细胞凋亡形态学检测试剂盒

本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断！

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细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。在体内，巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除，因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应，而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。 AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前，这使得Annexin V 与PS 的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。

细胞凋亡形态学检测试剂盒，使用方法

样品染色：

1. 离心收集悬浮细胞。离心机约300×g力，2-8°C，离心时间5分钟，弃培养基。

2. 用冷PBS洗涤细胞两次。

3. 用400 μl 1X Annexin V结合液重新悬浮细胞，浓度大约为1×106 cells/ml。

4. 在细胞悬浮液中加入5 μl Annexin V-FITC染色液，轻轻混匀后于2-8°C避光条件下孵育15分钟。

5. 加入5-10 μl 7-AAD染色液后轻轻混匀于2-8°C避光条件下孵育2-5分钟。 6. 立即用流式细胞仪或荧光显微镜检测。

细胞凋亡形态学检测试剂盒，使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小，重悬细胞是动作要轻柔，避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。

3.Annexin V-FITC（等）和Propidium iodide（等）是光敏物质，在操作时请注意避光，尽量减少它们暴露在光下的时间。有必要时可以使用带盖子的冰盒或铝箔纸避光。标记后将细胞保持在避光环境中。移液过程中短暂暴露在光线下（<30秒）是可以接受的。

4.由于细胞凋亡是一个快速和动态的过程，因此最好在染色后立即进行分析。

5.使用Annexin V-FITC（等） 试剂盒检测凋亡需要针对活细胞。不要固定细胞，固定操作会对结果产生干扰。

细胞凋亡形态学检测试剂盒，产品特点

1.方便：可用流式细胞仪或荧光显微镜检测；

2.快速：1小时内即可完成实验；

3.准确：能准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞，并计数各群细胞的比例。

保存温度：2-8℃避光

有限期：1年

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