Strep-Tactin XT Resin

Strep-Tactin XT Resin

商品属性：

 产品介绍：

描述：

Strep-Tactin XT（Strep-Tactin 的升级产品）琼脂糖凝胶 FF 是一种将 Strep-Tactin XT 共价交联在琼脂糖凝胶微球上，形成的生物亲和层析分离介质。该纯化介质主要用于纯化 Strep tag II 或 Twin strep tag 标签蛋白。Strep tagII 标签为 8 个氨基酸的小标签（WSHPQFEK），由于标签小，仅为 1kDa 左右，一般不影响融合后蛋白质的结构和功能，常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。由于 Strep-Tacin XT 对 Strep tag II 标签具有高度特异性，一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。Strep tag II 标签蛋白与凝胶结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱，该洗脱方式比较温和，对蛋白影响极小。由于 Strep-Tactin 对 Strep tag II 标签具有很强的吸附能力，在生物素的洗脱过程中不易完全洗脱，造成洗脱效率较低。可以通过在脱硫生物素洗脱液中添加 25mM NaOH 来提高蛋白回收效率，而添加 NaOH 后会造成 Strep-Tactin从填料上脱落，进而污染纯化蛋白。本产品为升级的 Strep-Tactin XT，其可耐受高浓度的 NaOH 洗脱（0.5M），除此外 Strep-Tactin XT 可耐受 1%SDS、6M 尿素，因此使用该填料可以在变性条件下纯化标签蛋白。

操作方法：

储存：4~8℃可保存 2 年。
保存液：10mM Tris-HCl，pH7.5；100mM NaCl；20%乙醇
实验用溶液：
(1) 结合缓冲液：根据自身蛋白性质来定，一般推荐 50mM Tris-HCl(pH8.0), 150mM NaCl（或采用 PBS）
(2) 洗涤液与结合缓冲液相同，一般洗涤 5~20 个柱体积。
(3) 洗脱缓冲液：在结合缓冲液中加入 2.5~3.5mM D-Biotin。或根据蛋白性质和用途灵活使用其它洗脱条件，如 2.5mMD-Biotin+10mM NaOH；25~50mM NaOH；0.2% SDS：
(4) 柱再生：0.2M NaOH 洗涤 3~5 个柱体积；1M NaCl 洗涤 3~5 个柱体积；PBS 平衡 3~5 个柱体积。

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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