细胞凋亡、细胞计数都会用到细胞染色今天我们就聊聊：新手入门如何轻松搞定细胞染色，给你的细胞一个精致瑞丽的妆容？细胞骨架的荧光染色台 盼 蓝 染 色台盼蓝染色是细胞培养常见的实验，用于细胞计数，检测细胞活性。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝，而死亡的细胞，膜的完整性丧失，通透性增加，细胞可被台盼蓝染成蓝色。 小鼠胚胎干细胞台盼蓝染色三步轻松搞定台盼蓝染色：1、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释（106 细胞/ml）。2、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。3、计数：在三分钟内，用计数板分别计数活细胞和死细胞 。 台盼蓝染色看起来so easy，但新手入门还是需要注意：1、染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使检测结果偏离。2、可结合细胞计数方法，同时进行细胞计数和活力检测。3、有潜在致癌危险，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。BI台盼蓝染液 细胞免疫荧光染色荧光显微镜技术，不仅用于研究蛋白结构，对细胞凋亡检测也具有重要意义。常用的包括：Hoechst、碘化丙啶（Propidium-Iodide，PI）、annexin-v、JC-1、钙黄绿素-AM等方法。hoechst染色，紫外光下核染为蓝色hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合，有hoechest33342和hoechst33258两种，区别不大。但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况，而不是凋亡（当然晚期凋亡PI亦可着色）。但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以。JC-1染色非常简单。首先可将成品JC-1以DMSO配成储存液（1~5mg/ml），储存于-20℃，用时以培养液稀释至10ug/ml 终浓度。对贴壁细胞可以直接弃去培养液，漂洗细胞后直接加入染色液，10~30 min后在荧光显微镜下或者激光共聚焦下观察。用于悬浮细胞时还可以通过流式细胞仪进行检测，收集红/绿信号强度，计算其强度比。总结 

        作为癌症zhi王，胰腺癌的治疗尤其具有挑战性，只有8%的患者在确诊后5年内仍然存活。不仅传统的化疗和放疗对胰腺癌束手无策，就连革新了多种其它类型癌症治疗的免疫疗法对胰腺癌在很大程度上也是无效的，这是因为，胰腺肿瘤有办法抑制免疫攻击。胰腺导管腺癌组织中免疫抑制性髓细胞的广泛浸润被认为是这类癌症对免疫疗法耐药的一个主要机制。7月3日，发表在Science Translational Medicine上的一篇封面论文[1]揭示，在部分髓细胞亚型的细胞表面高度表达的整合素CD11b/CD18的小分子激动剂ADH-503可促进对抗胰腺肿瘤的有力免疫攻击。? 来自美国华盛顿大学医学院的Roheena Z. Panni等证实，单独使用ADH-503可以降低小鼠胰腺肿瘤的生长和转移；当与免疫疗法PD-1抑制剂联合使用时，ADH-503可显著缩小肿瘤，并改善小鼠生存。这些结果表明，ADH-503有望使耐药性胰腺癌变得更容易响应免疫疗法。目前，临床上使用的免疫疗法（如PD-1/PD-L1抗体）主要通是过激活体内的T细胞来攻击癌症。*初，在实验室工作的研究人员发现，利用这类T细胞免疫疗法确实能够杀伤胰腺癌细胞，但当医生试图利用这类疗法治疗胰腺癌时，仅不到5%的患者病情有所好转。不过，T细胞并不是对癌症进行免疫攻击的参与者。髓细胞是在肿瘤内以及肿瘤周围被发现的另一种免疫细胞，既可以抑制免疫反应，也可以增强免疫反应。它们通过释放免疫分子来影响肿瘤所招募的T细胞的数量和抗癌活性。Panni等意识到，仅靠激活T细胞并不足以治疗胰腺癌，可能还需要操纵髓细胞，使其倾向于激活T细胞的抗癌作用。

这些酶正在做的反应是令人难以置信的......当我们次看到它们时，我们正在摸不着头脑，”霍华德休斯医学研究所(HHMI)研究员Wilfred van der Donk说，他领导了这项研究。“然后我们必须煞费苦心地证明我们认为酶正在做的反应确实已经完成了。”Van der Donk，也是Richard E. Heckert资源化学主席，以及他在伊利诺伊州的同事与HHMI调查员和加州大学洛杉矶分校生物化学和生理学教授Tamir Gonen的实验室合作，确认他们的研究结果，本周发表在“ 科学”杂志上。这项工作得到了HHMI和国立卫生研究院的支持。作者Chi Ting和van der Donk是Carl R. Woese基因组生物学研究小组的成员，该研究小组旨在通过探索基因组来发现新的天然产物 - 微生物产生的潜在有用物质，这一战略被称为基因组挖掘。“基因组挖掘可以让你开始寻找你根本不知道它们会是什么的化合物，”van der Donk说。“[我们团队]的许多实验室都试图通过基因组挖掘找到新的抗生素......你寻找不寻常的东西，我们不知道正在制造什么，然后你试着让这种化合物在一个友好的有机体中生长。”细胞使用称为氨基酸的特殊化学成分来制造蛋白质，这是生物的主要结构和内部机器。蛋白质是由20种不同类型的氨基酸组成的长链; 肽是较短的链。一些类型的微生物天然产物由装饰有售后市场化学部件的小肽形成。蛋白质和大多数肽由核糖体组装而成，这些巨型蜂窝机器就像面包店里的糕点厨师一样。根据基因编写的食谱，核糖体可以将任何氨基酸序列连接在一起; 核糖体是有效和多功能的。其他基于肽的天然产品是由专门的酶组成的，它们像一个家庭面包师，用心脏学习的*喜欢的食谱 - 这些酶不遵循模板，而是一遍又一遍地创建相同类型的联xi和修改只制作一种产品。“在天然产物的生物合成中，这两种途径都被用来制造天然产品，”van der Donk说。“现在，我们偶然发现了两者都具有特色的东西。”研究人员在研究感染植物的细菌Pseudomonas syringae中发现的一组基因时发现了他们意想不到的发现。他们发现他们的基因簇包括一个保存由核糖体制备的肽的信息，而另一个编码可以在肽链上添加另一个氨基酸的酶。糕点厨师正在组装面团制作面包，但将其交给家庭面包师完成准备。“回想起来，这只是一种非常聪明的做事方式，”van der Donk说。“拥有一种可以对预先存在的肽进行此操作的酶意味着现在......你可以将它用作支架，并且只是一次又一次地制造自然产品。”他们在假单胞菌中发现的合成方法的类型以这种方式起作用，因为一旦将新的氨基酸添加到肽中，它就会在一系列步骤中被修饰然后被破坏，使原始核糖体产生的肽返回到起始步骤。通过这种方式，它有点像酸面团的首fa。只要它保持活动状态，就不需要从头开始重新创建每个后续批次的面包。为了充分描述他们的天然产品及其合成，van der Donk的团队希望更好地了解其结构。然而，证明该分子太不稳定而不能使用传统技术。研究人员向Gonen伸出援手，Gonen的实验室*近采用了jian端的方法 - 使用电子显微镜对闪蒸冷冻的纯化物质微晶 - 来确定小分子的结构。“一旦你制造了天然产品，现在你需要弄清楚它是什么......我们的合作者想要展示这种方法对于一种未知的天然来源分子的效用，”van der Donk说。“对于这两个实验室来说，这确实是一个双赢的局面。我认为整个天然产品社区可能都希望开始使用这种技术。”现在van der Donk和他的团队意识到这种替代合成途径的存在，他们已经发现了类似机制的其他例子，包括土壤微生物产生抗肿瘤化合物。除了扩大识别产生有前景的天然产物的基因簇的能力之外，研究人员还兴奋地寻找新的途径来使用途径。“我们也很兴奋能够将它用于合成生物学，”van der Donk说。“因为开销，制造天然产品所需的资源量在这里相当低。你制造这种肽，一些酶，然后滚出一种抗肿瘤化合物... ...有很多现在对工程菌具有抗癌活性的兴趣，这对于让有机体为你制造分子来说是相对低调的果实。“

新发现表明，如果女性在被诊断患有乳腺癌之前服用阿司匹林，那么在基因组某些区域具有特定DNA特征的女性可能会活得更长。在美国癌症协会的同行评审期刊“癌症”早期在线发表，研究结果表明需要研究阿司匹林在某些人中预防或治疗乳腺癌的可能性。通常不清楚为什么一些患者从特定疗法中获益，而另一些患者则没有。在某些情况下，基因序列起作用，但在其他情况下，对DNA的化学修饰可能很重要。后者被称为表观遗传变化，它们包括称为DNA甲基化的过程。北卡罗来纳大学教堂山分校的Tengteng Wang博士和她的导师Marilie Gammon博士想知道DNA甲基化是否会影响阿司匹林对乳腺癌患者的影响。研究小组研究了乳腺肿瘤组织中的DNA甲基化 - 包括控制13种乳腺癌相关基因表达的DNA位点 - 以及患者血液中循环的细胞。该研究首次研究了DNA甲基化对阿司匹林使用与乳腺癌患者死亡率之间关系的影响。在1996年至1997年期间被诊断患有乳腺癌的1266名妇女的研究中，截至2014年底，有476人死于任何原因，202人死于乳腺癌。使用阿司匹林的妇女因任何原因死亡的风险在控制乳腺癌相关BRCA1基因表达的区域DNA未甲基化的患者中，死于乳腺癌的风险较低。还观察到与阿司匹林使用和死亡率相关的其他甲基化模式。作者指出，这些发现可能有助于鉴定因乳腺癌细胞DNA甲基化特征而在乳腺癌诊断后可能从阿司匹林中获益的个体。未来的研究应该考虑更全面的DNA甲基化谱，以便更好地描述有风险的女性。“考虑将DNA甲基化谱作为阿司匹林 - 死亡率关联的潜在调节剂，可能为阿司匹林在乳腺癌诊断后死亡率使用的潜在生物学机制提供新的见解，”王博士说。“我们的研究结果如果得到证实，也可能通过使用表观遗传标记识别患者亚组来影响临床决策，预先诊断阿司匹林的使用会影响随后的死亡率，并可能有助于改进风险降低策略以提高乳腺癌患者的生存率癌症，“Gammon博士说。在随后的社论中，威斯康星大学麦迪逊分校的Kristen Malecki，博士，公共卫生硕士指出，研究结果支持了研究表观遗传学与阿司匹林等低成本疗法之间相互作用的研究的重要性。根据Malecki博士的说法，“Wang等人的研究表明，除了基因 - 环境相互作用外，还存在表观遗传和环境相互作用，并表明DNA甲基化可能在将来有助于支持对可能接受治疗的个体进行鉴定。可能不会成功。 

