在离子交换过程中保持pH的恒定是十分重要的，正如前面讨论过的，pH的改变会造成蛋白质带电荷数量和分布状况发生变化，从而直接影响到蛋白质是否能结合在交换剂上以及结合力的强弱。因此，在离子交换色谱中流动相必须使用缓冲液。缓冲液的种类很多，能够起缓冲作用的物质可分为两类：第yi类是由弱酸（或弱碱）及相应的盐构成的系统；第二类是兼性离子化合物。对于第yi类缓冲物质，在进行离子交换时，如果缓冲离子所带的电荷与离子交换剂上的功能基团相反，将参与离子交换过程，并可能对局部pH产生影响，因此应尽可能采用与功能基团带同种电荷的缓冲离子，即：使用阴离子交换剂时选择带正电荷的缓冲离子；使用阳离子交换剂时选择带负电荷的缓冲离子。当然这也并不是jue对的，比如磷酸盐缓冲液也经常在阴离子交换过程中被采用，但在这种情况下应特别注意在上样前充分平衡，确保色谱系统的pH和离子强度与起始缓冲液一致。第二类缓冲物质在阴、阳离子交换中均能采用。表1和表2分别列出了阳离子交换色谱和阴离子交换色谱时常用的缓冲液。在离子交换过程中虽然可以除去很多杂蛋白，起到纯化效果，但目的蛋白的洗脱峰中必然含有大量缓冲物质和盐的成分，这些成分的引入对于目的蛋白来说本身也是一种杂质。特别在色谱后需对洗脱峰进行冷冻干燥，以得到纯蛋白样品时，在冻干后的粉末中往往绝大部分是缓冲物质和盐。如果在冻干前进行脱盐或透析操作，虽然可以基本除去这些杂质，但也有可能造成蛋白活性的回收率下降。此时应优先考虑采用挥发性的缓冲物质，这样在冻干阶段可以将这部分杂质除去，常见的挥发性缓冲物质列于表3。◌ Q /SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose HP 高分辨率琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose XL 高载量琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose BB 大颗粒琼脂糖基架离子交换介质◌ DEAE/CM Tandex 葡聚糖基架离子交换介质

春风渐暖春天已经来了今天是农历二月二龙抬头 我们开个好头“剪”去旧的毛细管柱换个新气相“初春新气相”毛细管柱买赠活动拂面而来买满即赠配适耗材快来看看吧~01活动时间即日起-2022年3月31日02活动对象全体终端用户03具体活动内容月旭科技品牌全线气相毛细管柱实际成交总金额达5000元即可获赠气相色谱配件：0.53mm或0.32mm石墨垫两者任意组合10个+气相进样隔垫任选1包（赠品规格请查看下文）实际成交总金额达8000元即可获赠气相色谱配件+实验室耗材：0.53mm或0.32mm石墨垫两者任意组合10个+气相进样隔垫任选1包+透明样品瓶套装100pk+棕色样品瓶套装100pk；（赠品规格请查看下文）实际成交总金额达10000元即可获赠气相色谱配件+实验室耗材+可选礼品：0.53mm或0.32mm石墨垫两者任意组合10个+气相进样隔垫任选1包+透明样品瓶套装100pk+棕色样品瓶套装100pk+博柏利香水/YSL小金条口红任选其一；

其他作用力：疏水相互作用和氢键虽然蛋白质与离子交换剂发生结合主要依靠相反电荷之间的离子键，但实际上此过程中还可能存在其他的作用力，常见的就是疏水相互作用和氢键。疏水相互作用主要出现在使用带非极性骨架的离子交换剂时，例如离子交换树脂，特别是聚苯乙烯树脂，骨架带有较强的疏水性，能与蛋白质分子中的一些疏水性氨基酸残基通过疏水相互作用结合。虽然前面提到常规的离子交换树脂因其性质上的缺点在蛋白质分离中并不常用，但在现代HPLC中还是有部分介质是以树脂作为骨架的。氢键则主要出现在使用以亲水性高分子为骨架的离子交换剂时，例如使用较为广泛的以Tandex（月旭葡聚糖）或Tanrose（月旭琼脂糖）为基质的离子交换剂，骨架糖链中的羟基、羧基等基团能够与蛋白质分子中带亲水侧链的氨基酸残基之间形成氢键。当两种蛋白质在电性质方面很接近时，这些额外的作用力在分离时起着决定性的作用，据此往往可以实现分离。不过这些作用力对色谱行为产生的影响通常很难预测，不同的蛋白质往往相差很大，因此不具有通用性。离子交换动力学离子交换的发生及进行的程度即离子交换平衡取决于离子作用，而离子交换动力学则取决于离子交换剂的颗粒结构。离子交换剂的骨架是具有网孔状结构的颗粒状凝胶，而荷电功能基团均匀分布在凝胶颗粒的表面及网孔内部，蛋白质分子依据分子量的不同，不同程度地进入凝胶颗粒内部，将荷电功能基团上的反离子置换下来而自身结合到离子交换剂上。从动力学角度分析，整个过程可分为五个步骤：①蛋白质在溶液中经扩散作用到达凝胶颗粒表面，亲水性的凝胶和水分子发生氢键作用，从而在凝胶表面束缚了一层结合水构成水膜，水膜的厚度取决于凝胶的亲水性强弱、色谱时流速的快慢，亲水性越强，流速越慢，水膜越厚，反之水膜则越薄，蛋白质通过扩散穿过水膜到达凝胶表面的过程称为膜扩散，速度取决于水膜两侧蛋白质的浓度差； ②蛋白质分子进入凝胶颗粒网孔，并到达发生交换的位置，此过程称为粒子扩散，其速度取决于凝胶颗粒网孔大小 （交联度）、交换剂功能基团种类、蛋白质分子大小和带电荷数等多种因素；③蛋白质取代交换剂上的反离子而发生离子交换；④被置换下来的反离子扩散到达凝胶颗粒表面，也即粒子扩散，方向与步骤②相反；⑤反离子通过扩散穿过水膜到达溶液中，即膜扩散，方向与步骤①相反。根据电荷平衡的原则，一定时间内，一个带电蛋白质分子进入凝胶颗粒，就有与该蛋白质所带净电荷数相当数量的反离子扩散出凝胶颗粒。也就是说，蛋白质与反离子从电荷数量上看，膜扩散和粒子扩散的速率相同而方向相反。由此，上述五个步骤实际上就是膜扩散、粒子扩散和交换反应三个过程。其中交换反应通常速度比较快，而膜扩散和粒子扩散速度较慢，当溶液中蛋白质浓度较低时，膜扩散过程往往最慢，成为整个过程的限制性步骤；当溶液中蛋白质浓度较高时，粒子扩散过程往往最慢而成为整个过程的限制性步骤。月旭科技离子交换层析填料◌ Q /SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose HP 高分辨率琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose XL 高载量琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose BB 大颗粒琼脂糖基架离子交换介质◌ DEAE/CM Tandex 葡聚糖基架离子交换介质

