RNAlong RNA 长期保存液

RNAlong RNA 长期保存液

商品属性：

 产品介绍：

保存条件：4℃。
产品介绍：
RNA性质不稳定，极易降解。溶解于无RNase的TE 或水中的纯化RNA，即便是储存于-20 ºC也难免降解。为解决这一问题，可以将RNA沉淀或RNA溶液溶解于RNA 长期保存液中，允许RNA 4ºC保存或-20ºC至少保存1年而免于降解。RNA长期保存液是RNA样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。

操作方法：

规格

注意事项：

1. RNA 长期保存液可能抑制逆转录酶活性，做 RT-PCR 反应前应该用乙醇沉淀 RNA。
2. 在 RNA 长期保存液中的 RNA 的终浓度不应该超过 4μg /μl。用 RNA 长期保存液溶解 RNA 沉淀：
1. 对固体 RNA 沉淀，每 0.4-4μg RNA 沉淀加入 1μl RNA 长期保存液，反复吹打混匀或者室温振荡 15-30 min 溶解沉淀。干燥的 RNA 沉淀难以溶解，可反复吹打混匀后 50ºC 加热 10-15 min。最好先用小体积无 RNase 的TE 或水溶解 RNA 沉淀，然后按液态 RNA 操作。
2. 对液态 RNA 溶液，每 0.4-4μg RNA 溶液加入 1μl RNA 长期保存液，混匀。注意混合液中 RNA 长期保存液的体积百分比不低于 80%。
3. 测定 OD 值。注意加入相应量的 RNA 长期保存液做空白。
4. 将溶解的 RNA 样品储存于-20 ºC 或者-70 ºC。从 RNA 长期保存液中沉淀 RNA：
1. 估计 RNA 溶液终体积。加入 4 倍体积的无水乙醇，混匀。如果溶液体积过小，可加入 RNase free water 稀释 RNA 溶液,如果溶液中 RNA 含量低于 0.25μg /μl，可加入 5M NaCl(RNase free) 至终浓度 0.2M,混匀后再加入 4 倍体积乙醇。
2. 室温放置 5 min。
3. 12,000rpm 离心 5 min,弃上清,风干，溶解。
4. 重新沉淀的 RNA 溶解后可用于 RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。直接使用 RNA 长期保存液中的 RNA：直接吸取 RNA 长期保存液中的 RNA，进行普通或甲醛变性电泳和 Northern Blot。进行甲醛变性电泳时，最后上样的样品中的 RNA 长期保存液的浓度可高达 50%。
附：甲醛变性电泳样品准备： 临用前，混合水（87μl），甲醛（81μl），50%甘油/含 0.25 mg/ml 溴芬兰(48μl ) 和20X MOPS (24μl). 将上述混合液和 RNA 长期保存液中的 RNA 样品等体积混合，55 ºC 温育 10 min，按照标准
的甲醛变性电泳过程上样。

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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