康奈尔大学的新研究详细介绍了两种高致命性病毒在蛋白质结合时具有更高的致病潜力。由微生物学和免疫学系副教授Hector Aguilar-Carreno领导的一个研究小组在一份发表在病毒学杂志上的研究中发现了一种可能与一对病毒相似的情景。这两种病毒的共感染可能发生在同一宿主中，但我们不知道如果他们的蛋白质结合会发生什么。我们发现，他们不仅可以一起工作，而且可以比单独工作更好。“Aguilar-Carreno研究小组的成员是Nipah和Hendra病毒如何附着和融合宿主细胞的专家。病毒的天然宿主是果蝠;这种关系是在Aguilar-Carreno的丈夫，康奈尔生物技术研究所工作人员Armando Pacheco为期刊封面选择的插图中捕捉到的。研究人员的重点是病毒融合蛋白(或F蛋白)和附着蛋白(G蛋白)。在之前的研究中，研究小组公布了两种蛋白质如何发生物理相互作用以实现病毒感染：AG蛋白附着于细胞;G然后触发F上下翻转，触发细胞和病毒膜之间的融合 - 感染的第1时刻。Aguilar-Carreno知道G和F之间的这种“舞蹈”是病毒感染的关键步骤，但很想知道如果蛋白质得到新的伴侣，舞蹈会如何变化。由于Nipah和Hendra病毒都可能共同感染果蝠，因此蛋白质伴侣转换很可能在野外发生。“这种蛋白质的组合具有更松散的相互作用，”Aguilar-Carreno说。“这种松弛实际上对应于更强的融合能力 - 因此暗示更大的”引发疾病的能力。他和他的团队在实验室中使用人类细胞中的遗传方法测试了不同的Nipah-Hendra蛋白质组合。在一些配对中，两人紧紧地握着一个探戈般的拥抱。但是一种混合物--Hendra F和Nipah G--表现得像Lindy Hoppers，允许F蛋白质执行“天线”，加强病毒和细胞之间的融合。这种混合蛋白质功率偶具有有趣的含义。“我发现它很有吸引力 - 相互作用的紧密性对这两种蛋白质至关重要，”Aguilar-Carreno说。“如果它们太紧，它们就无法正确协调进入细胞。现在我们知道这一点，我们可以利用它来阻止病毒 - 细胞融合。”Aguilar-Carreno说，这种治疗方法可能用于提高疫苗效力，或作为疫苗的替代品。他的实验室正在研究动物模型的疫苗方法，以及这一新发现所带来的治疗方法。Aguilar-Carreno的实验室还在开展相关研究，可能会导致无疫苗治疗或改进疫苗来治疗包膜病毒，其中包括人类免疫缺陷病毒(HIV)和流感等传染病。包裹的病毒被包裹在由一块受感染细胞的质膜制成的外层中，这可以保护病毒并帮助它感染其他细胞。“我们的工作可能导致药物，”阿吉拉尔 - 卡雷诺说，“这使得诸如流感疫苗等发明具有更广泛的保护和更大的功效。” 

研究人员揭示了细菌关键酶表面上以前未被发现的热点，这可能指导抗生素设计的新方法。研究人员已经确定了一种细菌酶的关键部分，这些细菌酶可以用新药靶向，以抑制某些细菌感染的传播。来自日本北海道大学，美国杜克大学和韩国天主教大学的科学家团队最近在Nature Communications杂志上发表了他们的研究结果。耐药性细菌感染夺去了全世界数百万人的生命。由于全球抗生素耐药性的出现，科学家们不断寻找新的抗菌化合物。“新抗生素的一个有吸引力但未开发的目标是一种叫做MraY的酶，它有助于细菌细胞壁的形成 - 这是所有细菌的必需成分。已发现五种天然产物具有抗MraY的抑制活性。然而，在分子水平上，抑制剂和MraY之间究竟发生了什么，目前尚不清楚，阻碍了药物的开发。为了进一步了解这些相互作用，研究人员分析了三种核苷类抑制剂的晶体结构，这些核苷酸抑制剂针对MraY - 脂质体霉素/卡普拉霉素，卡普霉素和mureidomycin。每种类型的MraY抑制剂都具有独特的化学结构和抑制机制。科学家使用X射线晶体学，一种用于确定晶体原子和分子结构的技术，分析抑制剂如何与MraY结合并与MraY相互作用。这些结构揭示了MraY表面上先前未知的斑点，其中抑制剂与酶结合作为干扰过程的一部分。具体来说，研究人员发现所有三种类型的核苷抑制剂都以类似的方式与MraY表面上的一个区域结合，称为尿苷结合口袋。然而，它们各自与至少两个其他MraY结合位点形成不同的相互作用。这些结合位点和口袋可能是新抗生素的可能靶标，其设计与抑制剂相似。“我们的工作可以指导以MraY为目标的抗生素设计的新方法，”Satoshi Ichikawa说。“通过利用这些化合物如何与MraY结合并与之相互作用的知识，有可能设计出一种MraY抑制剂，其靶向结合位点的新组合，具有改善的药理学特性和治疗潜力。” 

布里斯托大学的研究人员于近日在《Developmental Cell》杂志上发表了一篇文章，他们发现了一个令人吃惊的现象：果蝇体内的脂肪体细胞竟然在伤口修复和预防感染中发挥着重要作用。这些细胞过去被认为是固定不动的，它们可以像虫子运动一样迁移到伤口处，而不是像大多数游动细胞一样通过粘附在其他结构上运动。到达伤口之后，这些脂肪体细胞发挥着几种重要功能。“它们工作更努力，更像一个团队。” 该研究资shen作者之一Paul Martin说道。脂肪体细胞涌入伤口处，移动它周围的碎片，而这些碎片可以被免疫细胞吞噬。脂肪体细胞很大，因此1-4个细胞就可以把任何伤口堵住。这些细胞可以在伤口修复时把细菌排除在外，同时帮助产生抗菌肽以防止感染。这些脂肪体细胞会一直驻留在伤口处，直到伤口完全修复。“随后它们就会脱离伤口并离开，因为它们的工作已经完成。”Martin说道。脂肪体细胞主动迁移到表皮伤口同时，这些细胞到达伤口的方式也是令人惊讶的。当研究人员正在对果蝇的免疫细胞进行摄影时，他们发现视野下有大的阴影在移动。“我当时就很好奇这是不是大的脂肪体细胞。”该研究第1作者Anna Franz说道。“但是理论上这些细胞不应该移动啊，因为这些细胞不是游走性细胞。”然而事实上它们是，而且它们还是通过自己移动的。“我们很确定它们不是通过漂移到达伤口并粘附在伤口处的。”Martin说道。因为基因工程修饰使收缩性蛋白质失活后，这些脂肪体细胞就不能移动到伤口，这意味着这些细胞是主动迁移的，而不是简单地通过血淋巴（果蝇的体液）到达伤口。尽管大多数细胞使用很小的肌动蛋白——丝状伪足和板状伪足运动，但是这些细胞似乎使用蠕动收缩在血淋巴中游动。它们根本不使用细胞中心固定的摩擦运动。这种收缩会像波一样向细胞后方运动，从而推动细胞向前运动。“我们使用蠕动这个单词是因为肌肉收缩将食物从食管移动到肠道，这种收缩叫做蠕动，而这些细胞在视频中就是这样运动的。”Martin说道。脂肪体细胞封闭伤口Franz认为这些细胞移动的方式不是脂肪体细胞独有的。但是她说：“人们主要聚焦于通过粘附在一个基底上运动的细胞，因为在细胞培养的时候这更容易观察。”这些研究表明细胞也可以在不粘附于基底的情况下运动，她希望他们将进一步研究：“这就是一个你可以在动物体内轻易研究这些细胞的例子。”尽管研究人员已经确认这不是由于免疫细胞招募，但是这些细胞是如何移动到伤口的原因还不清楚。因为就算是缺乏免疫细胞的情况下，这些细胞也会迁移到伤口。但是一旦它们到达伤口，它们确实会和免疫细胞协同工作。“因此在健康状态（如伤口修复）以及病理状态（如肿瘤）下，脂肪体细胞和免疫细胞可能是一个很重要的合作团队。”Martin说道。他希望进一步在脊椎动物体内研究一些东西。已有证据表明脂肪体细胞可以帮助脊椎动物进行伤口修复，但是迄今为止还没有人发现脊椎动物脂肪体细胞可以移动。“但是它们可能可以移动。”他说道。“现在由于这项研究，这些细胞很值得关注。认为它们迁移到伤口并完成一些重要的功能并不疯狂。”（转化医学网360） 

