毛细胞

题名：自动化毛细管电泳的快速单细胞分析（Automated Capillary Electrophoresis System for Fast Single-Cell Analysis）作者：Alexandra J. Dickinson , Paul M. Armistead , andNancy L. Allbritton （一群美国滴家伙）杂志：Analytical Chemistry年卷页： 2013, 85 (9), pp 4797–4804 正文：毛细管电泳在单细胞分析上显示了其独特而强有力的优势，这是HPLC和UPLC等难望其项背的优势之一。以下就给大家介绍一个该项技术在单细胞分析上的应用，很牛很强大~ 为了介绍全面一点，我把整段摘要给翻译了。毛细管电泳用于单细胞分析是一种非常有前景的技术，但是在生物研究上其具有低通量的局限性。本文提出了一个微型细胞捕获器和三通道体系的自动化分析平台，在该系统上可进行快速缓冲液交换以进行快速单细胞分析。导入的细胞跟荧光素和俄勒冈绿一起被分离分析，通量为3.5 细胞/分，荧光素和俄勒冈绿的分离度为2.3±0.6。细胞蛋白激酶B（PKB）的活性是通过检测免疫荧光染色后的二氧膦基-PKB来检测的。结果显示，PKB在并没有变化，说明在CE分析过程中应激活化蛋白酶没有被上调，而且在细胞溶膜之前基底细胞的生理机能也没有被扰乱。在癌细胞中鞘氨醇激酶(SK)通常情况下是会被上调的。在此实验中，通过将神经胺-荧光黄(SF)基底引入细胞中而对SK进行检测。SF、神经胺-1-磷酸荧光黄（S1PF）和1/3荧光种类在单细胞中得到分析。219个细胞中，单细胞通量为2.1细胞/分钟。虽然这些亚种群细胞（此类细胞SK活性差异很大，这些差异跟种群均值有关）很容易被测定到，但88%的细胞具有上调SK的活性。该系统稳定，重现性好，可用于上百个贴壁和非贴壁细胞的生物组分的分离分析；还可用于检测非表征的生物学现象。生物方面的知识翻译起来颇费功夫，有些地方翻译得不一定地道。不过生物知识在这里不是重点，亮点在仪器上。比如微型细胞捕获器，这个装置至于毛细管入口端上面50微米处，那个三通道系统也一副牛掰哄哄的样子。如下图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/01/201401202053_488354_1624715_3.png其他参数：溶膜方式：激光脉冲生理盐水和分离缓冲液的控制方式：接地电位进样方式：电动进样（-5kV，1s），此时横跨毛细管的电压设为0，1s，毛细管被从air gap移动到分离缓冲溶液中。结语：如果没有多年的科研积累和强大的平台是做不出这样的实验的。纵观这两年发到AC上的文章，动则CE-MS，剩下的就是类似这种：需要很多电化和物化知识外加搞技术难度的仪器创新。革命尚未成功，同志们需多努力啊~~~~~~~