLKL点状分布；TSI刺激后MLKL聚集成簇（clusters）；TSI刺激后pMLKL逐渐出现，慢慢形成更大的聚集，作者称之为hotspots观察pMLKL形成的hotspots发现周围有成簇的MLKL；pMLKL形成的hotspots定位在细胞膜（WGA染的是细胞膜）；hotspots形状并不规则细看MLKL簇：发现MLKL簇周围分布着pMLKL和RIPK1“抑制”MLKL上游的坏死小体后，MLKL、pMLKL聚集的现象消失用Mb37封住MLKL和膜互作的位点后，TSI诱导的MLKL、pMLKL聚集、膜损伤现象消失作者又用NSA封住MLKL和膜互作的位点，发现NSA抑制了MLKL的寡聚、膜转位、pMLKL聚集成hotspots，最终抑制了膜损伤，且NSA加入的越早抑制作用越强，暗示MLKL和膜的互作对于MLKL诱导程序性坏死很重要MLKL的行为追踪的差不多了，着手看它和细胞死亡的关系，先看看细胞死亡过程：TSI刺激细胞后，细胞膜出现损伤（Annexin V着色），损伤积累到一定程度后膜破损，TOPRO进入细胞在细胞死亡过程中可以观察到Annexin V出现聚集，对MLKL染色后发现Annexin V聚集在pMLKL形成的hotspots处，暗示pMLKL hotspots处是膜损伤处（和前面的MLKL行为串到一起，分子链条逐渐呈现）很有意思，作者还观察到了死亡传递：一个细胞发生程序性坏死后，相邻细胞也依次发生死亡如果将野生型和MLKL缺陷型细胞共培养，在培养体系里加入程序性坏死诱导剂，死亡只能在野生型细胞间传递故事基本成型，作者又进一步细化一些东西，首先是MLKL如何转位，作者构建了一个筛选体系，用各种抑制剂处理细胞，而后通过读取LDH释放和细胞死亡（PI染色）筛选可能调节MLKL转位的机制，发现是高尔基体-微管-微丝网络调节的（作者将抑制高尔基体-微管-微丝网络的抑制剂组合叫做NCB，NCB并不影响MLKL磷酸化）验证一下筛到的MLKL转位机制：MLKL、pMLKL的确和微管、微丝共定位，NCB抑制后MLKL簇、pMLKL hotspots受影响文章并不复杂，只是用细胞成像的方式展现了一下程序性坏死过程中MLKL的行为，看到了点状分布的MLKL聚簇，簇上有RIPK1，pMLKL聚集成更大的hotspots。这种蛋白聚集的行为是否和相变有关呢？TCR信号相变那篇文章有成簇现象，这篇文章中不但有聚簇，还有比簇更大的hotspots，真的值得做一做……Andre L. Samson, Ying Zhang, Niall D. Geoghegan, Xavier J. Gavin, Katherine A. Davies, et al. MLKL trafficking and accumulation at the plasma membrane control the kinetics and threshold for necroptosis [J]. Nature Communications, June 19, 2020.想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568   如上图，各种因素可以触发程序性坏死，但程序性坏死的关键分子事件是坏死小体的形成：RIPK1和RIPK3形成坏死小体，引起MLKL寡聚、磷酸化，磷酸化的MLKL向细胞膜转位，引起膜损伤，最终细胞死亡（Be…

整理分享一篇关于病毒的文章，其实前面分享过相关文章 - 病毒进入细胞依赖内吞，已经分享过两篇关于内吞的文章，此外还分享过病毒如何在胞内组装的文章。这次的文章是关于细胞表面病毒受体的，具体内容如下： 作者研究的是呼吸道合胞病毒RSV的感染机制，RSV通过RSV-F蛋白和上皮细胞NCL互作感染细胞，IP看一下两者确实发生互作，同时量化一下RSV-F和NCL的亲和力 RSV感染水平和细胞表面NCl水平的关系前三种是呼吸道或肺泡上皮细胞，细胞表面NCL水平都不高，因此感染水平远低于高NCL的HeLa细胞  很有意思，1HAEo-（支气管上皮细胞系）表面NCL水平并不高，但95%-100%的1HAEo-细胞表面都粘着病毒 – RSV是怎么感染这种细胞表面低表达NCL的细胞呢？ 用成像流式追踪细胞表面的RSV和NCL，发现感染初期细胞表面就有了很多RSV，而NCL定位到RSV则需要一定时间 用荧光显微镜也观察到早期RSV直接定位在细胞表面，后期才和NCL共定位，暗示NCL是感染后被召集到细胞表面的 追踪RSV感染后不同时间点NCL的水平：细胞表面NCL增加，细胞整体NCL表达并没有发生变化，暗示感染后NCL向细胞表面转位；用WB去看一下核内外的NCL，发现感染后核内NCL减少，核外NCL增加，再次暗示NCL发生了转位 – 有意思！