卡那霉素残留

本人遇到了很难的一个问题，不知有没有人做过这方面的，急求赐教。仪器为ICS-5000，柱子为CarboPac MA1，检测器脉冲安培检测。待测物质为某表达蛋白里的卡那霉素残余！目前标准曲线建立好了，但是样品处理遇到困难。蛋白不能进柱子，会对柱子造成不可逆转的损坏（柱效降低），为了除去蛋白使用了下列方法，但无效。方法一 3K的膜过滤以除去分子量为6oooo多的蛋白，但是Lowry法检测发现流穿里蛋白浓度仍有十几ug/ml，这个浓度仍不适合上样。方法二，水解蛋白为氨基酸后，分析柱前加氨基酸捕获柱。但发现卡那霉素在我们的水解条件下会降解。这样检测就没有意义了，还是舍弃。注：卡那霉素在0.5N HCl 100度 1h即水解，我们的条件比这还要激烈，否则不能完全水解蛋白为氨基酸。请大家讨论讨论，给些建议。谢谢。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif

现在在做土霉素的残留检测，参照农业部和CAC的标准，残留标示物是parent drug，而欧盟标准残留标示物是Sum of parent drug and its 4-epimer，那么有两个问题1、parent drug指的是原药，那么就是土霉素吧？2、如果按照欧盟标准，做残留检测，不仅要做土霉素本身的检测还要做土霉素的异构体，4-差向土霉素的检测吗？请各位大大发表下意见，谢谢！

(一)食品中氯霉素的限量1999年9月我国农业部发布了《动物性食品中兽药最高残留限量》，规定了氯霉素在所有食品动物的可食用组织中不得检出。2002年3月被我国农业部关于发布《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》列为禁止使用的抗生素。欧盟、美国等国家规定动物源性食品中氯霉素的残留限量标准为“零容许量”，即不得检出。(二)测定氯霉素残留的方法①酶联免疫法。采用间接竞争ELISA筛选法，在酶标板微孔条上包被偶联抗原，样本中残留的氯霉素和微孑L条上包被的偶联抗原竞争抗氯霉素抗体，加入酶标二抗后，加入底物显色，样本吸光度值与其残留物氯霉素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中氯霉素的含量。该方法测定低限为氯霉素0.05／g／kg。⑦GB／T 22338--2008动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定——气相色谱一质谱法和液相色谱一质谱法测定水产品、畜禽产品和畜禽副产品中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素残留量。气相色谱一质谱法是样品用乙酸乙酯提取，4％氯化钠溶液和正己烷溶液液分配净化，再经弗罗里硅土(Florisil)柱净化后，以甲苯为反应介质，用N，O-I双(三甲基硅烷)三氟乙酰胺一三甲基氯硅烷(BSTFA+TMCS,99+1)于70℃硅烷化，用气相色谱／负化学电离源质谱测定，内标工作曲线法定量。该方法测定低限为氯霉素0.1／μg／kg，氟甲砜霉素和甲砜霉素0.5μg／kg。液相色谱一质谱法是针对不同动物源性食品中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素残留量，分别采用乙腈、乙酸乙酯一乙醚或乙酸乙酯提取，提取液用固相萃取柱进行净化，液相色谱一质谱／质谱仪进行测定，氯霉素采用内标法定量，氟甲砜霉素和甲砜霉素采用外标法定量。该方法对氯霉素的测定低限为0．1μg／kg；氟甲砜霉素和甲砜霉素为O.1／μg／kg。