离子交换作用离子交换剂由不溶性高分子基质、荷电功能基团和与功能基团电性相反的反离子组成，在水溶液中，与功能基团带相反电荷的离子 （包括缓冲液中的离子、蛋白质形成的离子）依靠静电引力能够吸附在其表面。这样，各种离子与离子交换剂结合时存在竞争关系。无机离子与交换剂的结合能力与离子所带电荷成正比，与该离子形成的水合离子半径成反比。也就是说，离子的价态越高，结合力越强，价态相同时，原子序数越高，结合力越强。在阳离子交换剂上，常见离子结合力强弱顺序为：Li+＜Na+＜K+ ＜Rb+ ＜Cs+Mg2+ ＜Ca2+ ＜Sr2+ ＜ Ba2+Na＋ ＜Ca2+ ＜Al3+ ＜Ti4+在阴离子交换剂上，结合力强弱顺序为：F- ＜ Cl- ＜Br- ＜I-对于蛋白质这样带电荷的生物大分子，与离子交换剂的结合能力首先取决于溶液pH，它决定了蛋白质的带电状态，然后是蛋白质的色谱相关区域，也就是电荷在蛋白质表面的分布情况，这些在前面都已经提到。此外，还取决于溶液中离子的种类和离子强度。溶液中的无机离子和蛋白质竞争性的与交换剂结合，在起始条件下，溶液中离子强度较低，上样后由于蛋白质带电荷数较多，与交换剂之间结合能力更强，因此能取代离子而吸附到交换剂上；在进行洗脱时，往往通过提高溶液的离子强度，增加了离子的竞争性结合能力，使得蛋白质样品从交换剂上解吸，这就是离子交换色谱的本质。pH和离子强度I的影响pH和离子强度I是控制蛋白质离子交换行为、分辨率、回收率等的重要因素。pH决定了蛋白质以及离子交换剂的带电荷情况，因而是决定蛋白质是否发生吸附的最重要参数。在进行分离时，应当控制pH使得蛋白质和离子交换剂带相反的电荷，这里涉及两个方面。一方面，离子交换剂有一个工作pH范围，在此范围内能够确保离子交换剂带充足的电荷。通常，阳离子交换剂应用时有一个pH下限，低于此pH会有很大一部分离子交换基团失去负电荷而不再能结合阳离子；而阴离子交换剂应用时有一个pH上限，高于此pH会有很大一部分离子交换基团失去正电荷而不能再结合阴离子。另一方面，溶液的pH直接决定了蛋白质带电荷的种类和数量，选择适当的pH，能够保证目的蛋白分子与离子交换剂带相反电荷而被吸附，同时如果pH距离蛋白质的等电点过远，则造成蛋白质与离子交换剂结合过于牢固而不易洗脱。在选择操作pH时还需特别注意目的蛋白的pH稳定范围，若超出此范围会造成蛋白质活性丧失，导致回收率下降。特别是由于陶南效应，离子交换剂表面pH与溶液pH是不一致的。在阳离子交换剂表面的微环境中，H+被阳离子交换基团吸引而OH-离子被排斥，造成交换剂表面pH比周围缓冲液中低1个pH单位；而阴离子交换剂表面的微环境中，OH-被阴离子交换基团吸引而H+离子被排斥，造成交换剂表面pH比周围缓冲液中高1个pH单位。例如：某种蛋白质在pH=5时被阳离子交换剂吸附，实际上该蛋白质在交换剂表面是处在pH=4的环境中，若此蛋白质在此pH条件下不稳定就会失活。大多数蛋白质在pH=4以下稳定性都会下降而使回收率降低。由于溶液中的其他离子与蛋白质竞争结合到离子交换剂上，因此离子种类和离子强度I是影响蛋白质结合和洗脱的另一重要因素。在低的离子强度I条件下，蛋白质通过荷电基团结合至离子交换剂上带相反电荷的功能基团上；当竞争离子浓度即离子强度I逐渐升高时，蛋白质逐渐被置换下来。对于带有特定电荷数的蛋白质，需要多高的盐浓度才能将其从离子交换剂上洗脱下来，并没有一个固定的规律，需要从实验中摸索。绝大多数蛋白质在1mol/L的盐浓度下能够被洗脱，因此在探索条件阶段，人们常把洗脱盐的终浓度定为1mol/L。事实上在溶液中盐类还常扮演稳定蛋白质结构的角色，为防止蛋白质发生变性或沉淀，离子强度不宜太低。另外，离子的类型也是一个重要因素，不同离子从交换剂上将蛋白质置换下来的能力是不同的，并且离子类型还对分辨率和不同蛋白质的洗脱顺序会产生影响。月旭科技离子交换层析填料◌ Q /SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose HP 高分辨率琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose XL 高载量琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose BB 大颗粒琼脂糖基架离子交换介质◌ DEAE/CM Tandex 葡聚糖基架离子交换介质

对羟基苯甲酸酯类作为食品防腐剂被广泛应用在各类食品中，其中对羟基苯甲酸甲酯（MP）、对羟基苯甲酸乙酯（EP）、对羟基苯甲酸丙酯（PP）和对羟基苯甲酸丁酯（BP）一直是国家食品安全检测抽查的重点项目，并且MP和EP在酱油和醋中的zui大添加限量（以对羟基苯甲酸计）均为250mg/kg。月旭科技之前已推出了酿造酱油和固态发酵食醋中对羟基苯甲酸酯色谱检测预处理方法包，此次针对液态发酵食醋，新研发推出了液态发酵食醋（如白醋、米醋等液态发酵工艺的食醋）中对羟基苯甲酸酯类色谱检测样品预处理方法包，其操作步骤相较前两种食品的方法包更为简单，但净化效果依旧很好，可实现从食醋样品中同时提取、分离、净化这4种对羟基苯甲酸酯类（对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯），以用于气相色谱和液相色谱技术对这些防腐剂的检测。样品稀释液：将食醋样品溶解稀释以备上样；净化专用SPE柱：吸附食醋中的杂质；SPE淋洗液：将被SPE柱吸附的杂质淋洗出来；SPE洗脱液：将被SPE柱吸附的目标物洗脱下来；洗脱净化管：进一步吸附残留杂质并除水；萃取液：将洗脱收集液中的目标物萃取出来。1）食醋样品称量：准确称取5g食醋样品；2）稀释溶解：使用“样品稀释液”，稀释溶解食醋样品；3）净化：使用“净化专用SPE柱”，用“SPE淋洗液”和“SPE洗脱液”进行SPE操作，洗脱液收集在“洗脱净化管”内，然后氮吹浓缩；4）萃取：使用“萃取液”，类似于QuEChERS的操作，上清液收集后旋蒸蒸干；5）残留样品用溶剂复溶，过滤后上色谱检测。1） 气相色谱柱分析柱：WM-5色谱柱，柱长30m，内径0.32mm，膜厚0.25μm，月旭科技（货号：03902-32001）；2）进样口：温度260℃，分流比1:10，进样量1μL；3）升温程序：4）检测器：氢火焰离子化检测器（FID），温度：280℃；5）载气：氮气，纯度≥99.999%，流速2.0mL/min；6）检测色谱图：1） 液相色谱柱分析柱：Ultimate® XB-C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm，月旭科技（货号：00201-31043）；保护柱：Ultimate® XB-C18，4.6mm×10mm，5μm，月旭科技（货号：00808-04001）（配不锈钢保护柱柱套，月旭科技，货号：00808-01101）；2）流动相：A相：含1%乙酸的40%乙腈水溶液；B相：含1%乙酸的乙腈；3）梯度洗脱程序：4） 流速：1.0mL/min；5） 检测波长：260nm；6） 柱温：35℃；7） 进样体积：1~20μL（视目标物浓度而定）。8） 检测色谱图：

对羟基苯甲酸酯类作为食品防腐剂被广泛应用在各类食品中，其中对羟基苯甲酸甲酯（MP）、对羟基苯甲酸乙酯（EP）、对羟基苯甲酸丙酯（PP）和对羟基苯甲酸丁酯（BP）一直是国家食品安全检测抽查的重点项目，并且MP和EP在酱油和醋中的zui大添加限量（以对羟基苯甲酸计）均为250mg/kg。国标中预处理技术存在的问题现行的《食品安全国家标准 食品中对羟基苯甲酸酯类的测定》（GB 5009.31-2016）中，针对气相色谱法检测的样品预处理技术主要是多次液液萃取+液液洗涤的技术，该方法操作繁琐、检测耗时长、有机溶剂消耗量大（其中包括消耗大量的易制毒化学试剂），且回收率较低、稳定性差，另外净化效果也不佳，往往存在着干扰检测的杂质成分。月旭科技针对固态发酵食醋这种复杂基质食品，开发出了固态发酵食醋中对羟基苯甲酸酯类色谱检测预处理专用方法包，这个方法包所采用的双柱SPE法可实现高效、稳定可靠地从各种复杂基质的固态发酵食醋中提取、分离和净化4种对羟基苯甲酸酯类（对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯和丁酯），大幅度减少对色谱柱及色谱管路污染、甚至堵塞情况，可以很好地保护色谱系统。提取液：从食醋样品中提取对羟基苯甲酸酯类；提取吸附剂：吸附食醋样品中的大颗粒杂质；萃取液：使对羟基苯甲酸酯类提取液中的杂质沉淀分离；萃取管：管中的吸附剂可吸附萃取时沉淀的杂质；净化专用SPE柱（双柱）：吸附食醋中不同种类的色素；SPE淋洗液：将被SPE柱吸附的杂质淋洗出来；SPE洗脱液：将被SPE柱吸附的目标物洗脱下来。主要操作流程1）食醋样品称量：准确称取5g食醋样品；2）分离提取：使用“提取液”和“提取吸附剂”，振荡分离提取；3）萃取：取试样提取上清液进行萃取，使用“萃取管”和“萃取液”，类似于QuEChERS的操作；4）净化：使用双柱串联的“净化专用SPE柱”，上样用“SPE淋洗液”和“SPE洗脱液”进行SPE操作，洗脱液收集后旋蒸蒸干；5）残留样品用溶剂复溶，过滤后上色谱检测。1） 气相色谱柱分析柱：WM-5色谱柱，柱长30m，内径0.32mm，膜厚0.25μm，月旭科技（货号：03902-32001）；2）进样口：温度260℃，分流比1:10，进样量1μL；3）升温程序：4）检测器：氢火焰离子化检测器（FID），温度：280 ℃；5）载气：氮气，纯度≥99.999 %，流速2.0mL/min；6）检测色谱图：1） 液相色谱柱分析柱：Ultimate® XB-C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm，月旭科技（货号：00201-31043）；保护柱：Ultimate® XB-C18，4.6mm×10mm，5μm，月旭科技（货号：00808-04001）（配不锈钢保护柱柱套，月旭科技，货号：00808-01101）；2）流动相：A相：含1%乙酸的40%乙腈水溶液；B相：含1%乙酸的乙腈；3）梯度洗脱程序：4） 流速：1.0mL/min；5） 检测波长：260nm；6） 柱温：35℃；7） 进样体积：1~20μL（视目标物浓度而定）。8） 检测色谱图：