表观遗传药物的新进展为癌症和其他疾病的治疗提供了新的选择，但这些新疗法是否可能产生长期影响，影响女性患者及其后代的生育能力?最近发表在《临床表观遗传学》(Clinical Epigenetics)上的一项研究表明，鉴于他们最近对泰泽梅司他(Tazemetostat)及其对雌性小鼠卵母细胞和生殖系基因组的影响进行的研究结果表明临床药物试验中应该更仔细地研究这一点。癌症诊断和治疗技术的进步使医生能够更早地发现和治疗癌症，从而在许多情况下获得更好的预防。然而，这也意味着更多的女性在传统上被视为关键生育年的癌症期间接受治疗。虽然药物的临床试验检验了对病人的副作用，但它们往往没有考虑到对病人未来后代的影响。随着以基因为基础的癌症治疗方法的发展，特别是以表观遗传学为基础的治疗方法，靶向治疗药物引入患者表观基因组的变化可能会对传递给患者后代的生殖系基因组产生持久的影响，可能会产生无意的负面影响。鉴于雌性哺乳动物天生具有一定数量的鸡蛋(卵母细胞)和生殖年龄的女性正在接受癌症治疗,显然有必要更充分地了解这些新疗法对那些希望在治疗后生育孩子的妇女可能产生的后果。在最近发表在《临床表观遗传学》(Clinical Epigenetics)上的一项研究中，研究人员研究了新开发的表观遗传学药物Tazemetostat(目前正在临床试验中;其作用机制是抑制生殖年龄小鼠Zeste 2 (EZH2)的靶酶增强剂。由于EZH1和EZH2在一系列肿瘤中参与功能突变的获得和过表达，因此被选为表观遗传学治疗的靶点:抑制这种酶的表达，抑制可能导致肿瘤细胞突变或增殖的基因的表达。然而，虽然抑制EZH1/2可能是针对癌症和其他疾病的靶向治疗，但在本研究中发现，抑制EZH1/2会严重消耗H3K27me3，而H3K27me3是雌性小鼠卵母细胞生长所必需的。结果显示，泰泽美施他对雌性小鼠卵母细胞的生长和胎儿卵母细胞的发育均有明显的负面影响。更令人担忧的是，研究人员发现，一旦H3K27me3耗尽，即使治疗终止，它也无法恢复。损耗造成的损害是持久的，导致母亲的基因组和卵母细胞的基因组中H3K27me3蛋白的丢失(显然影响了生殖系)。虽然这项研究是在实验室小鼠身上进行的，但研究人员强烈主张，同样的效果也可以在人类女性身上看到，并呼吁在临床试验期间进行更广泛的研究，以检验这些其他可能的后果。 鉴于这项研究的结果,很明显,需要更多的研究,探讨了对生育能力的潜在影响和未来后代在开发和测试epigenetically-based药物,可能从根本上改变的功能基因被认为与生育和繁殖成功。豪格Prokopuk的研究,西方作为警示提醒我们,有时会有不可预见的战争付出的代价就是对汉姆比尔知道我们现在了解遗传学和表观遗传学,和我们继续learn-researchers前臂与知识给定的所有潜在的副作用疗法进一步细化为一定数量的患者甚至特定的病人:真正的精密医学。 

根据东芬兰大学的一项新研究，对于中年男性来说，摄入更多蛋白质与心脏衰竭风险略有升高相关。在这项研究中，来自鱼和蛋的蛋白质与心力衰竭风险无关。该研究结果发表于Circulation：Heart Failure。尽管高蛋白饮食的普及，但很少有关于高蛋白饮食如何影响男性心力衰竭风险的研究。“由于许多人似乎认为高蛋白饮食的健康益处是理所当然的，因此明确这些饮食可能带来的风险和益处非常重要，”研究作者，兼职教授Jyrki Virtanen博士说。库奥皮奥东芬兰大学的营养流行病学。“早期的研究表明，高蛋白质饮食 - 特别是动物来源的饮食 - 增加了2型糖尿病甚至死亡的风险。”研究人员在研究开始时研究了2,441名年龄在42到60岁之间的男性，平均随访了22年。总体而言，研究人员发现在研究期间诊断出334例心力衰竭，70%的蛋白质消耗来自动物来源，27.7%来自植物来源。大多数膳食来源的蛋白质摄入量较高，风险略高。研究人员表示，在这项研究中，只有来自鱼和蛋的蛋白质与心力衰竭风险无关。在这项研究中，研究人员根据每日蛋白质消耗量将男性分为四组。当他们比较吃蛋白质最多的人和最少吃蛋的人时，他们发现心脏衰竭的风险是：所有蛋白质来源均高出33%;动物蛋白质含量高出43%;乳蛋白质含量高出49%。植物蛋白质含量高出17%。“由于这是最早报道膳食蛋白质与心力衰竭风险之间关系的研究之一，在我们知道调节蛋白质摄入量是否有益于预防心力衰竭之前，还需要进行更多的研究，”Heli EK Virtanen，M。说。 Sc。，第1作者，博士，博士。库奥皮奥东芬兰大学的学生和早期职业研究员。“长期干预比较饮食与差异蛋白质组成和强调差异蛋白质来源对于揭示蛋白质摄入对心力衰竭危险因素的可能影响非常重要。其他研究人群也需要进行更多的研究。“ 

在细胞因子ELISA试剂盒做试验的时分，可能会发作测验成果有差错的现象，相同的材料和相同的操作方法做出的成果就天壤之别这是为什么呢？ 一、首要可以多设平行空孔，请别人代庖，以判别终究是否操作问题。 二、还可以关于活性十分高的包被物和酶符号物，如果第1次挑选的规模刚好在其渠道方位边际，那么在重复的时分，每次取样带来的微量差错就很简单导致大的误差了，特别是线性比较好的质料试剂，这个就很正常了。主张每次取样的时分只使枪尖一点点坐落液面下，防止吸嘴外面沾有少数抗原or抗体or酶而使成果重复不上。 如果酶不稳定，有何高招？保存浓度尽量高些：别的可以增加牛血清白蛋白等蛋白保护剂，以防止其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解：参加50%甘油-20度保存、防止重复冻融。   细胞因子ELISA试剂盒，样品稀释倍数断定?在运用操作Elisa试剂盒时，检测样品的因素是试验重点之一。依据上海继锦技术员的研讨与发现，细胞因子ELISA试剂盒样品稀释还有这等讲究。 样品进行稀释，单个用户取5μl乃至1μl样品进行稀释，因为吸嘴上不可防止地沾有样品以及微量移液器的精度不行，因而形成样品稀释倍数不精确，检测成果出现问题，买了个试剂盒,里边的抗体没注明稀释倍数,这个试剂盒说是测96次的,可是到sigma查的这个抗体是要稀释6万倍用的,这样的话就是九万六千次了怎样可能有这么便宜的工作呢?个稀释梯度的试验，500倍，2500倍和1万倍稀释的成果没有明显不同。真是太好了，那这个试剂盒能测无数个样品了，反正其他的试剂都是试验室常用的。

ELISA试验过失是测量值与真实效果之间的区别，要想知道过失的大小，有必要知道真实的效果，这个真实的值，我们称之“真值”。  ELISA试剂盒试验真实值从理论上说，样品中某一组分的含量一定有一个客观存在的真实数值，称之为“真实值”或“真值”。用“μ”表明。但实习上，对于客观存在的真值，我们不可能精确的知道，只能跟着测量技术的不断进步而逐步靠近真值。实习工作中，一般用“标准值”代替“真值”。 ?精密度精密度是几回平行测定效果互相靠近的程度。ELISA试剂盒试验标准值选用多种可靠的分析方法、由具有丰盛经历的分析人员经过重复屡次测定得出的效果平均值，是一个比照精确的效果。与我们试验有关的是将纯物质中元素的理论含量作为真实值。实习工作中一般用标准值代替真值。例如原子量、物理化学常数：阿佛伽得罗常数为6.02×10 等。ELISA试剂盒试验精确度精确度是测定值与真实值靠近的程度。为了获得可靠的效果，在实习工作中我们总是在相同条件下，多测定几回，然后求平均值，作为测定值。一般把这几回在相同条件下的测定叫平行测定。假设这几个数据互相比照靠近，就说明分析的精密度高。ELISA试剂盒试验精密度和精确度的联络高精密度不一定保证高精确度。精密度是保证精确度的先决条件。

进口ELISA试剂盒是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。       ELISA的影响因素较多，加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。    人员培训实验是人操作的，因此检验人员需经过培训，熟练掌握本专业如下几方面的技术知识：    1.检验项目的基本原理 (ELISA 原理)；    2.实验意义；    3.熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；    4.熟悉检测试剂性能(包括试剂盒组成，包被片段及其组成)；    5.熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。    6.某些特殊项目的检测如抗 HIV 等需经有关部门组织的专门培训班，考试合格后持证上岗。 进口ELISA试剂盒方法虽然简单，但它又是需要您仔细对待的。一个成功的ELISA实验就需要一个好的ELISA试剂盒。

