利巴韦林含量

[b][font=宋体][/font]1.[font=宋体]样品简介[/font][/b][font=宋体]利巴韦林颗粒主要用于治疗呼吸道合胞病毒引起的病毒性肺炎与支气管炎，皮肤疱疹病毒感染等。该药主要化学成分为利巴韦林，利巴韦林是广谱强效的抗病毒药物。[color=#333333][back=white]本文主要简介使用[/back][/color][/font]HPLC[font=宋体]法测定利巴韦林颗粒含量。[/font][b]2.[font=宋体]仪器设备与试剂[/font]2.1[font=宋体]仪器设备[/font][/b][font=宋体]岛津[/font]LC-2030C[font=宋体]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url][/font][font=宋体]赛多利斯[/font]CPA225D[font=宋体]分析天平[/font][font=宋体]色谱柱：[/font]Agilent Hi-Plex H[font=宋体]（[/font]7.7mm×100mm[font=宋体]）[/font][b]2.2[font=宋体]对照品和试剂[/font]2.2.1[font=宋体]对照品[/font][/b][font=宋体]利巴韦林（中国食品药品检定研究院；[/font]140629-202204[font=宋体]；[/font]99.8[font=宋体]％）[/font][b]2.2.2[font=宋体]试剂[/font][/b][font=宋体]超纯水（临用新制）；稀硫酸（配制批号：[/font]20230701[font=宋体]）。[/font][b]3[font=宋体]色谱条件、样品制备及检测方法[/font]3.1[font=宋体]色谱条件及系统适用性要求[/font][/b][font=宋体]用磺化交联的苯乙烯[/font]-[font=宋体]二乙烯基共聚物的氢型阳离子交换树脂为填充剂；以水（用稀硫酸调节[/font]pH[font=宋体]值至[/font]2.5±0.1[font=宋体]）为流动相；检测波长为[/font]207nm[font=宋体]；进样体积[/font]20μl[font=宋体]。[/font][font=宋体]系统适用性要求：理论板数按利巴韦林峰计算不低于[/font]2000[font=宋体]。[/font][b]3.2[font=宋体]溶液制备[/font][/b][font=宋体]对照品溶液：取利巴韦林对照品，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每[/font]1ml[font=宋体]中约含[/font]50μg[font=宋体]的溶液。[/font][font=宋体]供试品溶液：取装量差异项下的内容物适量，混合均匀，精密称取适量（约相当于利巴韦林[/font]0.1g[font=宋体]），加流动相溶解并定量稀释制成每[/font]1ml[font=宋体]中约含利巴韦林[/font]50μg[font=宋体]的溶液，滤过，取续滤液。[/font][b]3.3[font=宋体]检测方法[/font][/b][font=宋体]精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]。按外标法以峰面积计算。[/font][b]3.4[font=宋体]图谱数据[/font]3.4.1[font=宋体]对照品图谱[/font][/b][font='Calibri',sans-serif][img=,605,634]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308182050061104_4837_6126746_3.jpg!w690x722.jpg[/img][/font][b]3.4.2[font=宋体]供试品图谱[/font][/b][img=,605,638]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308182050574121_6408_6126746_3.jpg!w690x728.jpg[/img][b]4.[font=宋体]结果与讨论[/font][/b][font=宋体]由系统适用性图谱知，利巴韦林峰保留时间为[/font]8.425[font=宋体]，理论塔板数[/font]2554[font=宋体]（大于[/font]2000[font=宋体]），符合要求。[/font][font=宋体]因此，[/font]Agilent Hi-Plex H[font=宋体]（[/font]7.7mm×100mm[font=宋体]）色谱柱能满足利巴韦林颗粒含量分析要求。[/font][font=宋体][/font]

[align=center]利用SPE-HPLC/MS技术检测鸡肉中利巴韦林的含量[/align] 利巴韦林是一种合成的核苷类抗病毒药，是一种前体药物，当微生物遗传载体类似于嘌呤RNA的核苷酸时，它会干扰病毒复制所需的RNA的代谢，抑制病毒的RNA和DNA合成。体外细胞培养试验表明，利巴韦林对呼吸道合胞病毒（RSV）具有选择性抑制作用。无论是基层社区医院还是三级医院，无论是综合医院还是儿童专科医院，无论是普通感冒还是轮状病毒肠炎，还是普通型手足口病，都可能被开利巴韦林。虽然利巴韦林的体外试验对呼吸道合胞病毒具有选择性抑制作用，但其治疗腺病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒或流感病毒感染临床效果目前并不确定。国外只有北美国家对于极少数重症呼吸道合胞病毒肺炎才偶尔应用。 抗病毒药物在动物源食品中乱用的现象层出迭起，各类抗病毒药物标准品为有效的抗病毒药物的质量掌握和有害残留检测提供主要作用。本文以鸡肉中的抗病毒药物(利巴韦林)作为研究对象，创立而且优化了鸡肉中残留药物的高效液相色谱-质谱分析方法, 使用200 mg的3mL HyperCarb 固相萃取柱，取2 g鸡肉，加入15mL水，涡旋混匀，超声提取10 min，6000 rpm离心10 min，取3 mL上清液进行固相萃取。SPE柱净化分析物过程：活化：1 mL乙腈，1mL甲醇。上样：3 mL上清液用1mL/min流速上样。洗脱：500 mL 20%乙腈-水溶液，洗脱两次，合并洗脱液，直接进样。分析方法采用HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS方法。流动相选择A：水溶液（5mM乙酸铵），B：乙腈。梯度洗脱程序：0-1min，90%A；1-2min，90%-40%A；2-5min，40%A；5-6min，40-90%；6-8min，90%A。流速：0.2 mL/min。柱温：25 ℃。进样量：10 mL。MS条件：电喷雾电离源（HESI），正离子模式选择反应监控（SRM）扫描模式。喷雾电压：3700V，毛细管温度：350℃。离子对参数：利巴韦林：245.1→96.2，245.1→113.2，碰撞能量：43V，14V，透镜电压：80V，80V；利巴韦林同位素内标：249.9→95.9，249.9→112.9，碰撞能量：43V，14V透镜电压：64V，64V；结果：鸡肉空白添加1 ppb的利巴韦林和同位素的HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS图。见下图。添加50 ppb的加样回收率为121.8%，重现性良好。[align=center][img=,487,355]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101335284818_7713_3255306_3.jpg!w487x355.jpg[/img][/align]