什么是磁珠?磁珠是利用一定的组织包裹四氧化三铁核而形成的可以被磁铁吸附的同时有通过表面被包物吸附（结合）目标物质的小珠子。之所以它神奇，是因为它的用途很多！具体有哪些呢？01 细胞分离在磁性纳米颗粒表面接上具有生物活性的吸附剂或其它配基如抗体、外源凝结素等，利用它们与目标细胞的特异性结合，借助外磁场的作用，可以很方便、快速的对细胞进行分离分类。与常用的细胞分离方法相比，具有简单、快捷、高效和安全等特点。下图是磁性纳米颗粒分离细胞原理的示意图。02 免疫分析免疫分析在现代生物分析技术中是一种重要的方法，它对蛋白质、抗原、抗体及细胞的定量分析发挥着巨大作用。高分子磁性纳米颗粒用于免疫分析，其原理是在高分子磁性纳米颗粒表面接枝定向吸附于细菌的抗体，并利用它与原液混合、沉降，在磁场作用下分离、提纯，得到吸附于高分子磁性纳米颗粒上的活细菌。高分子磁性纳米颗粒可偶联抗体分离带特定抗原的免疫细胞，利用高分子磁性纳米颗粒结合的抗原或抗体进行免疫分析，具有特异性高、分离快、重现性好等特点。这一方法已应用于一些免疫学功能检测中，例如人体器官移植前的人的主要组织相容性复合物分型，可将与不同抗原对应的抗体偶联于高分子磁性纳米颗粒上，分离相应的细胞，然后作微量细胞毒试验，以进行分型及交叉配型。此外，将高分子磁性纳米颗粒与针对不同细胞亚型标志抗原的抗体偶联，富集细胞后观察计数，即可得知外周血中各型细胞的比例。03 酶的固定化酶具有-COOH、-OH、-NH2等活性官能团，可通过物理吸附、交联、共价偶合、包埋等方式和磁性纳米颗粒结合，具体实施法有吸附交联法、共价结合、共价键偶合法等。磁性生物高分子微球固定化酶能提高酶的生物兼容性和免疫活性、亲疏水性和稳定性易于将酶与底物或产物分离、操作简单易行可利用外部磁场控制磁性材料固定化酶的运动方式和方向，提高固定化酶的催化效率。04 磁控检测在通常的介入治疗过程中，会发生异位栓塞及梗死等现象，并引起严重的并发症，这是临床上急需解决的棘手问题，而使用磁性纳米颗粒载体的介入治疗，在磁控血管内进行栓塞则具有磁控导向、靶位栓塞等优点，为解决以上难题提供了途径。05 靶向药物纳米颗粒的粒径比较小可以通过毛细血管，因而可用磁性纳米材料作为定向载体，在外加的磁性导向系统下，将药物输送到特定的病变部位释放，增强疗效、减少药物对人体正常组织的副作用、具有良好的生物兼容性，即磁靶向给药系统技术。06 基因治疗目前常用病毒载体和脂质体载体，病毒载体存在制备困难，装载外源大小有限制，能诱导宿主免疫反应及潜在的致瘤性等缺点。目前广泛应用的脂质体，具有病毒载体的优点，而没有病毒载体的缺点。但是脂质体的颗粒过大影响了转染效率磁性纳米粒子的出现克服了它们的缺点。磁性四氧化三铁生物纳米颗粒的制作简单直径可达10nm以下，具有非常大的表面能，且具有多个结合位点，因而携带能力优于其他载体，且转染效率也高于目前使用的载体。因此磁性生物纳米颗粒可成为较好的基因载体而应用于基因治疗。本文参考文章名称：功能化高分子磁性纳米颗粒的制备与表征 作者：毕如意

色谱条件色谱柱：Ultimate® AQ-C18（4.6×250mm，5μm)。流动相：乙腈/0.1%磷酸=3/97； 检测波长：220nm；  柱温：30℃；  流速：1.0mL/min；  进样量：20μL。谱图和数据结论用月旭Ultimate® AQ-C18（4.6×250mm，5μm)色谱柱，在该色谱条件下测定，能满足实验需求。

本期“月旭科技-专家讲座”的嘉宾是曹文明博士，主要研究领域：油脂化学、食品质量与安全领域。本周六上午，曹文明博士将与大家分享讨论“食品酸价的特异性检测方法—铜皂络合比色技术”的相关内容。我们的讲座分为两大部分，zui后有互动答疑环节，来跟大家交流相关主题的内容，解决大家的实际问题，敬请关注！主讲人简介讲座主题《食品酸价的铜皂络合比色技术的概述》主讲人：曹文明内容摘要一） 酸价的释义与现行的检测技术标准二） 现行酸价检测国家标准主要存在的问题三） 酸价的特异性检测方法——铜皂络合比色技术及其zui新研究进展四） 铜皂络合比色技术70年的发展历史《铜皂络合比色法测定食品酸价专用检测试剂盒简介》主讲人：薛斌内容摘要一）试剂盒的组成和分类二）试剂盒的主要特点三）试剂盒的使用方法四）试剂盒使用时的注意事项本次网络报告的简介酸价是食用动植物油脂、油脂制品和含油食品重要的食品安全指标。长期以来，由于对酸价定义及作用的理解偏差，以及传统的酸碱中和滴定的酸价检测技术存在的油脂样品称样量过大和非特异性导致的复杂基质食品酸价测定值偏高问题，人们在酸价的检测与应用中，产生一些疑惑。本次报告旨在系统解读酸价的定义、意义、检测方法，以及若干主要问题，并提供了解决方案：一种酸价的特异性检测方法——铜皂络合比色技术。阐述了铜皂络合比色技术在大幅度减少酸价检测的油脂称样量、酸价的特异性测定等方面的理论、技术方案和适用范围，同时综述了铜皂络合比色法70年的发展历程中，对FFA含量检测、脂肪酶活性评价、食品品质评价等方面的应用。

色谱条件色谱柱：月旭Ultimate® XB-Phenyl（4.6×250mm，5μm)。流动相：取4.4g磷酸氢二钾，加入1000mL娃哈哈水中，再用磷酸调节pH至6.5，抽滤，取630mL磷酸氢二钾溶液和350mL甲醇、20mL乙腈混合，超声脱气，即得。乙腈/甲醇/磷酸盐=2/35/63； 检测波长：215nm；  柱温：35℃；  流速：1.0mL/min；  进样量：10μL。谱图和数据空白溶剂图系统适应性图结论用月旭Ultimate® XB-Phenyl（4.6×250mm，5μm)，在此色谱条件下测定，能满足检测的要求。