纽约ITHACA - 世界食品供应将变得更加安全，因为食品行业转向高分辨率，全基因组测序 - 同时检测特定生物体的完整DNA。这种使测序无处不在的举措将导致始终如一地可靠地检测沙门氏菌。由康奈尔大学和火星全球食品安全中心(GFSC)的研究人员共同撰写的一篇发表在“微生物学前沿”杂志上的论文阐明了突破。“沙门氏菌是全球公共卫生和经济影响最da的食源性病原体。它是世界各地腹泻的主要原因之一，”食品安全教授兼康奈尔食品系统研究所教授Martin Wiedmann说。“沙门氏菌可能是轻微的，也可能导致死亡，因为它的严重程度取决于沙门氏菌的血清型[不同的变异] - 而这正是我们试图找到的。”该论文描述了世界各地的食品工业应如何更频繁地使用分子方法来分类和表征沙门氏菌。本文将旧的亚型实践 - 一些可追溯到20世纪30年代的实践 - 与较新的全基因组测序进行了比较，这种方法可以分析更广泛，更完整的基因组区域。Wiedmann说，通过这种技术，科学家可以更准确地识别特定的沙门氏菌菌株，并确定疾病爆发的起源和途径。例如，7月初美国食品和药物管理局和联邦疾病控制和预防中心(CDC)使用该技术，因为他们开始调查猪耳狗和人类之间的可疑沙门氏菌链接 - 由于人们处理对待。根据疾病预防控制中心的数据，当时有13个州有45例沙门氏菌病li，其中有12人住院治疗。“全基因组测序正迅速成为沙门氏菌亚型选择的首xuan方法，”该论文的主要作者，火星全球食品安全中心的高级研究科学家Silin Tang说。“食品经常通过日益复杂的供应链接触消费者，创造了许多食品安全可能受到损害的机会。最近的案例强调了加强食品行业中沙门氏菌控制措施的必要性，包括使用适当的亚型工具快速准确地跟踪污染源。 “唐说，食品行业有机会创建生物信息学专业人才管道 - 利用软件工具来理解生物数据 - 利用全基因组测序技术的全部潜力。此外，Wiedmann说，本文将学术分析转化为有用的行业应用。“这将有助于工业实施更好的方法来主动解决沙门氏菌的并发症和复杂性，”他说。郑重声明：本文版权归原作者所有，转载文章仅为传播更多信息之目的，如作者信息标记有误，请第1时间联系我们修改或删除，多谢。 

   不同的抗体产品保存、运输方法也是不同的，保存是否得当直接影响到抗体的实验效果，选对了保存方法，大部分的抗体活性都可以维持数月甚至数年。所以，正确的保存抗体是极为重要的。刚收到货时需立即保存：      1.请务必在12000rpm离心1分钟后再打开管盖进行分装和保存。         注意：如果抗体体积小于50ul，请延长离心时间至5分钟，以保证全部抗体均离来。      2.绝大多数抗体保存在-20℃是完全足够了，没有证据显说明保存在-80℃会有更多处。      3.避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。尽量将抗体保存在冰箱里层，而不是门上。 抗体的分装要求与保存温度：    1.分装可以zui大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害，同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。    2.分装的量以一次实验用完为好，zui少不能少于10ul每份。因为分装体积越小，抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响    3.复融后的分装抗体如果一次用不完，将剩余母液保存在4℃，避免再冻起来！    4.抗体工作液应该当天配制当天用完，在4℃尽量不要超过1天。   上海远慕公司产品远销全国各地。多年以来我们以极其苛刻的要求控制产品的质量，坚持生物科学研究与世界同步的理念。因此也得到了全国各大医院院校、三甲医院、研究所，科研机构等单位的一致认可，并发表了多篇文献。公司主营抗体、ELISA试剂盒、胎牛血清、培养基、标准品、生化试剂等。咨询订购！ 

科学家发现了一种称为RKIP的蛋白质，它可以防止前列腺癌细胞扩散。 这个发现是重大的。科学家称，只要癌细胞不扩散，他们就有望在几年内治愈癌症。科学家称，RKIP蛋白质可以控制癌细胞扩散。这一发现，让人类有希望控制癌症。如果可能的话，人类将有办法阻止癌症向晚期转化。癌症的转移通常是这样的：虽然许多癌症发病位置是固定的，但是一些癌细胞可以进入血液，参与循环，而遍及全身。如果这些癌细胞在身体的特定地方聚集起来，就会发生病变，也就是通常所说的转移瘤。在此之前，就有许多的科学家已经知道有许多的蛋白质可以预防早期的癌症。在癌症发病中，有一种称为Raf过程。Raf过程可以同时引起癌症和转移瘤。科学家正寻找一种可以阻止Raf过程的蛋白质——RKIP。结果发现，RKIP只能阻止癌细胞扩散，但是不能阻止它生长。密歇根州大学的分子生物学家Evan Keller和他的助手Ann Arbor等对这个想法做了大量的实验。他们通过老鼠，培养前列腺癌细胞，发现这些老鼠细胞中的RKIP比正常的老鼠要少。为此，科学家要决定的是，RKIP是否在人体细胞中也阻止前列腺癌细胞的扩散。这个科研小组，对死亡数小时的人体进行观察。他们发现，正常的前列腺中的存在着RKIP。但是有前列腺癌的细胞中，RKIP数量很少。科学家在身体的其它部分没有发现RKIP。为了验证人体如果失去RKIP，就容易引起转移瘤，科学家采用了一个迂回的方法。他们在已经有转移瘤的细胞中，加入大量的RKIP。科学家称，如果猜想正确的话，大量的RKIP将阻止癌细胞的转移。实验结果表明，科学家猜想是正确的。通过在老鼠身上做的实验表明，癌细胞依然还在前列腺中。 

    T细胞作为免疫系统中的重要组分和效应细胞，在抵抗细菌病毒等外来病原体和杀伤癌细胞等方面扮演着不可或缺的重要角色。因此本文为大家带来近期关于T细胞的zui新研究进展，与大家一些学习进步！    在慢性病毒感染期间，杀伤性T细胞引发恶病质产生在一项新的研究中，来自奥地利、德国、美国和瑞士的研究人员鉴定出病毒感染可导致恶病质的机制。在遭受一种特定病毒感染的小鼠中，杀伤性T细胞引发脂肪组织和体重的减少，不过它们如何做到这一点仍然不清楚。相关研究结果发表在Nature Immunology期刊上。     为了了解感染如何促进恶病质产生，这些研究人员研究了一种业已确定的病毒感染模型：感染淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（lymphocytic choriomeningitis virus， LCMV）的小鼠，这种病毒是一种啮齿动物传播的病原体，也可以感染人类。他们观察到，在接触这种病毒后的一周内，这些小鼠便表现出人类恶病质患者的症状：它们移动得更少，体重减轻了20％，部分肌肉和脂肪组织消失了。    这些研究人员进行了大量实验，以便了解是什么在他们的小鼠模型中促进恶病质产生。他们首先阻断了一些"常见的可疑"蛋白，比如IL-6和TNFα，已知这些蛋白在小鼠模型中引发恶病质。但令人吃惊的是，这对动物的组织消瘦没有任何改善，这表明一种不同的机制在起作用。因此，这些研究人员决定研究T细胞是否可能发挥作用，这是因为已知它们在小鼠中会促进与小鼠LCMV感染相关的病理出现。令他们吃惊的是，他们发现，当他们在LCMV感染前几天注射破坏杀伤性T细胞的抗体时，他们能够阻止这些小鼠体重减轻：相比于未受感染的健康小鼠，杀伤性T细胞已被剔除的小鼠显示出很少甚至没有体重减轻。Baazim回想道，"这是最令人吃惊的方面之一"，这是因为杀伤性T细胞---也称为CD8+ T细胞---在此之前并未发现与恶病质有关。      进一步的实验显示杀伤性T细胞需要被LCMV病毒激活以触发恶病质，而且它们还需要被特定的抗病毒细胞因子激活。然而，目前还不清楚杀伤性T细胞究竟如何促进恶病质产生。 Bergthaler说，他认为这些T细胞可能正在释放一种可溶性因子来指导脂肪组织开始燃烧脂肪，或者它们首先通过另一种类型的细胞传递这种信息。他说，"这是我们留下的重大问题之一。我们知道T细胞在起作用，但我们不知道它们是如何起作用的。"就目前而言，T细胞在促进恶病质产生中的作用似乎仅xian于LCMV感染。当这些研究人员用流感病毒重复一些实验时，他们发现T细胞似乎没有引发恶病质。Bergthaler团队当前正在探索这种机制是否能够阻止其他的病毒感染。    美国威尔康奈尔医学院内分泌学家Marcus Goncalves实验室的博士后研究员Ezequiel Dantas（未参与这项新的研究）指出，对癌症相关恶病质的研究主要集中在细胞因子上，比如IL-1、IL-6和TNFα。然而，旨在阻断这些细胞因子的临床干预尚未显示成功---"这意味着我们尚未了解全部情况"，Dantas说。对他而言，这项新的研究表明恶病质可能是通过科学家们尚未了解的其他机制发生的。Dantas补充道，"他们正在描述一种以前尚未探索过的全新体重减轻途径。" 