是什么信号让NCL发生的转位呢？ 文献报道病毒可以利用细胞表面受体激活相关信号调节入胞，作者用各种受体抑制剂去筛还存在什么受体调节RSV感染细胞，筛到了IGF1R（TLR4和NCL早有报道）：抗体或抑制剂阻断IGF1R后RSV感染减少；RSV的确存在共定位 验证筛到的IGF1R：蚊子细胞不会被RSV感染，让蚊子细胞表达IGF1R后看感染，发现表达IGF1R的蚊子细胞可以被感染，说明IGF1R的确参与RSV的感染 继续验证筛到的IGF1R：敲掉1HAEo-细胞的IGF1R后感染减少，再表达感染恢复 – 再次说明IGF1R调节RSV对细胞的感染  好的，IGF1R调节RSV对细胞的感染，那它和RSV上的什么蛋白互作呢？IP找到RSV-F和IGF1R互作，同时量化一下两者亲和力（可以去回看一下RSV-F和NCL的Kd值）  至此，作者找到了一个新的调节RSV感染的细胞表面受体IGF1R，有文献报道激酶也可调节病毒进入细胞，所以作者又用各种激酶抑制剂去筛选影响病毒感染的激酶，筛到了PKCζ（被抑制后RSV感染减少、NCL的召集减少；尽管ERK MAPK和PI3K被抑制后感染也减少，但它们不参与调节NCL的召集）。小结一下：作者找到了3个影响RSV和细胞互作的变量 – NCL、IGF1R、PKCζ，NCL和PKCζ初步建立 一点关联（PKCζ调控NCL召集） NCL、IGF1R、PKCζ都调节RSV感染，NCL和PKCζ初步建立 一点关联，IGF1R和PKCζ存在关联吗？单独沉默IGF1R或PKCζ和同时沉默IGF1R、PKCζ对RSV感染的抑制程度相当，暗示两者通过同一通路调节RSV感染；病毒感染后观察到IGF1R磷酸化，病毒感染和IGF1R配体都能引起PKCζ活性升高，抑制IGF1R后PKCζ活性降低，暗示PKCζ是IGF1R下游的效应蛋白 – 挺好，“分子链条”隐隐成型RSV-F-IGF1R-PKCζ-NCL NCL和PKCζ存在关联，IGF1R和PKCζ存在关联，IGF1R和NCL存在关联吗？答案是存在，用IGF1R配体IGF1激活IGF1R后可以观察到细胞表面NCL增加。“分子链条”成型RSV-F-IGF1R-PKCζ-NCL  前面的数据暗示病毒通过RSV-F和IGF1R互作激活PKCζ信号，下游信号召集NCL从核到病毒处，实际用活细胞成像拍一下这个过程；阻断NCL、IGF1R、PKCζ后荧光标记的病毒对细胞结合变少 细胞水平的实验某种程度上脱离了生理条件，所以作者利用ALI培养构建类器官系统：为感染RSV状态下NCL在内部，不出现在纤毛区，IGF1R出现在纤毛区，病毒感染3小时后NCL被召集出来类器官上重新分子链条：看到RSV、IGFR、NCL共定位，抑制IGF1R或PKCζ后共定位受到影响 – 验证、重现所发现的分子链条 小鼠体内验证一下：抑制PKCζ后RSV感染被抑制 最后来个模式图：RSV先通过和IGF1R互作激活PKCζ，下游信号召集NCL到细胞表面，和病毒互作，调节病毒进入细胞 小而美的一篇文章，发现了一个病毒受体及受体下游的信号，并和主流受体建立了关联，再结合我们之前整理分享的文章，病毒感染细胞研究的技术路线已经基本覆盖 – 接触、进入、组装。笔者读个各种研究方向的文章，目前整理归纳了各个研究方向的技术路线，技术路线思维可以帮您提高研究效率，在有效开展自己工作的同时，还能让您很淡定的审视他人的工作，看到不足和发展的机会…… Cameron D. Griffiths, Leanne M. Bilawchuk, John E. McDonough, Kyla C. Jamieson, et al. IGF1R is an entry receptor for respiratory syncytial virus [J]. Nature, June 3, 2020.想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568  01此次文章交流会主题：CNS前沿文献追踪–SPO16调节减数分裂的机制时间：6月19日  20：00 - 21：00主讲人：于博士会议 ID：175 209 306参会软件：腾讯会议app也欢迎您准时参会- 点击“阅读原文”链接直接加入会议参考文献:Qianting Zhang, Shu-Yan Ji, Kiran Busayavalasa, Chao Yu. SPO16 binds SHOC1 to promote homologous recombination and crossing-over in meiotic prophase I [J]. Science Advances, January 23, 2019.