实验室的液相，总是出现各种问题。今儿漏液了，明儿压力高了，耽误实验进度……是不是很无奈？是不是很惆怅？是不是很焦虑？小伙伴们有没有想过是什么导致这些问题的呢？漏和堵是液相zui常见的故障，一般导致这些问题的原因是过滤没做好。颗粒物导致密封组件磨损严重直至漏液或堵塞系统造成压力高。在我们使用液相系统时会涉及到哪些过滤组件呢？跟小编一起来看看吧。1溶剂过滤（1）滤膜我们使用的流动相都需要是新鲜配制并且过滤脱气后才可以上机的，那么过滤用的滤膜需要注意哪些问题呢？总听到有些客户说：“咦？买的滤膜怎么过滤流动相的时候溶了？”那小编问你，你的材质选对了吗？滤膜材质多种多样，跟不同的溶剂的兼容性也是各有不同，所以在选择、购买和使用滤膜时要特别注意，我们使用的流动相和滤膜材质兼容不？（2）溶剂过滤头我们把流动相过滤超声脱气之后开始上机了，这时我们会把吸滤头放到溶剂瓶中。流动相溶剂吸滤头材质和形状有多重多样的，如玻璃砂芯、滤片、滤头等等。他们又各有优缺点，玻璃砂芯的不能超声，还容易在更换流动相瓶时磕碰碎掉，而另外的滤片和滤头相对而言就耐用一些，脏了可以用酸泡还可以超声处理。使用时不必战战兢兢了。（3）流路过滤器有些品牌的液相会在泵上配备有流路过滤器，可以对流动相进行再次过滤，有效去除系统由于磨损掉落的机械杂质。2样品过滤（1）针头过滤器在样品分析之前，通过过滤去除样品中的不容颗粒，将显著延长色谱柱的使用寿命。在柱色谱法之前，针头滤器过滤是zui简单快速的小体积溶液过滤方法。（2）保护柱、在线过滤器、杂质捕集小柱样品经过针头过滤器过滤一次之后，通过进样器进入到液相系统中，有的样品比较脏比较费柱子，为了延长色谱柱的使用寿命可以在色谱柱之前加装保护柱或者在线过滤器，以达到保护分析柱的目的。在液相色谱分离过程中，特别在梯度洗脱过程中容易产生莫名其妙的色谱峰，鬼峰来源很多，其中主要来源于流动相和管路，如：有机相中污染物，水相中污染物，缓冲盐，流动相瓶和混合过程产生等等。加装捕集小柱解决鬼峰问题，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质，杂质捕集小柱的安装位置与保护柱和在线过滤器有所差异，是安装在混合器之后，进样口之前。流动相和样品经过层层过滤之后顺利到达检测器，出个漂亮的图，心情美美哒，可以处理数据了。要想实验做得好，仪器维护少不了，在使用了缓冲盐后要及时的冲洗系统，对柱塞杆和密封圈及时的清洗维护，定期更换易损耗材。定期做期间核查和性能验证确保仪器性能良好。俗话说工欲善其事必先利其器，良好的实验结果是优良的仪器做出来的，所以一定要好好维护仪器哦。

关于梯度方法转移的Q&A01问：我开发的一个方法在我的系统上重复性非常好，但是在其他系统上就不一样了，怎么回事？答：有时候换色谱系统时梯度方法会出现一些问题。除非系统完全一样，否则保留时间总有些变化。通常这个时间的变化都在分离度的范围之内，忽略它，方法还是可以用的。另外，如果适当了解潜在的原因，可以调节梯度在不同的色谱系统中得到相同的效果。另一个涉及到这个问题的是梯度滞后体积。它是从梯度混合处到柱头的体积。当你进样开始分析后，梯度并没有到达柱头，还要等滞后体积排空后才到。这就是说样品在开始一段时间是等度迁移的。由于不同系统的滞后体积是不同的，所以保留时间就不一样了，有时候还是影响到分离度。另一个原因是梯度本身，由系统与系统之间的组分差异导致。对于现在大部分的色谱厂家来说这个问题都不是很严重。但通常，在输送等比例的流动相时（50%A和50%B）精确度zui高，比例相差大时（5%A或95%A）精确度就会受损。02问：怎么才能知道我是哪种情况呢？答：zui简单的做法是比较一下两个系统的梯度。卸掉柱子，接双通。（在梯度的B溶液后接紫外检测器）如果用的是反相色谱，可以在B溶液中加10mg/L的对羟基苯甲酸丙酯。两个系统都开始运行梯度，记录基线。然后比较一下两张图谱。要找到梯度开始的位置，测量梯度图谱。如果梯度是线性的，只要测量梯度的斜率就可以了。很可能你会发现两台仪器的梯度开始时间不一样，图谱非常类似，梯度结束时间有一定的改变。这种情况就是说两台仪器的梯度滞后体积不一样。03问：如果是这种情况，有没有简单的方法抵消滞后体积的差异呢？答：有一个办法大部分时候可以采用。如果新系统的梯度滞后体积小于转移前系统的体积，可以在梯度开始加一段等度。如果新系统滞后体积大，这种情况就比较困难。原则上你可以先开梯度，延后一段时间进样，这段时间要与两台仪器的滞后时间差一致。但在自动系统中就不能这么做，自动系统中是进样触发梯度开始的，这时候可能需要手动基线归零或重新开发方法。04问：在我花费时间开发方法后碰到这种情况可真不乐见啊，我以后该怎么做才能避免呢？答：你可以在zui终使用的仪器上开发方法。这可能需要一些预见与计划，但通常还是可行的。你需要做的是了解新系统的性能，要知道系统的两个基本情况：梯度滞后体积和比例精确性。你可以在同一个实验里得到这两个数据：如前所述，在B溶液后加紫外检测器，设置一个多阶层的梯度，B溶液以5%的幅度从0%变到1oo%，流速与平常一样，应该是1mL/min吧。每段梯度大概保持5min。然后接双通运行梯度，记录图谱。每段梯度设置的时间与实际发生的梯度时间之差就是梯度延迟时间。阶层的高度可以用来测量流动相比例。这些阶层可能有点模糊，那是由系统中混合体积造成的。 检测完系统，就可以按照它的性能来设计方法了。正如我前面提到的，zui大的问题是梯度滞后体积。如果你知道新仪器的滞后体积比开发方法的仪器大，就要自觉的在方法前加一段等度来抵消这一差别。如果目标系统滞后体积小，你就要在转移方法的时候在方法开始加一段梯度延迟时间。如果比例差别是在梯度运行中间出现的，相信你也可以通过调节梯度图谱来抵消这种差别。这个讨论是假设柱子已经用初始流动相充分平衡了。有时我会遇到这样一些情况，在日常分析中，梯度变化很快，而柱子没有用初始流动相平衡好。这样di一针时总是与后面的不一样。这可能是加快方法的缺点，但是如果转移到有不一样滞后体积的系统时，可能就会产生一些问题。

2022年新年伊始，月旭科技发布全新品牌：WelPacker®，冠之于全新DAC产品线，将分离纯化业务从分析、小制备级拓展到工业制备级。经过近20年的发展和积淀，月旭科技不仅在分析色谱领域为用户认可和熟悉，也在填料键合和小制备领域积累了丰富的经验。DAC色谱分离技术作为目前大规模高效分离和纯化领域常用、易实现和效果较为理想的一种技术正在获得更多制备纯化用户的青睐。WelPacker®系列DAC产品线的推出，填补了月旭科技在工业制备级分离纯化领域的空白，提高了客户服务的能力。DAC是动态轴向压缩柱（Dynamic Axial Compression column）的英文简称，是一种采用动态轴向压缩技术，能进行装柱、卸柱和维持柱压的制备柱设备，兼有装柱机和色谱柱的功能。✓ 规格多样，7种标准内径规格（25，50，80，100，150，200，300mm等），标准650mm柱管长度，并可进行定制，更加贴合用户需求；✓ 优化设计的分配器结构可以使液体更好地分配到整个柱床面上，小至3μm的筛板孔径可以装填5μm的填料，可实现更高效的分离；✓ 一站式服务，月旭科技产品线齐全，可提供从分析到制备放大的仪器、耗材和相关服务，尽可能地给用户提供方便；✓ 月旭科技可提供种类丰富的色谱填料，如球形硅胶基质色谱填料和无定形硅胶基质色谱填料，具有良好的机械性能、粒径分布、孔径分布和比表面积，在WelPacker® DAC系统中表现出较好的可装填性能和分离能力。除内径300mm以下的标准DAC外，WelPacker®还有400，450，500，600和800mm内径的DAC供用户选择，并可提供相应的色谱系统、匀浆系统和装柱设备。

色谱条件色谱柱：月旭Ultimate® HILIC Amide（4.6×250mm，5μm)流动相：0.1%三乙胺：取1mL三乙胺，加入1000mL娃哈哈水中，摇匀，用磷酸调节pH至7.0，超声脱气，即得。0.1%三乙胺/乙腈=20/80；检测波长：196nm；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；进样量：20μL。谱图和数据结论用月旭Ultimate® HILIC Amide（4.6×250mm，5μm)，在此色谱条件下测定，能满足检测需求。