对基因组进行测序变得越来越便宜，但是对结果数据的理解仍然很难。研究人员现在已经找到了一种从测序DNA中提取有用信息的新方法。通过对细菌中基因对之间共享的细微进化特征进行编目，该团队能够发现数百种以前未知的蛋白质相互作用。该方法现在应用于人类基因组，并可以产生关于人类蛋白质如何相互作用的新见解。该项目是华盛顿大学医学院和哈佛大学科学家之间的合作。他们的报告发表在7月11日的“ 科学”杂志上。“蛋白质 - 蛋白质相互作用是生物功能的基础。现在可以使用近年来产生的大量基因组序列数据来预测它们，这是非常了不起的，”资shen作者，大学生物化学教授David Baker说。华盛顿医学院。细胞充满蛋白质，其中许多蛋白质必须物理相互作用才能发挥作用。这可能意味着聚集在一起复制DNA或形成像肌肉中那样的长纤维。然而，在许多情况下，科学家们仍然不知道哪些蛋白质会相互作用。发现新的配对可能是缓慢，费力和昂贵的。寻找更好的方法，由四位计算生物学家组成的团队研究了一种称为共同进化的现象，其中一种基因的变化与另一种基因的变化相关。这可以表明两个基因以某种重要方式相连。例如，如果一个基因突变以产生具有改变形状的蛋白质，则第二个基因可以进化以产生具有与第1个蛋白质互补的形状的蛋白质，从而保持两个蛋白质相互作用的能力。近年来，研究人员在生物体的DNA中发现了一些微妙的分子相互作用的证据。“共同进化对于了解特定蛋白质如何相互作用非常有用，但我们现在可以将其用作发现工具，”首席作家钱聪说，他是华盛顿大学医学院的博士后研究员。该研究小组将来自大肠杆菌的4,000多个基因与来自40,000多个其他细菌基因组的DNA序列进行了比较。这种大量遗传信息库存使研究人员能够使用定制的统计模型来评估每种大肠杆菌基因之间的共同进化。经过几轮分析，发现1,618对具有共同进化的最强证据。通过将它们的结果与一小组已经表征的蛋白质 - 蛋白质相互作用进行比较，研究人员获得了比以前的实验筛选方法更高的准确性在新发现的相互作用中，有一些暗示了新的生物学见解。其中之一，蛋白质毒素与其抗毒素之间的相互作用，可能有助于解释，研究人员推测，为什么一些大肠杆菌占据其微生物生态位。另一项新发现的配对表明，一种名为PstB的蛋白质，已知在新陈代谢中发挥作用，也可能有助于协调蛋白质合成和矿物质运输。“在生物学中很少有软件工具能够做出足以进行测试的预测，但这正是这里发生的事情，”Cong说。在世界各地的实验室中，可以进行数百次后续实验。“该团队还搜索了结核分枝杆菌的基因组，这是一种与大肠杆菌有关的疾病细菌。他们高度自信地鉴定了911蛋白质 - 蛋白质相互作用。其中95%以前从未被描述过。研究人员报告说，70种蛋白质可能导致结核分枝杆菌的毒力。这些发现可能为开发针对致命病原体的药物开辟了新途径。“我们将把这个工具应用于更多的病原体和人类基因组，”丛说。“我们的成功将取决于其他科学家在注释基因组的哪些部分是基因以及哪些部分是其他部分时所做的工作。” 

根据卡迪夫大学与沃里克大学和利物浦大学以及威康信托桑格研究所合作的研究，重新利用一种有益菌可以为人造化学杀虫剂提供安全，可持续和天然的替代品。寻找维持农业和粮食生产的自然方法是一项重大的全球挑战。合成化学农药传统上一直用于保护作物，但人们越来越关注其毒性及其对生态系统构成的威胁。利用基因组技术，研究人员发现Burkholderia ambifaria细菌有可能被用作生物农药，既有效又安全。生物杀虫剂提供了一种天然的保护手段，一种叫做伯克霍尔德氏菌的细菌已成功用于保护作物免受疾病侵害。然而，在20世纪90年代，Burkholderia细菌与囊性纤维化(CF)患者的严重肺部感染有关，导致人们担心他们的安全性以及最终从市场上撤出这些生物杀虫剂。“我一直与Burkholderia合作多年，主要涉及CF肺部感染，这反过来导致了一系列新的抗生素发现研究，”卡迪夫大学生物科学学院项目首席研究员Eshwar Mahenthiralingam教授解释说。 。“与植物科学家Jim Murray教授，生物科学学院院长和博士培训合作伙伴学生Alex Mullins一起工作，我们决定将这项研究带入一个新的方向，研究伯克霍尔德氏菌与植物的相互作用以及它们如何保护植物免受疾病侵害。“通过测序细菌的基因组DNA，我们能够鉴定出伯克霍尔德氏菌的抗生素制造基因Cepacin。进一步的测试表明，Cepacin提供了非常有效的抗衰减保护 - 一种由真菌样生物引起的园艺疾病。“使用类似于用于生产活疫苗的基因工程技术，研究人员还在探索如何提高细菌的安全性。“Burkholderia将他们的基因组DNA分成3个片段，称为复制子，”Mahenthiralingam教授说。“我们删除了这3个复制子中最小的一个以产生突变的伯克霍尔德菌株，当在发芽豌豆上进行测试时，它仍然表现出优异的生物杀虫特性。”进一步的研究表明，这种伯克霍尔德氏菌突变体并不存在于小鼠肺部感染模型中，开辟了构建不能引起感染的生物杀虫菌株的可能性，但仍能提供有效的植物保护。该团队与化学家，华威大学的Greg Challis教授和Matthew Jenner博士合作，帮助发现了Cepacin，最近获得了BBSRC超过100万英镑的奖学金。这将有助于推进下一阶段的研究，以开发一种有效且安全的生物农药，该农药不会对环境中的有害水平产生影响。“与植物自然共生的伯克霍尔德氏菌等有益细菌在可持续发展的未来中发挥着关键作用。我们必须了解风险，减轻风险并寻求适合所有人的平衡，“Mahenthiralingam教授继续说道。“通过我们的工作，我们希望Burkholderia成为一种有效的生物农药，其最终目标是使农业和粮食生产更安全，更可持续。” 

    今天为止，本月已近乎中旬，回顾上个月，我公司主要推出的产品都是培养基和试剂盒，而本月我们的资讯内容会给大家介绍一些更多的新技术。血清是一种天然的培养基，今天我们一起来看看上海远慕生物的特别解析：实验室血清的质量，一半原因取决于你！      胎牛血清用于取材的胎牛应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。特别要求有： 1. 要通过滤膜过滤除菌，保证无菌； 2. 证明所用血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物； 3. 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染； 4. 对细胞有良好的支持繁殖作用； 5. 必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。?质量高低因素取决于这两个方面： 1. 取材对象。? 2. 取材过程。

      根据宾夕法尼亚州立大学医学院的一项新研究，防止蛋白质在其工作中起作用可能会使某种类型的卵巢癌细胞在实验室中不受控制地生长和分裂。      在一项细胞培养研究中，研究人员将该蛋白质鉴定为高级别浆液性卵巢癌细胞的潜在治疗靶点。大约70%患有此类卵巢癌的患者复发了化学抗性疾病，增加了对新治疗方法的需求。      细胞和分子生理学助理教授Katherine Aird和她实验室的其他研究人员已经确定了一种将高级别浆液性卵巢癌细胞置于“睡眠状态”的潜在方法，称为衰老。      “癌症细胞最大的问题之一就是它们可以在没有刺激的情况下永远成长，”艾尔德说。“通过诱导衰老，细胞不再分裂和生长。”       细胞分解并在称为代谢的过程中通过各种循环和途径积累所需的化学物质。      “癌症细胞的一个标志是它们的代谢过程通常不同于正常的健康细胞，”医学院的博士生，该论文的第1作者Erika Dahl说。在这项研究中，Dahl开始评估正常输卵管细胞和癌细胞之间的代谢差异。       使用光谱法对每行细胞中的代谢物进行定量。在比较其代谢过程的差异后，实验室发现癌细胞更喜欢在柠檬酸循环中使用糖，而不是制造乳酸，这是更常见的途径。       “许多疗法针对糖酵解，但这可能不是最hao的方法，”达尔说。她经常指出，当针对糖酵解时，可能会对正常的健康组织造成毒性损害。       进一步的研究表明，在柠檬酸循环中抑制或阻止特定蛋白质 - 异柠檬酸脱氢酶1 - 的活性导致细胞分裂停止。Aird说虽然这种蛋白质的突变形式在其他癌症中很常见，但她和她的团队发现野生型或正常形式存在于高级别浆液性癌细胞中。     “美国食品和药物管理局已经批准了一种针对蛋白质突变形式的药物，”艾尔德说。“针对突变体形式的药物之一也可以针对野生型。我们的长期目标之一是尝试重新利用这种已经批准的药物作为治疗这种形式的卵巢癌。”       研究小组发现，抑制野生型蛋白质可能是未来治疗高级别浆液性卵巢癌各阶段的有效策略。当这些细胞扩散到身体的其他部位时，它们采用与原始癌细胞不同的形式。证明该抑制剂在两种形式中都能有效地阻止细胞周期。      “重要的是，治疗在后期阶段是有效的，因为这是卵巢癌患者通常被诊断出来的时候，”Dahl说。现有数据显示，当蛋白质高表达时，无进展生存的机会减少。      在未来，该实验室将进一步研究正常和高级别浆液性卵巢癌细胞之间的代谢差异。研究人员还将研究将抑制剂与其他疗法相结合是否有效。 

