线粒体膜电位检测试剂盒（TMRE法）

本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断！

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线粒体膜电位检测试剂盒（RHO123）是利用Rhodamine 123探针检测线粒体膜电位变化的试剂盒，可以快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化，可以用于早期的细胞凋亡检测。 粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。Rho123是一种可以通透细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料，广泛用作检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)的荧光探针。Rho123是阳离子荧光染料，在正常细胞中能够依赖线粒体跨膜电位进入线粒体基质。在细胞凋亡发生时，线粒体膜完整性破坏，线粒体膜通透性转运孔开放，引起线粒体跨膜电位(ΔΨm) 的崩溃，Rho123 重新释放出线粒体。通过荧光信号的强弱来检测线粒体膜电位的变化，可用于培养的细胞或从组织中提取出的线粒体的膜电位检测。

线粒体膜电位检测试剂盒（TMRE法），使用方法

样品染色：

1. 离心收集悬浮细胞。离心机约300×g力，2-8°C，离心时间5分钟，弃培养基。

2. 用冷PBS洗涤细胞两次。

3. 用400 μl 1X Annexin V结合液重新悬浮细胞，浓度大约为1×106 cells/ml。

4. 在细胞悬浮液中加入5 μl Annexin V-FITC染色液，轻轻混匀后于2-8°C避光条件下孵育15分钟。

5. 加入5-10 μl 7-AAD染色液后轻轻混匀于2-8°C避光条件下孵育2-5分钟。 6. 立即用流式细胞仪或荧光显微镜检测。

线粒体膜电位检测试剂盒（TMRE法），使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小，重悬细胞是动作要轻柔，避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。

3.Annexin V-FITC（等）和Propidium iodide（等）是光敏物质，在操作时请注意避光，尽量减少它们暴露在光下的时间。有必要时可以使用带盖子的冰盒或铝箔纸避光。标记后将细胞保持在避光环境中。移液过程中短暂暴露在光线下（<30秒）是可以接受的。

4.由于细胞凋亡是一个快速和动态的过程，因此最好在染色后立即进行分析。

5.使用Annexin V-FITC（等） 试剂盒检测凋亡需要针对活细胞。不要固定细胞，固定操作会对结果产生干扰。

线粒体膜电位检测试剂盒（TMRE法），产品特点

1.方便：可用流式细胞仪或荧光显微镜检测；

2.快速：1小时内即可完成实验；

3.准确：能准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞，并计数各群细胞的比例。

保存温度：2-8℃避光

有限期：1年

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