为更好地贯彻实施国家新发布的《化妆品监督管理条例》，推动化妆品行业高质量发展，促进化妆品法规与技术的国际国内交流，提升中国化妆品的国际地位，由上海市分析测试协会主办，国家药监局化妆品监测评价重点实验室、上海市食品药品检验研究院、上海国觉科技有限公司承办，上海市疾病预防控制中心、上海市皮肤病医院、上海白玉兰谈家桢生命科学发展基金会协办的“科技之光，照靓你美时美刻”化妆品国际技术交流峰会将采用线上方式于2022年2月22日-23日举行，诚挚期待您的参与！一、会议背景随着化妆品的行业监管升级，产业迎来了机遇与挑战并存的崭新时代。为激发化妆品企业科技创新活力，提高核心竞争力，适应化妆品行业监管的新形势，推动化妆品行业高质量发展，提升中国化妆品的国际市场地位，本次国际技术交流峰会将邀请来自化妆品监管部门、检验机构及科研院校、生产企业的专家学者莅临大会并作精彩报告。聚焦新规实施后的行业动向，从化妆品法规体系、检验检测技术、功效评价、安全评估、新原料与配方研究等不同维度展开深度解析和趋势展望，促进产业正向发展。

参考标准参考标准：中国药典2020版一部色谱条件色谱柱：月旭Ultimate® ODS-3（4.6×250mm，5μm)。流动相：甲醇/0.1%磷酸=1/99；检测波长：210nm；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；进样量：10μL。谱图和数据参考标准用月旭Ultimate® ODS-3（4.6×250mm，5μm)，在此色谱条件下测定，能满足检测的要求。

离子交换层析的洗脱会受到线性或分步盐梯度或置换展开的影响。一般zui好先采用线性的盐梯度洗脱，维持梯度约10个柱体积。在zui简单的情况下，梯度操作需两种缓冲液，平衡缓冲液（buffer A）和用于加载相反电荷离子所用缓冲液（buffer B）。大多数情况下，并不需要后半段的梯度，因为多数蛋白质都可以在150-500nmol/L盐浓度下从传统的离子交换剂上洗脱下来。所以，通常zui大梯度到50%足矣。分步洗脱也可通过buffer A和buffer B实现。也应该意识到也许永远都不会获得一种理想的适用于层析柱的分步洗脱。首先，盐滞留以及HPLC的盲端体积都是决定取样时间的因素；其次，因为缓冲液混合器的特性，仅能获得S形曲线。根据分步洗脱中选择的盐浓度，蛋白质会随着盐峰前端移动或移至盐峰前端的后方。Yamamoto等将其命名为Ⅰ型或Ⅱ型洗脱。当浓缩的洗脱物被冲洗出来之后，所选择的盐浓度必须适于Ⅰ型洗脱。此时的盐浓度可能要比相应采用线性梯度洗脱所达到的zui大盐浓度高一些。Ⅰ型洗脱所需的缓冲液小于1个柱体积。pH梯度洗脱更难于优化。所以，zui好首先根据蛋白质的pI找到一种条件——此时蛋白质不与离子交换剂结合。若低于pI，宜采用阴离子交换剂；若高于pI，宜采用阳离子交换剂。因此必须降低或提高pH。请记住，离子交换剂本身相当于一种酸或碱，生成pH梯度应遵循 滴定曲线。要获得线性的pH梯度是十分困难的，但是采用含有二元醇的硼酸盐缓冲液可以实现，如甘露醇。第四种洗脱方式是采用手动调节pH梯度进行洗脱。当采用10mmol/L的较低浓度缓冲液洗脱时，使用盐可以导致pH梯度，这种梯度的形成是因为不同种类盐移动情况不同。这种手动调节的pH梯度，可以用于高分辨率，另外也有利于蛋白质峰集中。这种情况下，也需要数个柱体积的缓冲液。月旭科技离子交换层析填料Q /SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速琼脂糖基架离子交换介质Q/SP Tanrose HP 高分辨率琼脂糖基架离子交换介质Q/SP Tanrose XL 高载量琼脂糖基架离子交换介质Q/SP Tanrose BB 大颗粒琼脂糖基架离子交换介质Solid Q/S/DEAE 高刚性琼脂糖基架离子交换介质Solid Q/SP Mustang 高分辨率刚性琼脂糖基架离子交换介质Solid MMC 复合型弱阳离子交换介质Solid MIX A 复合型强阴离子交换介质DEAE/CM Tandex 葡聚糖基架离子交换介质

小伙伴们在做日常检测，会发现有些项目，测试标准上使用的流动相中加入了像庚烷磺酸钠、四丁基氢氧化铵、四丁基溴化铵等试剂，这类试剂我们称为离子对试剂，它可以用来改善分离和峰形、缩窄样品的保留范围等。离子对试剂可以看成是在高效液相色谱法中引入了离子色谱方法的一种表现。今天小编和小伙伴们聊聊离子对色谱法的保留基本原理和一些特殊问题。离子对色谱法（IPC）可被看做是以分离离子样品为目标的反相色谱法的改良形式。IPC和RPC唯yi不同的条件是IPC在流动相中添加了离子对试剂R+或R-，这些试剂能在平衡过程中，与酸性化合物的A-或碱性化合物的BH+发生相互作用：  离子化溶质             离子对（酸）A-+R+     ⇔     A-R+（碱）BH++R-   ⇔     BH+R-  亲水性溶质              疏水性离子对（在RPC保留较少）  （在RPC保留较多）使用IPC可令样品的保留行为产生类似于改变流动相pH的变化，但是IPC能更好地控制酸性溶质或碱性溶质的保留行为，而且无需使用极端的pH（如pH8）。典型的离子对试剂包括烷基磺酸盐R-SO3-(R-)和四烷基铵盐R4N+(R+)，以及强羧酸（通常是离子化的）（四氟乙酸、TFA；七氟丁酸酐、HFBA（R-）），还有所谓的离液剂（BF4-、ClO4-、PF6-）。有关IPC的保留机理目前有两种说法。一种说法是离子对在溶液中形成，然后被保留在色谱柱上，溶质保留平衡过程如下（以离子化的酸性溶质A-和四烷基铵盐R+形成离子对为例）：A-R+（流动相）  ⇔    A-R+（固定相）根据这个说法，溶质保留由以下因素决定：① 溶质分子A在流动相中已电离的部分（取决于流动相pH和溶质的pKa）；② IPC试剂的浓度和它形成离子对的趋势；③ 离子对复合物A-R+的k值。另一种说法则认为，IPC试剂先被固定相保留，然后溶质的保留是离子交换的过程，例如，离子化的酸性流动相A-和IPC试剂R+X-：A-（流动相）+ R+X-（固定相）                    ⇕ A-R+（固定相）+ X-（流动相）  即是，离子对试剂 R+X-先吸附到固定相上，然后样品离子A-代替固定相上的反离子X-。这两种IPC的保留过程都可能在任一个给定的分离中占优势，但是哪一种机制起着更为重要的作用既不容易确定，对实际操作也不重要。在IPC中，可以用于控制选择性的分离条件包括：➩ pH；➩ IPC试剂的类型（磺酸盐、季铵盐、离液剂）；➩ IPC试剂的浓度；➩ 溶剂强度（B%）；➩ 溶剂类型（甲醇、乙腈等）；➩ 温度；➩ 色谱柱类型；➩ 缓冲溶液的类型和浓度。无机试剂（或“离液剂”）如ClO4-、BF4-和PF6-可用于代替常用的烷基磺酸盐作为IPC试剂。无机试剂在固定相上的保留较少，它的保留机理更接近上述的di一种说法，在流动相中形成离子对。离液剂能更好地用于梯度洗脱（有较小的基线噪音和漂移），且当B%较高时也能较好的溶解在流动相中。但是使用离子对试剂也有一些特殊问题，在某些情况下需要严格控制流动相pH；温度控制的重现性必须较高（比RPC更需要），此外，IPC中的某些问题不会在RPC分离中出现或与其他RPC有所不同。还有就是出现伪峰、改变流动相周柱平衡缓慢、有不明原因造成的糟糕的色谱峰型等。首先是伪峰。当把样品溶剂（不含样品）注入到IPC中（即空白实验），我们有时会观察到正峰和负峰同时出现的情况。导致伪峰的原因通常是由流动相和样品溶剂的组成之间存在差异引起的。而使用不纯的IPC试剂、缓冲液或其他的流动相添加剂都会使伪峰的问题更为严重。其次是缓慢的柱平衡。当使用新的流动相时，必须用足够体积的流动相冲洗色谱柱以使色谱柱达到平衡。在IPC中，IPC试剂在色谱柱上的吸附和解吸附在某些情况下非常缓慢，这会造成色谱柱不能被新的流动相完全平衡。所以，无论是旧的流动相还是新的流动相含有IPC试剂时，我们必须确定改变流动相后样品的保留具有重现性（需要以新的流动相进行几小时的冲洗色谱柱才能达到完全平衡）。更换IPC试剂时，先用特殊的洗脱剂把先前吸附在色谱柱上的IPC试剂洗脱下来，再用新的流动相对色谱柱进行平衡。阴离子试剂（如烷基磺酸盐）能用组成为50%~80%甲醇-水的洗脱剂洗脱下来；季铵盐需要使用50%甲醇-缓冲液（如，pH为4~5的100mmol/L的磷酸氢二钾溶液，加入磷酸氢二钾是为了减少季铵基团与固定相上离子化的硅醇基间的相互作用）。任一情况下，首先应使用至少等于20倍柱体积的洗脱剂来冲洗色谱柱，然后再使用新的流动相进行柱平衡。另外，像较弱的离子对缓冲液三氟乙酸（TFA）以及离液剂，不会减缓柱平衡的过程，通常用10~20倍的含TFA或离液剂的流动相冲洗色谱柱足以达到柱平衡。用含IPC试剂的流动相进行色谱柱的初始平衡，则平衡过程可能会非常缓慢。为了避免在开展常规实验的每个新系列之前都要进行12h的平衡，我们建议在完成每个系列的实验后把色谱柱浸泡在流动相（含IPC试剂）里储存。这个权宜的方法使得以IPC做含量测定时能更快的达到柱平衡；假如需要每天或每两天重复一次，我们也建议使用这个办法，然而，当以这种方式储存时，其使用寿命可能会缩短。由于IPC试剂与色谱柱的缓慢的平衡过程，即使用较剧烈的洗脱程序，也不可能把IPC试剂完全从色谱柱上洗脱下来。基于这个原因，我们建议已用IPC分离的色谱柱不要再用于开展不含IPC试剂的RPC分离（TFA和离液剂例外）。假如在IPC中观察到糟糕的峰型和（或）柱塔板数的N值较低时，可以考虑改变柱温。以上就是离子对色谱法的保留原理，和一些特殊问题的解决方法，希望对小伙伴们以后用离子对色谱法能有所帮助。