不论对何种生物而言，DNA与蛋白质之间的相互作用（DPI）都是至关重要的。你想，基因的表达、复制、重组和修复，以及RNA转运和翻译，哪个离得开这种相互作用？早在十九世纪后期，科学家们就通过显微镜观察到了蛋白质与DNA之间的相互作用。自那以后，他们开始深入探索蛋白质结合并控制DNA和RNA的机制。总的来说，与DNA结合的蛋白是普遍存在的，大约占了高等动植物蛋白质组的10%，也就是说，各个物种平均而言约有2000个。相互作用可能是特异性的，由核酸序列所控制，并由氢键、离子相互作用和范德华力介导。转录的控制就是一个例子。不过，也可能是非特异性的，通过蛋白功能基团与DNA骨架之间的吸引而发生。分析方法对于大部分的相互作用，人们只是略知皮毛。研究通常从鉴定蛋白质组分开始。常用的分析方法包括显微镜和经典的生化分析，如染色质免疫沉淀（ChIP）、指数富集的配体系统进化（SELEX）、电泳迁移率分析（EMSA）、DNase足迹分析以及蛋白结合芯片。ChIP是让蛋白质与其DNA目标共价结合，之后将它们解交联，并分别鉴定。SELEX将目标蛋白暴露在寡核苷酸的随机文库中。之后分离出与之结合的基因并通过PCR扩增。DNase I 足迹分析定位蛋白质与DNA的结合位点，然后进行有限的DNA消化。芯片则鉴定与标记的蛋白质相关联的基因序列，随后进行荧光检测。研究人员也采用各种显微技术来探索DNA-蛋白互作，包括光学、荧光、电子和原子力显微镜，后两者提供了zui高的空间分辨率，不过，电镜仅限于静态观察，而不能分辨动态相互作用。原子力显微镜（AFM）可以说是多功能的显微方法。它利用微悬臂感受和放大悬臂上微小针尖与受测样品原子之间的作用力，从而达到检测目的，具有原子级的分辨率，可探测单分子的分子间作用力。瑞士洛桑联邦理工学院的科学家Sandor Kasas指出，高速AFM能够以极高的分辨率来探索蛋白质及相关基因的结构。“通过高速AFM，所有相互作用的动力学都可以被实时追踪，同时测定蛋白质与DNA之间的相互作用力。”原子力显微镜的zui新应用是将蛋白质附着在针尖，然后测定它与自由漂浮的DNA之间的互作。蛋白质样品可以是溶液形式，也可以不是，这具体取决于研究人员要寻找的目标。不过，它必须固定在底物上，才能通过显微镜观察。在快速实验中，样品可以在空气中成像。这种情况下的附着相对比较容易。不过，若要寻找互作动力学，成像必须在液体中进行，这时附着就比较复杂。“DNA必须牢固附着在表面，才能被显微镜所看见，但又不能太牢固，以便与蛋白质相互作用。有时这挺难实现的，”Kasas补充说。当然，原子力显微镜的价格不菲。一台低速显微镜的价格大约在10万-20万美元，这意味着许多部门需要合力才能购买一台。有些机构愿意与生物学家合作。高速显微镜则是另一码事。“它们目前还很稀少，只有几个研究组拥有，法国只有5台，而美国大概有十几台，”Kasas说。不过对于互作研究的前沿科学家而言，它们是至关重要的。 不断改进与任何新兴的研究领域一样，实验方法必须经过千锤百炼，才能不断改进。比如ChIP技术，目前已衍生出许多替代技术，Promega公司的HaloCHIP™系统就是其中的一种。HaloCHIP系统能共价捕获细胞内的DNA-蛋白复合物，而不使用抗体。感兴趣的蛋白与组氨酸标记的HaloTag融合表达。随后在甲醛的作用下与DNA交联，并用HaloLink树脂捕获。洗掉非特异的蛋白和DNA后，加热使得融合蛋白与DNA解离，之后进行纯化和分析。据介绍，HaloCHIP的整个过程不到48小时，步骤更少，但信噪比更高，同时最大限度减少了实验误差。HaloCHIP后DNA序列的测定可以通过几种方式实现，这取决于您对DNA结合位点的了解。PCR、qPCR、芯片和测序都是常用的方法。您还需要适当的对照，以便了解和定量富集过程。Promega的资深科学家Danette Daniels解释说：“人们对转录因子和表观遗传蛋白在全基因组内的结合表现出浓厚的兴趣，希望鉴定各种细胞类型和疾病状态下的结合。”此外，她指出，鉴定蛋白-RNA复合物，了解这些互作所需的RNA序列特异性，也是一个激动人心的新方向。物理鉴定生化分析只是DNA-蛋白质互作研究的一个方面。X射线晶体衍射等物理方法也提供了宝贵的见解。获得的晶体结构可揭示复合物所在的位置，鉴定复合物中的必需氨基酸残基。这将有助于下游的药物开发，特别是基于结构的药物设计。然而，常规的结晶技术似乎不适用于互作研究，所得的晶体往往由单独的蛋白或DNA组成，造成假阳性。于是，维克森林大学医学院的生化教授Thomas Hollis采用了一种新颖的方法。他将一种称为不完全因子设计的实验开发技术与已知的结晶条件相结合，带来蛋白质-核酸复合物晶体筛选。这个筛选系统包括48种筛查条件，每种条件使用不同的沉淀剂、缓冲液和盐组合，并提供1.5 mL的混合物。研究人员可将这些条件放在96孔板中进行结晶实验，以鉴定哪种条件有助于结晶的形成。不过，筛选只是这个过程中的第1步。在确定了晶体形成的条件之后，研究人员必须进一步优化，以便产生强烈衍射的晶体。这是所有晶体筛选的限制。 

疫苗和癌症免疫疗法基本上做同样的事情：它们可以增强一个人的免疫系统，更好地使它能够对抗一个罪犯，无论是微生物还是恶性肿瘤。这两种方法都集中在CD8 + T细胞上，CD8 + T细胞是一种免疫细胞，既可以立即杀死也可以让犯罪者“记忆”，提供长期保护。在小鼠实验中，加州大学圣地亚哥分校医学院的研究人员发现，激活细胞蛋白酶体或回收中心的药物可以促进记忆CD8 + T细胞的平衡。这种方法可用于改善疫苗和免疫疗法的效果以及持续时间。“我们已经知道激活的CD8 + T细胞不对称分裂，从而产生效应细胞和记忆细胞，”资shen作者，加州大学圣地亚哥分校医学院副教授John T. Chang博士说。“但我们并不知道CD8 + T细胞分裂过程中细胞成分的不均等分离是如何影响它们的命运的。”使用小鼠和细胞模型，Chang和团队确定两种不同类型的CD8 + T细胞，效应器和记忆不同在他们的蛋白酶体活动率。细胞的蛋白酶体是降解和再循环受损或不需要的蛋白质的细胞机器。它是所有细胞的重要组成部分，研究人员最近发现，操纵蛋白酶体活性可以改变细胞功能。蛋白酶体活化剂和抑制剂是可商购的。Bortezomib是一种用于治疗多发性骨髓瘤的抗癌药物，可抑制蛋白酶体活性。Chang和团队发现环孢菌素是一种用于器官移植受者的免疫抑制药物，可激活CD8 + T细胞中的蛋白酶体。更重要的是，他们发现在微生物感染后早期用环孢菌素治疗CD8 + T细胞产生了两倍于模拟处理对照的长寿记忆细胞。“虽然迄今为止这项工作仅在小鼠细胞和感染实验模型中完成，但我们预计这种方法有朝一日可用作辅助治疗 - 与疫苗或癌症免疫治疗同时使用一剂或两剂免疫增强剂帮助干预工作更好，持续时间更长，“张说。郑重声明：本文版权归原作者所有，转载文章仅为传播更多信息之目的，如作者信息标记有误，请第1时间联系我们修改或删除，多谢。 

根据巴塞罗那大学(UB)神经科学研究所和Bellvitge生物医学研究所(UB-IDIBELL)的认知和脑可塑性研究小组的研究，大脑中的白质结构反映了音乐的敏感性。该研究发表在Journal of Neuroscience上，研究表明白质连通性是中枢神经系统不同区域通过的组织，对于理解我们喜欢或不喜欢音乐的原因至关重要。此外，它表明大脑奖励结构必须与感知结构一起工作，以便人们享受音乐。UB研究员Josep Marco-Pallarés领导了一项研究，其中来自赫尔辛基大学(芬兰)的AntoniRodríguez-Fornells(UB-IDIBELL-ICREA)，NoeliaMartínez-Molina，以及来自麦吉尔大学的Ernest Mas-Herrero和Robert Zatorre (加拿大) - 已参加。对音乐不感兴趣的人听音乐被认为是一种令人满意的活动，但这一组的先前研究表明存在个体不平衡：有些人没有音乐就无法生活，有些人根本不喜欢音乐，这种情况被称为具体的音乐的快餐。根据Josep Marco-Pallarés的说法，“这种现象发生在健康人身上，没有任何病理。因此，患有特定音乐性快感缺乏症的人会享受其他刺激(例如食物或金钱奖励)，但他们对音乐奖励并不敏感”。对特定音乐性快感缺失的研究确定，音乐奖励的个体差异与听觉皮层(特别是颞上听觉皮层)的功能连接性(不同脑区神经元激活的不同模式)有关，并且是奖励过程中的关键领域。 ，腹侧纹状体。因此，音乐灵敏度取决于这两个领域的工作。?新研究的目的是找出音乐敏感度是否由感知过程区域和奖励系统区域的连接定义。该实验是利用成像功能磁共振对38名健康志愿者进行的，这使得能够重建脑白质结构，即连接不同脑区的白质束。实验结果表明，连接音乐皮层的白质结构与奖励系统中的活动之间存在关联。根据Josep Marc-Pallarés的说法，“这项研究表明，音乐敏感度与白质结构有关，一方面是颞上听觉皮层与眶额皮质，另一方面是眶额皮质与腹侧纹状体”。参与者的音乐敏感度是通过由同一研究小组巴塞罗那音乐奖励问卷(BMRQ)创建的问卷中获得的分数来确定的，该问卷定义了他们的音乐敏感度。之后，在磁共振会话期间，参与者必须聆听古典音乐歌曲的摘录，并实时提供1到4的乐趣值。为了控制他们在其他类型的奖励中的大脑反应，参与者必须参与金钱赌注活动，他们可以赢得或失去真正的金钱。没有一个参与者在一般奖励量表中显示低分，表明奖励过程中的个体差异仅xian于音乐而不是其他刺激。 