继续减数分裂文章的分享，这是减数分裂系列文章的第5篇，也是最后一篇，文章关注的是CO对染色体分离的影响，具体内容如下： 在终变期，同源染色体会形成以CO为中心的十字形二价染色体（HTP-3为染色体轴marker、LAB-1是调节同源染色体分开的蛋白、COSA-1为CO marker），文章作者想研究CO位置对减数分裂过程中染色体行为的影响 CO是由双链DNA损伤（DSB）转化而来，为了控制CO的形成位置，作者利用热休克诱导的Mos1转座子系统对SPO-11突变（无法产生内源DSB）线虫的染色体进行定点损伤：中间、中间靠边、端粒区 热休克（HS）的确诱导了DSB（用重组酶RAD-51表征，沉默RAD-54是为了抑制RAD-51离去，便于检测DSB） 转座子系统诱导中间及中间两侧DSB后，终变期可观察到十字交叉型二价染色体 损伤端粒附近后无法形成十字交叉型二价染色体，损伤位点位于染色体中心时形成的十字交叉型二价染色体上LAB-1（应该定位在“十字”的长轴上，抑制未成熟的姐妹染色单体分开）定位异常 – 不再定位 当DSB发生在染色体中间时，除了本应定位在长轴的LAB-1出现异常定位外，本应定位在短轴的pH3也出现了定位异常 – 同时出现在十字的两个轴上  同时损伤中间及中间一侧后二价染色体变多，LAB-1定位趋于正常 LAB-1的作用是抑制未成熟的姐妹染色单体分开，当DSB发生在中间区，除了LAB-1定位异常，作者还观察到起维持染色体结构作用的SMC-1定位也出现了问题  姐妹染色单体分离出现异常 转座子系统精准造成中间区DSB后，用辐射再随机引起额外的DSB可rescue LAB-1的定位异常；此外形成的十字型二价染色体和单纯中间区损伤后形成的十字型不同，暗示非中间区的DSB更易形成CO 前面是在三号染色体上看到的LAB-1定位异常，在别的染色体上再用转座子系统看看，发现只要损伤在中间区及其附近，二价染色体形成、LAB-1定位都会受影响  终变期观察到二价染色体形成、LAB-1定位出问题，作者开始往前捣，发现在粗线期末期，本应完全覆盖染色体的LAB-1在单点损伤的染色体上出现了部分丢失  单点DSB召集CO关键蛋白COSA-1的能力也较弱 辐射产生额外的DSB可以rescue粗线期末期LAB-1定位、COSA-1的问题 前面所有的数据都暗示DSB的数量很关键，转座子系统能够精准的制造单个DSB，其实通过调节辐射能量也能控制DSB的数目，作者又做了一个辐射引起DSB的模型：随能量升高，DSB增加，终变期的LAB-1定位、二价染色体数趋于正常 – 和前面转座子系统上观察到的结果一致 最后来个模式图：中间两侧区的DSB形成CO，终变期形成十字型的二价染色体，相关调节蛋白定位准确，诱导正确的染色体分离 文章并不复杂，其实只是描述了一个现象，背后的分子事件并没有挖出来，也就是还有深挖、再成文的机会 - 一方面我们收集技术路线，另一方面寻找新的机会…… Elisabeth Altendorfer, Laura I. La′ scarez-Lagunas, Saravanapriah Nadarajan, Iain Mathieson, Monica P. Colaia′ covo. Crossover Position Drives Chromosome Remodeling for Accurate Meiotic Chromosome Segregation [J]. Current Biology, April 6, 2020.