参考标准参考标准：中国药典2020版。色谱条件01 注：在原条件基础上增加高比例有机相洗脱，以去除后面强保留杂质，以免杂质在后续进样中出峰影响检测，同时也避免杂质峰残留在柱子上影响柱子寿命。谱图和数据混合标准溶液图结论用月旭Ultimate® AQ-C18（4.6×250mm，5μm)，在此色谱条件下测定，能满足检测的要求。

考马斯蓝染色法又称Bradford法，是Bradford于1976年建立起来的一种蛋白质浓度的测定方法。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，zui大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有zui大光吸收。实验仪器分析天平、烧杯、玻璃杯、移液枪、紫外分光光度计或酶标仪。实验试剂①标准蛋白溶液：常用牛血清蛋白（BSA），配制1mg/mL的标准溶液。②0.01%考马斯亮蓝染色液G-250：称取0.01g考马斯亮蓝G-250，溶于95%乙醇中，加85%(m/V)的磷酸10mL，zui后用超纯水定容至100mL，装入棕色瓶中保存。（不宜久存，室温1-2个月）实验步骤紫外分光光度计测定将表格所示溶液加入试管中充分混匀，10min后倒入比色皿，放入紫外分光光度计于595nm测定吸光值，1号管作为空白对照，以蛋白浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标曲作为定量依据。②样品测定取含10-100μL蛋白质溶液于小试管中，加水稀释至0.1mL，然后加入5mL G-250蛋白染色液，充分混匀，10min后倒入比色皿，放入紫外分光光度计于595nm测定吸光值，1号管作为空白对照，将测得吸光值带入标准曲线计算样品中的蛋白质含量。酶标仪测定将表格所示溶液依次加入酶标板中混匀，静置10min后，放入酶标仪中于595nm测定吸光值，A孔作为空白对照，以蛋白浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标曲作为定量依据。②样品测定取含4-40μL蛋白质溶液于酶标板中，加水稀释至40μL，然后加入250μL G-250蛋白染色液，充分混匀，静置10min后，放入酶标仪于595nm测定吸光值，A孔作为空白对照，将测得吸光值带入标准曲线计算样品中的蛋白质含量。注意事项①通常会将样品稀释多个梯度进行测定，防止样品测得吸光值过高，超出标曲导致的含量计算偏差。②样品中若含有去污剂，如TritonX-100、SDS等，会严重干扰测定结果。③比色反应需在1h内完成，如果测定要求很严格，可以在染色液加入后的5-20min内测定吸光值，因为在这段时间内颜色是zui稳定的。④测定时，蛋白-染料复合物会有少部分吸附在比色皿杯壁上，测试完后可用乙醇溶液将比色皿中的残留物冲洗掉，再用超纯水冲洗干净保存。

采用高效液相色谱法检测时，很多时候会需要做空白溶剂干扰实验。当空白溶剂实验显示空白溶剂在待测成分处出峰时，就一定是溶剂带来的干扰吗？如果出现空白溶剂干扰，该怎么办呢？可以从以下几个方面去查找原因并解决。 系统污染：这种情况下，将仪器接双通，采用10%异丙醇，低流速过夜冲洗仪器。进样口污染：进样口用水-乙腈-异丙醇-乙腈-水的顺序充分清洗。色谱柱残留：色谱柱在进过高浓度样品后再进低浓度样品色谱柱上会有残留，这种情况可以先多进几针空白溶剂，或将色谱柱用过渡流动相过渡后，用高比例有机相低流速过夜冲洗后，再进行检测或更换新的没有污染的色谱柱。配样试剂干扰，配样试剂纯度不纯，或放置后，会产生杂质。如是溶剂放置时间过久产生干扰，重新配制即可。如是试剂纯度引起的干扰，可以更换更高纯度级别的试剂进行试验。流动相试剂纯度不够，这种情况容易在低波长下出干扰峰，这种情况下，可以更换更高纯度级别的试剂，或加杂质捕集柱来去除干扰。一体式盖垫，因盖垫为用特殊胶粘合的，特殊条件下，会溶于溶剂出峰，这种情况下，选用分体式盖垫，即可。液相样品进样前，需用过滤膜过滤，有些过滤膜会产生杂质出干扰峰，这种情况下，需更换不同的过滤膜来解决。如采取以上方法后，干扰还是无法去除，则需考虑更换溶剂。

茵陈，原名茵陈蒿，始载于《神农本草经》，被列为上品。具有清利湿热，利胆退黄之功效。用于黄疸尿少，湿温暑湿，湿疮瘙痒。文中参照茵陈【滨蒿（绵茵陈）】配方颗粒公示稿的方法，采用月旭Ultimate® UHPLC XB-C18色谱柱进行特片图谱的检测，结果能满足检测需求。采用月旭Ultimate® Plus C18色谱柱进行含量测定项的检测，结果能满足检测需求。特征图谱的测定色谱条件结论用月旭Ultimate® UHPLC XB-C18（2.1×100mm，1.8μm)，在此色谱条件下测定，能满足检测的要求。含量测定色谱条件色谱柱：月旭Ultimate® Plus C18（4.6×250mm，5μm)。流动相：0.05%磷酸/乙腈=90/10；检测波长：327nm；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；进样量：10μL。谱图和数据对照品溶液结论用月旭Ultimate® Plus C18（4.6×250mm，5μm)，在此色谱条件下测定，能满足检测的要求。

蛋白质结合于填料之后，必须再将目标蛋白质洗脱，并收集层析柱柱后的流出液。多数情况下，洗脱过程用于将不需要的蛋白质从目标蛋白质中分离或者去除。不需要的蛋白质可能与填料结合的不是那么紧密，因而会先于目标蛋白质被洗脱。另外一些情况下，不需要的蛋白质会与填料结合更加紧密，并会在目标蛋白被洗脱之后仍与填料结合。这种情况通常发生在疏水层析法（HIC）分离蛋白质多聚体时，目标蛋白多聚体与填料的结合比单体与填料的结合更加紧密。在洗脱过程中，流出液组分可能含有高纯度产品，但在其之前或之后也会含有大量的不需要的蛋白质杂质。洗脱过程（梯度洗脱）如图所示，该图说明用HIC分离纯化时，在洗脱步骤中，应将柱后流出液进行等份收集，这样才可以获得适宜纯度的产品。洗脱过程可采用等度或梯度的方式进行。4种最常见的洗脱结合蛋白质的方法如下：1、降低盐浓度（相对于结合条件）盐浓度的降低会相应地减弱蛋白质和配基间的疏水作用，进而蛋白质被解吸附并从层析柱上洗脱下来。2、加入有机溶剂有机溶剂（如乙烯或丙二醇）的加入可以改变溶液的极性，从而可以干扰疏水作用。3、提供盐浓度（采用离液盐）离液盐的加入可以干扰疏水作用。4、加入去污剂去污剂可以用做蛋白质置换剂，主要用于HIC纯化膜蛋白。在洗脱步骤中，将蛋白质从HIC填料上洗脱的最常用方法是降低盐浓度。用HIC纯化新的蛋白质组分时，同样首先采用该方法。上述其他方法的缺点在于，需要额外加入物质，而这些物质可能影响蛋白质的稳定性。但是，洗脱与填料结合比较紧密的蛋白质时，还是需要这些试剂的。以下是月旭科技现有的HIC填料：