      研究人员现已开发出一种新型疫苗，一种天然外膜囊泡(NOMV)疫苗，用于治疗由“脑膜炎双球菌B族”细菌引起的脑膜炎和血流感染。这将允许年轻人接种疫苗，并将解决目前疫苗接种的一些局限性。该研究发表在本周的美国微生物学会期刊mBio上。    “我们通过对用于生产疫苗的细菌菌株进行若干遗传改变来开发改良版疫苗，从而产生广泛的保护性疫苗，而不是特定菌株的疫苗，”科学家博士Peter Beernink博士说。在奥克兰贝尼奥夫儿童医院的免疫生物学和疫苗开发中心。     目前只有两种获得许可的疫苗用于预防由“脑膜炎双球菌B族”细菌引起的脑膜炎和血流感染，这些细菌仅被许可用于10岁及以上的人群。两种疫苗都含有一种称为因子H结合蛋白(FHbp)的细菌蛋白，它可以与称为因子H(FH)的宿主蛋白结合。许可疫苗有几个局限性，包括缺乏对某些细菌菌株的有效性和婴儿人的低免疫反应。      研究人员用NOMV-FHbp疫苗对婴儿恒河猴进行了免疫接种，该疫苗诱导的保护性血清抗体水平高于针对测试的六种细菌菌株中的五种的许可疫苗。用许可疫苗免疫的两只猕猴，其含有结合猕猴FH的FHbp，产生针对宿主FH蛋白的抗体，而给予NOMV-FHbp疫苗或阴性对照疫苗的动物都没有开发出这样的抗体。?     基于血清抗体在广泛认为可预测人类保护的测试中杀死细菌的能力，在实验室中测量猴抗体对疫苗的反应。选择动物的样本大小，使得结果具有高度统计学意义。    Beernink说：“实验性NOMV疫苗扩展了使用外膜囊泡疫苗的方法，该疫苗之前已经在挪威，古巴和新西兰的脑膜炎B流行期间向数百万人提供。”     因此，在相关的婴儿非人灵长类动物模型中，NOMV-FHbp疫苗比较少的动物中的许可疫苗和抗FH抗体引发更高水平的保护性抗体。“这表明这种疫苗有可能被开发成一种更为广泛的人类保护性疫苗，将覆盖范围扩大到婴儿和学龄儿童，这是发生脑膜炎球菌病风险最gao的年龄组，并提高疫苗安全性，” Beernink说。 

细胞器是细胞的功能单元。与工厂生产线的不同部分一样，它们执行专门的功能，但依赖于彼此并相互作用。为了使其功能适应细胞需求，细胞器需要是动态的：它们必须移动才能与其他细胞器相互作用和配合，保持原位或通过增加大小然后分开来增加。这些动态过程如何在细胞中介导和调节是细胞生物学中一个重要且具有挑战性的问题。科学家现在已经发现了特定细胞器的运动和膜动力学 - 称为过氧化物酶体 - 是如何介导的。过氧化物酶体在细胞中发挥重要的保护作用，对健康至关重要;过氧化物酶体功能和动力学的丧失导致严重的发育和神经缺陷。关于过氧化物酶体的工作方式尚不得而知，但埃克塞特大学的研究人员已经发现了一种名为MIRO1的蛋白质，它在将过氧化物酶体与运动蛋白结合方面起着关键作用 - 使它们能够在细胞内移动。“在这项研究中，我们发现MIRO1是缺失的衔接蛋白，它将过氧化物酶体与分子马达联系起来，并揭示了MIRO1在哺乳动物细胞中过氧化物酶体运动中的新作用，”埃克塞特大学的Michael Schrader教授说。“此外，我们使用MIRO1作为工具在活细胞中的过氧化物酶体上产生拉力。“我们能够在细胞内重新分配过氧化物酶体，但有趣的是甚至可以将它们相乘(通过拉开它们)或者在患者细胞中拉出过多的过氧化物酶体突起。“这些实验为我们提供了在正常和疾病条件下确定细胞过氧化物酶体数量和形状的分子机制的新见解。“在过氧化物酶体疾病中，我们经常看到患者细胞中过氧化物酶体数量不同，形状不同甚至不同。“了解为什么会发生这种情况以及如何调节过氧化物酶体数量或分布可以为这些患者提供改善细胞表现的新方法。“这可能与年龄相关的疾病如痴呆，耳聋和失明有关，因为已知过氧化物酶体在感觉细胞内具有重要的保护功能。”该研究小组将分子细胞生物学，显微镜，活细胞成像分析结合起来 - 由博士来自生物医学信息中心的Jeremy Metz - 以及埃克塞特生物医学建模和分析中心的David Richards博士的数学建模 - 提出了第1个理解，解释和预测健康和疾病中过氧化物酶体膜动力学的数学模型。患有严重过氧化物酶体疾病的人，也称为Zellweger Spectrum Disorders，经常死于儿童或年轻人，并且一个名为Zellweger UK的慈善机构的存在是为了提高认识并支持家庭和患者。  

俄勒冈州立大学的研究人员迈出了重要的一步，朝着更方便，更便宜的方式保护哺乳动物细胞进行体外受精，物种保护，细胞治疗和其他目的。该方法是干燥 - 从细胞中除去水 - 并且显示出作为通过液氮冷冻保存的替代方案的希望。液氮的沸点为零下320华氏度，而干燥的细胞可能存储在传统的冰柜或冰箱中。“在液氮中储存成本相对较高，运输过程中对低温的要求也不方便，”俄勒冈州立大学生物工程学副教授Adam Higgins说。使细胞稳定以便以干燥状态储存需要除去足够的水，使剩余的基质形成非结晶的玻璃状固体。“干燥解决方案最重要的性能特征之一是它能够形成这种玻璃，”希金斯说。“这就是将分子结构锁定到位并防止降解化学反应的原因。因此，玻璃化转变温度 - 玻璃状固体形成的点 - 是设计细胞干燥程序的关键参数。这个温度最终决定了生物样本的适当储存温度。“希金斯与俄勒冈州立大学工程学院以及奥古斯塔大学和维拉诺瓦大学的合作者一起研究各种可能的干燥介质的玻璃化转变温度以及水分含量如何影响温度。“我们的目的是朝着了解这些混合物的玻璃化转变温度迈出一步，我们肯定会这样做，”他说。他们研究了糖和聚合物的水溶液，以及可以渗透细胞膜并用于冷冻保存的化合物：乙二醇，丙二醇和二甲基亚砜，或DMSO。研究人员将溶液干燥至不同的水分含量，然后使用差示扫描量热法测量玻璃化转变温度。“复杂的多组分解决方案的玻璃化转变数据相对稀缺，”希金斯说。“但正如我们所料，玻璃化转变温度随着含水量的降低而增加。”例如，在磷酸盐缓冲盐水中含有0.1摩尔浓度海藻糖的培养基中，温度范围从完全干燥样品的约360度开尔文到约220开尔文温度。水质量分数为0.4。零度开尔文是绝对零度，等于零下273.15摄氏度。“向溶液中加入聚合物可提高玻璃化转变温度，”他说。“添加渗透性冷冻保护剂会减少它。”一般来说，研究人员发现他们使用的聚合物 - 聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和Ficoll - 具有稳定作用;将它们加入含有海藻糖和磷酸盐缓冲盐水的干燥培养基中可在任何水分含量下显着提高玻璃化转变温度。向混合物中加入DMSO，乙二醇或丙二醇以依赖于浓度的方式降低玻璃化转变温度。“为了在干燥状态下稳定储存，人们认为玻璃化转变温度应该比储存温度高50度左右，”希金斯说。“因此，在磷酸盐缓冲盐水中含有0.1摩尔浓度的海藻糖和10%PVP的干燥溶液需要干燥至约5%的水质量分数，以便在室温下稳定储存。为了储存在冰箱中，干燥至约9%的水含量就足够了。添加膜透性冷冻保护剂可以保护细胞内细胞器，但增加必要的干燥程度。“结果表明，含有0.25摩尔浓度的冷冻保护剂的干燥溶液的室温储存是不可行的。但是，这种解决方案似乎有可能在干燥后分别在标准冰箱或冷冻机中达到约3%和6%的水质量分数。  