想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568  01此次文章交流会主题：CNS前沿文献追踪–SPO16调节减数分裂的机制时间：6月11日19：00 - 20：00主讲人：于博士会议 ID：162 910 992参会软件：腾讯会议app参考文献:Qianting Zhang, Shu-Yan Ji, Kiran Busayavalasa, Chao Yu. SPO16 binds SHOC1 to promote homologous recombination and crossing-over in meiotic prophase I [J]. Science Advances, January 23, 2019.我们的口号是「科研千万种，文献第一位」

我们前面分别做了脂滴系列、相变系列文献分享，减数分裂的文章已经整理分享过两篇，笔者又找了几篇，做个减数分裂系列，今天先分享SPO16，具体内容如下 ：作者从单细胞测序数据库挖掘出一个在各个物种都保守的基因，这个基因对应酵母的Zipp2蛋白，Zip2和Spo16形成的复合物后召集Zip4，最终形成ZSS复合物调节减数分裂和酵母Zip2同源的小鼠SHOC1蛋白已经有人做过了，但和酵母spo16同源的小鼠蛋白还没人做过（命名为SPO16），通过软件预测小鼠SPO16二级结构，发现和酵母的重合度很高，暗示功能上有可能类似故事缘起酵母的Zip2-Spo16，两者互作，所以看看在小鼠上同源的SHOC1-SPO16，果然能够互作，进一步暗示小鼠SPO16可能和酵母Spo16有类似的功能SPO16在小鼠性器官表达，在减数分裂期间出现 – 暗示对减数分裂有调节作用SPO16细线期（L）开始出现，粗线期早期（EP）开始降低，如果敲掉重组酶DMC1将减数分裂阻滞在偶线期（Z），SPO16不会降低，暗示SPO16主要在细线及偶线期发挥作用（E：early，M：mid，L：late）H：SPO16和重组酶RAD51共定位少，I：和ssDNA结合蛋白RPA2共定位多，暗示参与DNA损伤修复，J：有的SPO16和联合复合物中心元件SYCP1不共定位，说明在联合之前SPO16就已经被召集到染色体上SPO16的分布、定位情况暗示它参与减数分裂调节，具体功能如何呢？CRISPR Cas9敲掉看看SPO16缺陷后，雄性小鼠睾丸变小，精子形成受限（HE染的是精子生成部位曲线精管，免疫荧光看的是曲线精管出细胞凋亡情况CC3 - caspase3）SPO16缺陷后雌性小鼠生殖功能也受到影响：卵巢变小、卵子变少SPO16缺陷后，雄性小鼠减数分裂过程中联会受到影响（SYCP1为联会marker，HORMAD1为未联会marker），无法进入双线期SPO16缺陷后，雌性小鼠减数分裂过程中联会也受到影响SPO16缺陷后DNA损伤变多，伪性体（Pseudo Sex Body）增加SPO16缺陷后非同源配对、不联会变多（TRF1为端粒marker，CREST为着丝粒marker）SPO16缺陷后重组酶DMC1、RAD51点数变少，暗示DNA损伤修复受到影响MLN1为晚期重组marker，基本消失从不孕不育过到减数分裂，这些都是大面上的东西，故事缘起自酵母的Zip2-Spo16，看看小鼠上和酵母Zip2同源的SHOC1，SPO16缺陷后和其互作的SHOC1定位到染色体减少（敲DMC1可把减数分裂阻滞在偶线期）酵母上Zip2-Spo16复合物形成后召集Zip4，最终形成ZSS复合物调节同源重组，所以看看小鼠上和酵母Zip4同源的TEX11：没了SPO16异源二聚体都没法形成，更别提召集TEX11了SHOC1、SPO16、TEX11都属于ZMM蛋白，作者又看了另外一个ZMM蛋白MSH4：SPO16缺陷后MSH4基本不再定位到染色体看完雄性小鼠的ZMM蛋白再看看雌性小鼠的ZMM蛋白ZMM蛋白组成的ZSS复合物(SHOC1-SPO16-TEX11)参与同源重组，ssDNA结合蛋白也参与这个过程，所以看看ssDNA结合蛋白SPATA22和RPA1：SPO16缺陷后ssDNA结合到那边定位到染色体减少，再次暗示SPO16影响减数分裂过程中的同源重组最后来个模式图：SPO16参与DNA损伤后的同源重组，同源重组后形成CO这篇文章是我们在之前线上文献分享中所提到的“理性展现已知”的典型 – 生信的方法挖到一个别人没做过的同源蛋白(别人做的酵母Spo16，他做小鼠SPO16)，按照减数分裂的技术路线，把关键点做一下就成文了……Qianting Zhang, Shu-Yan Ji, Kiran Busayavalasa, Chao Yu. SPO16 binds SHOC1 to promote homologous recombination and crossing-over in meiotic prophase I [J]. Science Advances, January 23, 2019.想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle52256801此次文章交流会主题：CNS前沿文献追踪–用SIM观察减数分裂过程中DNA修复、联会、交叉互换时间：5月20日14：00-15：00主讲人：于博士会议 ID：221 723 625参考文献:Woglar A , Villeneuve A M . Dynamic Architecture of DNA Repair Complexes and the Synaptonemal Complex at Sites of Meiotic Recombination[J]. Cell, 2018:S0092867418303982.2019-2020年CNS文献汇总【CNS前沿文献追踪】SPO16调节减数分裂的机制【CNS前沿文献追踪】Ded1p通过相变调节细胞翻译状态【CNS前沿文献追踪】RNA通过改变G3BP1构象驱动相变进行【CNS前沿文献追踪】Sup35在应激条件下通过相变保护细胞【CNS前沿文献追踪】相变影响核小体泛素化【CNS前沿文献追踪】细胞核内脂滴的形成【CNS前沿文献追踪】过氧化物酶体、脂滴调控脂肪分解机制【CNS前沿文献追踪】SIM超分辨看DNA损伤修复过程中γH2AX【CNS前沿文献追踪】Amo1蛋白调节异染色质核内定位及基因沉默【CNS前沿文献追踪】组蛋白甲基化reader ZCWPW1调节减数分裂【CNS前沿文献追踪】用SIM观察减数分裂过程中DNA修复、联会、交叉互换【CNS前沿文献追踪】小分子化药联用触发NK肿瘤免疫反应【CNS前沿文献追踪】提高肿瘤免疫疗法敏感度的新靶点ADAR1【CNS前沿文献追踪】调节T细胞疲劳的转录因子NR4A【CNS前沿文献追踪】调节DC细胞抗原提呈的mRNA甲基化读取蛋白YTHDF1【CNS前沿文献追踪】改造巨噬细胞用于肿瘤诊断【CNS前沿文献追踪】MDSC进入肿瘤微环境的一种机制【CNS前沿文献追踪】T细胞诱导肿瘤细胞发生铁死亡【CNS前沿文献追踪】用小分子化药控制CART【CNS前沿文献追踪】细胞凋亡被吞噬后溶酶体的再形成【CNS前沿文献追踪】病毒衣壳在细菌内部的运动模式【CNS前沿文献追踪】线虫身体延长分子机制【CNS前沿文献追踪】WDFY2通过VAMP3抑制基质金属蛋白酶再循环【CNS前沿文献追踪】死亡受体Fas的内体调节【CNS前沿文献追踪】用TIRF-SIM看TCR信号【CNS前沿文献追踪】53BP1稳定染色质的机制【CNS前沿文献追踪】用电转导入荧光标记抗体进行活细胞超分辨成像【CNS前沿文献追踪】用SIM观察减数分裂过程中DNA修复、联会、交叉互换我们的口号是「科研千万种，文献第一位」