样品瓶包含许多种类，诸如进样瓶，储存瓶，顶空瓶等等，而每一类又包含了各式各样的“成员”。月旭科技进样瓶大家庭中再添两名新成员——内胆瓶与超净款进样瓶。内胆瓶内胆瓶也是储存瓶的一种，因为其内部类似内胆结构，便称之为内胆瓶。内胆瓶一般应用在医药行业，用于存储少量液体，也可以用于标准品的储存、生物试剂的分装等。产品特点★ 瓶口为13-425的尺寸规格，与4mL进样瓶，也就是洗针瓶规格相同，方便盖垫耗材的管理。该产品还适配于实心盖或开孔盖，可满足不同的液体储存要求以及操作人员的使用习惯。★ 材质上采用进口肖特中硼硅管材，相较于普通材质具有更少的金属杂质，对药液的保存更有利，减少瓶身杂质对药液的污染。★ 内胆结构可以使少量液体存储在一个较大瓶子的上方空间中，使其不仅拿取瓶子方便，提取液体也十分方便。产品信息超净款进样瓶超净款进样瓶主要应用于质谱检测和高标准试验，因其实验要求有更少的干扰杂质，普通的进样瓶可能无法满足需求，进而有了超净款进样瓶的诞生。产品特点★ 规格上超净款进样瓶与普通进样小瓶相同。★ 使用了更为洁净的原料制作，从源头减少杂质干扰。★ 优化生产工艺，使其在生产过程中进一步避免杂质产生，溶出更少。★ 产品出厂时采用了瓶盖垫整套的包装方式，zui大限度减少实验操作及运输环节产生的污染。产品信息

在固相萃取技术中通常会涉及到一些专业性的名词，下面为大家介绍一些常用的名词以及对应的名词解释。柱床体积（void volume）对于装填在SPE柱中一定质量的SPE吸附剂，所需充满吸附剂颗粒及内孔空间的溶剂体积等于柱床体积。对于40μm、60Å的吸附剂，柱床体积大约为120μL/100mg吸附剂。柱穿透（breakthrough）目标化合物在载样时没有被SPE吸附剂保留而流过SPE柱。目标化合物在吸附剂的保留太弱或吸附的样品超过柱容量时就会发生柱穿透。柱容量（capacity）在一定的溶液环境中，给定的SPE柱能够保留目标化合物及干扰物的总量。对于某一目标化合物，吸附剂的柱容量与其所作的溶液基质有关。通常柱容量不会大于吸附剂质量的5%。柱体积（column volume）常见的SPE柱有1ml、3ml、6ml等。这里的毫升数指SPE空柱的体积。柱体积并不等于可以加载至某一SPE柱的样品体积。例如,1ml SPE柱的载样量并非等于1ml。SPE柱的载样量取决于柱容量和样品浓度，通常载样量大于柱体积。预处理（condition）柱预处理又称柱活化。主要目的是使SPE柱达到萃取的zui佳状态，以便吸附目标化合物。对于以硅胶为基质的反相SPE柱，必须注意在载样之前，活化好的SPE柱要保持湿润。共价作用（covalent interaction）共价作用是指目标化合物与吸附剂之间形成的共价键。共价键一般不容易逆转，但在一定条件下是可逆的。共价作用在固相萃取中并不常见，但具有很好的选择性。例如，苯硼酸基在低pH时硼原子与三个不同的原子键合。当pH升高至8.5时，硼原子与OH基结合，在这种状态下，就通过连接硼原子的两个氧原子与目标化合物形成共价键。通常其可以与二酚、二胺或胺醇形成共价键。当pH降至1.0，就会释放目标化合物。干燥（dry）在对目标化合物进行洗脱之前，对SPE柱进行干燥的目的是除去萃取柱中的水分，以便更好地进行洗脱。同时，也可以防止水分对气相色谱柱的损害。洗脱（elution）洗脱是用适当的溶剂将目标化合物从SPE柱上洗脱出来的过程。应该根据SPE柱对目标化合物不同的保留机理选择适当的洗脱溶剂。溶剂的选择是zui大限度地将目标化合物洗脱，而共洗脱的杂质越少越好。封尾（endcapping）用三甲基氯硅烷对硅胶基质表面未与官能团键合的硅羟基进行反应，以减少硅羟基的数量，从而减少硅羟基对固相萃取中主作用力的干扰。萃取机理（extraction mechanism）在固相萃取中，萃取机理是指化合物与吸附剂之间相互作用的化学本质。在固相萃取中主要的萃取机理有非极性、极性、离子交换、共价等。官能团（functional group）官能团也称功能团。在固相萃取中，官能团是指具有一定性能的化合物原子基团。这些原子基团在一定条件下可以被吸附剂所吸附而使目标化合物得以保留在SPE柱上。适当地改变条件又可以破坏这种相互作用，使这些原子基团从吸附剂上释放出来。相互作用（interaction）相互作用是指在一定的化学环境中，两个化合物之间相互吸引或排斥。在固相萃取中，有三种基本的相互作用：目标化合物/吸附剂、样品基质/吸附剂、目标化合物/样品基质。干扰物（interferences）干扰物也称杂质，是指对目标化合物的萃取或检测起到负面作用的物质。干扰物主要有两类。一类通过与目标化合物竞争或与目标物结合而阻碍或限制吸附剂对目标化合物的吸附；另一类是对zui终的检测起到干扰作用的物质。这两类干扰物在样品前处理过程中都应该尽量除去。离子交换作用（ion-exchange interaction）离子交换作用是化合物中的离子官能团与吸附剂表面带相反电荷官能团之间的相互作用。离子交换可以通过溶剂pH、离子强度、竞争离子的选择性等条件来控制。按照化合物与吸附剂之间相互作用能量的大小，离子交换作用有强弱之分。

陈皮为常用理气药，陈皮之名首见于《食疗本草》。在中国药典中，按产地将陈皮分为“陈皮”和“广陈皮”。在《食鉴本草》、《药品化义》、《本草必用》、《握灵本草》等中均有对陈皮的描述，而且一致认为广东产者佳。《本草纲目》也说：“今天下多以广中来者为胜，江西者次之”。可见陈皮的以“广陈皮”为zui佳。陈皮具有理气健脾，燥湿化痰之功效。用于脘腹胀满，食少吐泻，咳嗽痰多。明代李时珍云：“同补药则补，同泻药则泻，同升药则升，同降药则降。脾乃原气之母，肺及摄气之签，故橘皮为二经气分之药，但随所配而补泻升降也。”在此理论指导下，陈皮用途广，用量大。中国药典中，对陈皮和广陈皮的含量测定方法进行了明确的规定，本文参照中国药典的方法，采用月旭Ultimate® Plus C18色谱柱，对广陈皮进行检测。结果用此色谱柱，在该色谱条件下，能满足检测需求。色谱条件：色谱柱：月旭Ultimate® Plus C18（4.6×250mm，5μm )。流动相：时间（分钟）乙腈（%）水（%）检测波长（nm）0-10227828310-2022-4878-5228320-354852330检测波长：283/330nm；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；进样量：5μL。谱图和数据对照品溶液结论用月旭Ultimate® Plus C18（4.6×250mm，5μm )色谱柱，在该色谱条件下测定，能满足实验需求。