费城 - 过渡是生活的标志。当休眠的植物在春天开花或当一个年轻的成年人自己罢工时，控制权就会发生变化。类似地，在胚胎经历生化变化，从母体分子控制转变为由其自身基因组控制的早期发育过程中存在转变。宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的一个研究小组首次在胚胎中发现，其基因组的激活不会同时发生，而是遵循一种主要由其各种大小的细胞控制的特定模式。研究人员本周将他们的结果作为发展细胞的封面故事发表。在经历细胞分裂的早期胚胎中，母系负载的RNA和蛋白质调节细胞周期。受精卵的基因组 - 受精卵的一个术语 - 最初处于睡眠模式。然而，在胚胎早期的某个时刻，这些合子核“唤醒”并从其基因组中表达，对随后的胚胎发育进行生化控制。但胚胎如何“识别”何时进行这种转变仍然未知。“如何将胚胎'交由'控制从母体到受精卵的发育是发育生物学中的一个基本问题，”资shen作者Matthew C. Good博士说，他是细胞与发育生物学和生物工程学的助理教授。“以前没有人意识到脊椎动物胚胎的不同区域可以在不同时间进行基因组激活，或者直接细胞大小如何调节受精卵基因组的觉醒。”在过去的40年里，人们提出了不同的假设来解释胚胎如何识别何时开启受精卵中单个细胞的新基因组，但是Penn团队确定了该机制并回答了这个关键问题。利用来自非洲爪蛙(非洲爪蟾)的胚胎的单细胞成像，他们发现细胞大小是控制受精卵中基因组激活开始的关键参数。细胞必须达到阈值大小才能启动其自身蛋白质的大规模转录。通过生成微型胚胎，该团队证明细胞大小的变化控制着基因组激活的时间。这项研究的结果对于胚胎早期如何发育以及一般发育生物学领域的基本理解有许多重要意义。宾夕法尼亚大学的研究小组认为，这一发现可能会影响其他研究者如何接近自己的基因组激活研究和筛选控制早期胚胎发育保真度所必需的母体因子。“要获得新的见解，合子转录应该在单细胞水平上进行测量，”第1作者，陈氏博士说，他是Good实验室的博士后研究员。“这种方法帮助我们不要忽视胚胎细胞空间组织对母体 - 合子转变的影响。”启动受精卵基因组的“决定”是在个体细胞水平上进行的，而不是整个胚胎，这改变了宾大团队对发育过程的看法。“进化已经选择细胞大小作为控制胚胎发育关键转变的调节机制，这种范式可能扩展到细胞大小不同的其他生物学领域，”Good说。他和陈计划通过测量斑马鱼和老鼠的基因组激活来继续这项工作，看看这种新观点是否适用于其他物种。 

      Amanda Fentiman表示：“尽管很难获得足够的原代细胞进行分析，但除了使用更多的组织，似乎没有更好的方法。”不过她表示，新的成像系统和免疫荧光技术可以取代传统的分析方法，如western blot。“基于单细胞的western blot、单细胞测序以及微流体设备所需的样品比传统方法要少得多，”她解释说。      当然，有些时候仍然要使用老式的western blot。“对于很难获得的细胞类型，hPSC（人多能干细胞）来源的细胞和hTERT（人端粒酶逆转录酶蛋白）修饰的细胞就变得非常有意义，”STEMCELL的资shen科学家Erin Knock说道。      虽然hTERT、PSC和iPSC来源的细胞系并不是真正的原代细胞，但它们是十分重要的替代品，体现了原代细胞的一些最jia品质。例如，强制表达hTERT让原代细胞能维持足够的端粒长度，避免增殖性衰老。      “hTERT诱导的原代细胞具有连续传代的能力，没有染色体不稳定性，”Knock谈道。这种细胞可以扩增，也可以冷冻、保存和解冻，以适应实验的时间安排。同样地，她认为PSC的真正价值在于能够从一种细胞分化成多种细胞类型。iPSC让研究人员能够采集轻松获取的细胞，并将它们转变为不易获取的细胞。       目前iPSC和类器官领域的研究正在明显增加。“随着人们掌握了iPSC的技术，许多新型的‘原代’细胞系已经建立，让人们在鉴定与健康和疾病相关的细胞因子和通路方面取得了重要进展，”Damen谈道。 处理原代细胞的小秘诀1. 细胞系本身存在一些缺点，动物模型的难度大、成本高，而原代细胞就介乎两者之间。若使用得当，原代细胞既可以带来生物学相关的结果，又可以节约时间和经费。2. 目前，市场上多家供应商提供现成的原代细胞，并配备充分优化的培养基和实验方案。这使得原代细胞的操作比以往要轻松得多。在开展大规模研究之前，试着与供应商接触一下，看看能否对各个批号进行测试。3. 在自行制备原代细胞时一定要小心。分离技术不过关可能导致表型不一致，污染发生、细胞生长状况不佳或死亡。如果您选择自行分离原代细胞，专家仍建议您购买专门的培养基，并以商业化的细胞作为对照。4. 在分离过程中使用抗生素。抗生素溶液应当是新鲜配制的，或者使用新鲜解冻的溶液，使用一次后即丢弃。准备好支原体检测试剂盒，比如ATCC的PCR通用型支原体检测试剂盒（ATCC® 30-1012K™）。5. 永远不要低估看似简单的技术。原代细胞应保存在液氮中，直至解冻。解冻过程是很快的。在培养时请注意，原代细胞对温度敏感，因此应避免反复升温和冷却。同时请注意汇合度：百分百的汇合度会导致细胞衰老。6. 原代细胞的数量有限或无法增殖，这个缺点可以通过样品量需求较少的新型细胞成像和western blot技术来克服。不过，hTERT和PSC来源的“原代”细胞有望消除样品量的限制，成为新的替代方案。

维生素D和雌激素已经在改善女性骨骼健康方面取得了很好的成果。来自中国的一项新研究表明，这种相同的组合可以帮助预防代谢综合症，这是一种增加绝经后妇女患心脏病，中风和糖尿病风险的条件。结果今天在线发表在更年期，北美更年期协会(NAMS)期刊上。代谢综合征已成为一个主要的公共卫生问题，影响全世界30%至60%的绝经后妇女。导致代谢综合征的腹部肥胖和心脏病的进展随着女性年龄的增长而显着增加，并且似乎与绝经后妇女的雌激素损失直接相关。这导致一些研究人员建议对绝经后不到6年的女性推荐雌二醇治疗，以预防心脏病。类似地，维生素D与代谢综合征的几种标志物相关，包括肥胖症，高血糖症，胰岛素抵抗和2型糖尿病。在20年的随访中，补充维生素D已被证明可以降低代谢综合征的风险。由于维生素D和雌激素的协同作用已被证实可以改善女性的骨骼健康，因此中国最xin研究的研究人员假设相同的相互作用可能会影响代谢综合征。横断面研究包括616名年龄在49至86岁之间的绝经后妇女，她们在试验开始时未服用雌激素和维生素D /钙补充剂。结论是维生素D和雌二醇之间存在正相关关系。具体而言，较高的维生素D与有利的脂质特征，血压和葡萄糖水平相关。雌二醇与胆固醇，甘油三酯和血压呈负相关。这些结果表明维生素D和雌二醇缺乏在绝经后妇女的代谢综合征中发挥协同作用。调查结果发表在“中国绝经后妇女维生素D和雌二醇缺乏对代谢综合征的协同作用”一文中。“在这项横断面研究中，低雌二醇增加了维生素D缺乏的绝经后妇女代谢综合征的风险，”NAMS执行主任JoAnn Pinkerton博士说。“内分泌学会建议绝经后妇女维生素D水平为30 ng / mL。维生素D水平是否能提高非骨骼心血管或认知功能仍然是争论的焦点，而且答案等待随机临床试验数据。” 

血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。 基于多年的实验研究，用于细胞培养的胎牛血清以及其它血清中可能会存在以下种类的沉淀物有以下三种:1、纤维蛋白，它是经常出现的较大的沉淀物，可以达到1-2mm，可以用肉眼观察到。因为血清都是在低温下进行收集和快速处理的，一些纤维蛋白原（可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体）在处理过程中仍然处于溶解状态，当经过后的过滤分装后，就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。 2、磷酸钙，它也是常见的一种沉淀物，通常会使血清出现浑浊，并且在37°C培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。 3、胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们也是血清中出现沉淀物的常见原因。影响：1、细胞生长，我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养，我们的客户以及其它血清生产商也证明了这一点。 2、过滤，如果血清中出现大量的沉淀物，血清将很难过滤。一般说来，因为在血清生产时后已经经过100nm或者40nm的过滤处理，并且经过了严格的无菌检测，因此不推荐再过滤用于细胞培养的血清。在实验室中没有必要再过滤处理血清，在大规模的细胞培养中往往将血清直接加到培养基中一起过滤。 3、污染，磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争端。研究者可能会在血清中观察到一些絮状的沉淀，因此就会比较警觉的去做无菌试验，将血清放在培养箱中培养几天，结果可能会观察到更多的絮状沉淀，因此就断定血清被污染了。并且当研究者将血清样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可以运动的小黑点，因此就更加确认是血清被污染了。于是，研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商确认，但终确定血清没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生，我们建议不要直接将血清放在培养箱中培养观察是否有菌，而是将血清加到琼脂板上进行培养以观察是否有细菌生长。另外，也可以进行革兰氏染色，在油镜下观察，以确认是否有污染。