Copley创建于1946年的英国诺丁汉，是全球知名的药物检测仪器研发和制造商，公司遵循严格的产品质量管理体系，与全球众多科学家保持合作和交流，在药物检测技术领域不断创新，为全球超过96个国家的用户提供药物测试解决方案和仪器。月旭科技是Copley固体制剂检测产品线和清洁剂检测产品线在中国（含港澳台地区）的du家代理和服务商。本期中，小编将为小伙伴们做一个Copley产品特辑的更新版，一一细数和汇总此前介绍过的Copley产品。01 DTGi系列全自动崩解仪首先介绍符合中国药典0921章节规定，经过全新工业设计，加入了方便操作的触摸屏设计的全自动崩解仪。最多可选4位吊蓝，24个药片同时检测的DTG 400i配置可选。02 DISi系列溶出仪可进行篮法、桨法、小杯法、桨碟法、转筒法、浸没池法、栓剂篮法、固有溶出度法等等溶出方法的全新DIS系列溶出仪。03 FRVi系列脆碎度仪还记得内置脆度计算器和内置10度角倾斜装置，并且具有便捷的“一键清理药片”功能的Copley脆碎度仪吗？她不仅标配药典规定的脆度鼓配件，还可选摩擦鼓配件，可配坚硬片剂专用脆度仪Friabimat SA-400。04 TBF100i系列硬度仪想一次性完成片剂硬度、直径、厚度和重量的测试吗？Copley 2020年新款的TBF100i系列硬度仪可能是您的心怡之物。05 JVi系列振实密度测试仪和堆密度测试仪2020版中国药典加入了振实密度测试法和堆密度测试法，而CopleyJVi系列产品是市场上wei一一款提供美国药典616和欧洲药典2.9.34指定的三种测试振实密度方法的仪器。她可选5mL，10mL，25mL，50mL，100mL，250mL等规格的量筒。为了减小噪音，还可以贴心地配一个隔音柜。06 BEP2系列流动性测试仪粉末药品流动性测试方法，Copley可以提供符合美国药典1174和欧洲药典2.9.36中提到的三种方法（孔口流动、休止角和剪切池）的仪器。07 立式扩散池法测试仪对于眼膏、化妆品等半固体制剂的扩散测试，Copley可以提供免水浴加热设计，可同时进行10个样品测试的HDT1000，可选美国药典中规定的B型池、C型池和皮肤池，并可选开放和封闭式的扩散池。08 SDT1000栓剂崩解和软化时间测试仪符合美国药典711、欧洲药典2.9.2和2.9.22关于栓剂崩解和软化时间的测试。选配的软化时间装置可同时进行三个样品的测试，一机两用，功能齐全。

亲和层析是根据一种生物分子间的特异相互作用来分离物质的层析方法，利用待分离物质与配体间所具有的特异性亲和力来达到分离目的的一类特殊层析技术。如抗原与抗体、DNA与RNA、酶与底物或抑制物等。从亲和层析填料上洗脱结合靶标是结合的可逆过程，需优化条件，削弱靶标和配基之间的相互作用。洗脱条件不应使靶蛋白变性，除非这些条件与下游程序兼容。有两种类型的洗脱方法，即特异性洗脱和非特异性洗脱。特异性洗脱过程中，介质或竞争配基或竞争靶标，通过这种形式攻击蛋白质-配基复合物，继而将靶蛋白释放至溶液中。用于洗脱的竞争介质的浓度和量（体积）依赖于其亲和力，这种亲和力与固定复合物的亲和力相关。与亲和力强的添加物相比，竞争介质的结合越弱越需要更高的浓度和更大的体积。对于弱的竞争介质，比配基高10倍是较好的浓度起点。特异性洗脱通常是温和的，更可能保留蛋白质的活性。这种方法的缺点在于：洗脱慢、洗脱峰宽、需要从回收的蛋白质中去除竞争介质。对于非特异性洗脱，需根据配基与蛋白质之间的相互作用机制优化洗脱条件，如增加盐浓度、降低离子相互作用或通过改变pH来改变质子化/离子化状态，从而调节氢键强度、疏水相互作用及静电相互作用。从固定的Protein G上洗脱抗体就是一个改变pH的例子，然而Protein G与抗体的亲和力非常强，需要不同洗脱条件组合达到zui大程度的抗体释放。通常，亲和作用需要靶蛋白正确地三维折叠，因此离液剂或影响蛋白质折叠的试剂可用于洗脱目标蛋白质，但是，必须注意保证靶标的正确折叠在洗脱后迅速恢复天然条件。当亲和力弱时，高浓度靶分子结合后，通过稀释以解离、洗脱复合物。月旭科技可提供的亲和层析填料◌ Protein G Tanrose 4FF抗体亲和介质◌ Ni Tanrose 6FF（NTA/IDA）/Ni Tanrose 6HP（NTA）/Ni Tanrose 4FF（NTA/IDA）金属螯合亲和介质◌ Co Tanrose 6FF（NTA）金属螯合亲和介质◌ IMAC Tanrose 6FF/Chelating Tanrose 6FF金属螯合亲和介质◌ Benzamidine Tanrose 4FF苯甲脒亲和介质◌ GST Tanrose 4FF谷胱甘肽亲和介质◌ Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose 6HP肝素亲和介质◌ Endotoxin rem Tanrose 4FF内毒素亲和填料◌ NHS-activiated Tanrose 4FF/CNBr-activiated Tanrose 4FF预活化亲和填料月旭科技可提供预装柱供您选择

哈喽哈喽，各位亲爱的读者朋友们，大家好呀。好久不见，小编甚是想念大家，不知道大家有没有想小编呢！今天小编将会给大家带来我们月旭两大核心液相色谱柱-离子交换以及亲水分析柱介绍。主要从键合相类型，耐受PH范围，色谱柱具有的特点来带大家走近我们这两大核心色谱柱。离子交换色谱的原理离子交换色谱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团， 这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子，按照质量作用定律，这些离子将与结合在固定相上带相反电荷的离子进行交换。离子交换色谱的固定相有阳离子交换官能团和阴离子交换官能团两种。阳离子交换官能团带有负电荷，用于阳离子的分离；阴离子交换剂官能团带有正电荷，用于阴离子分离。阳离子交换官能团zui常用的有磺酸盐型，阴离子交换官能团zui常用的是季胺型。离子交换色谱的流动相通常是含盐的缓冲水溶液。为了适应不同的分离需要，有时添加适量的能与水相溶的有机溶剂，如甲醇、乙腈、四氢呋喃等，以改进样品的溶解性能，提高选择性，改善分离。在以水溶液为流动相的离子色谱中，缓冲溶液的浓度直接影响着离子平衡。当缓冲液浓度增加时，流动相中反离子浓度的增加，增强了它与样品离子争夺离子交换官能团的能力，从而减弱样品组分与离子交换树脂的亲和性。流动相中的离子类型对样品分子的保留值产生显著的影响。月旭离子交换柱产品特点HILIC柱简介1990年，Alpert教授提出了一个新概念：亲水作用色谱（Hydrophilic Interaction Chromatography，HILIC）。这种色谱分析方式用来分离强极性和亲水性化合物，比如核苷和核苷酸、氨基酸、糖类等。它采用极性固定相和极性流动相，一般使用比固定相极性低的溶液，如：乙腈/水等。在HILIC色谱中与反相色谱不同的是，流动相的极性越大，洗脱能力越强，但水相比例zui好不要超过40%，不要低3%HILIC的作用原理目前仍在研究中，zui被广泛接受的说法是分析物在流动相和固定相表面富集水层间的分配作用，同时也包含有弱静电作用、氢键和分子双极性作用等。月旭HILIC柱产品特点时间过的真快，不知不觉小编又要和大家说再见了，感谢大家一直以来的支持，期待我们下次的相遇——只有你想见我的时候我们的相遇才有意义。

血络通胶囊是由人参和银杏叶提取物经制备而成的中成药，具有益气，活血，通络之攻效，用于轻度脑动脉硬化症初期属气虚血滞所致的头痛，眩晕，健忘，肢体麻木，神疲乏力，舌质暗紫等症。文中参照血络通胶囊国家药品标准草案公示稿，分别用Ultimate®XB-C18和月旭Ultimate®PG-C18两款色谱柱测定其中的总黄酮醇苷含量和人参皂苷含量，结果均能满足检测需求。一、总黄酮醇苷色谱条件色谱柱：月旭Ultimate® XB-C18（4.6×250mm，5μm)。流动相：0.4%磷酸溶液/甲醇=50/50；检测波长：360nm；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；进样量：10μL。谱图和数据槲皮素、山柰素、异鼠李素混合对照品溶液结论用月旭Ultimate®XB-C18（4.6×250mm，5μm)色谱柱，在该色谱条件下测定，能满足检测需求。二、人参皂苷色谱条件月旭Ultimate®PG-C18（4.6×250mm，5μm)检测波长：203nm；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；进样量：10μL。谱图和数据人参皂苷Re、Rb1混合对照品溶液结论用月旭Ultimate® PG-C18（4.6×250mm，5μm)色谱柱，在该色谱条件下测定，能满足检测需求。三、产品信息