【瑞士步琦】凯氮实验常见应用问题分析

凯氏定氮法是测定蛋白质/氮含量的常用方法，该方法简单易操作，但由于实验过程中涉及到的步骤以及使用的试剂较多，因此出现问题后排查起来会费时费力。本文汇总了客户在凯氮实验中常见的应用问题，并逐一分析给出解决方法，旨在帮助客户发现问题并及时排查解决。

问

1.1 称量误差：

检查天平是否平稳，天平周围是否有其他仪器干扰，是否有静电干扰

1.2 样品或标准品污染：

重新取样，或更换标准品

1.3 玻璃器皿污染：

清洗玻璃器皿

1.4 蒸馏残留：

减少液体总量，300mL 样品管中的样品量应不超过 150mL，以避免样品量过多喷溅严重；在碱加入样品管前，使用水稀释样品管中酸也能减低喷溅程度

1.5 实验环境中有游离氨：

检查进行定氮的实验室是否放置了氨水等含挥发性氨试剂

1.6 滴定剂浓度错误：

检查滴定液的计算和浓度、 摩尔反应系数（每摩尔盐酸含 2 摩尔 H+、每摩尔硫酸含 2 摩尔 H+）、滴定剂系数；对滴定酸进行标定，重新计算

1.7 滴定系统、滴定管、玻璃管中有空气：

检查滴定酸液位，如滴定酸不足及时补充，并在滴定系统上进行排液操作

1.8 pH 电极故障：

使用标准溶液校准电极，必要时进行更换，如使用标准缓

冲盐进行校准多次仍不能通过滴定仪要求则建议更换

1.9 手工滴定指示剂变性：

重新配置母液

1.10 计算错误：

重新计算，更换实验员对实验结果核对

问

2.1 称量误差：

检查天平是否平稳，天平周围是否有其他仪器干扰，是否有静电干扰

2.2 滴定剂浓度错误：

检查滴定液的计算和浓度、 摩尔反应系数（每摩尔盐酸含 2 摩尔 H+、每摩尔硫酸含 2 摩尔 H+）、滴定剂系数；对滴定酸进行标定，重新计算

2.3 样品或标准品污染：

重新取样，或更换标准品

2.4 样品中的氮含量较高：

减少样品量，样品中氮含量不可超过 200mg

2.5 样品转移过程损失：

避免天平转移到样品管过程中，样品损失，或挂壁

2.6 玻璃器皿污染：

清洗玻璃器皿

2.7 消解硫酸不足：

增加硫酸用量（依据经验，一般常量法比如 1g 左右样品试用 20mL 浓硫酸，半微量法使用 10 mL 浓硫酸）

2.8 消化时发生泄漏：

检查抽吸模块密封性

2.9 消解时发生喷溅：

调整加热档，使消解仪缓慢升温，避免样品因喷溅造成损失

2.10 催化剂与硫酸比例不对：

纠正催化剂与浓硫酸的使用比例在 1：3—1：2

2.11 消解未完成：

延长消解时间，保证样品澄清后继续消解 30 分钟

2.12 消解后未完全冷却：

消解后冷却至少 30 分钟

2.13 NaOH 加入量不足或所用的 NaOH 浓度不正确 (应为 32 %)：

纠正用量，直到可以观察到在碱加入后样品颜色发生变化

2.14 蒸馏时发生泄漏：

进行蒸汽力度测试

2.15 滴定剂浓度错误：

检查滴定液的计算和浓度、 摩尔反应系数、滴定剂系数；对滴定酸进行标定，重新计算

2.16 pH 电极故障：

使用标准溶液校准电极，必要时进行更换，如使用标准缓冲盐进行校准多次仍不能通过滴定仪要求则建议更换

2.17 手工滴定指示剂变性：

重新配置母液

2.18 计算错误：

重新计算，更换实验员对实验结果核对

问

3.1 称量误差：

检查天平是否平稳，天平周围是否有其他仪器干扰，是否有静电干扰

3.2 样品非均质：

由于样品的不均质导致结果不平行，请重新均质样品

3.3 样品或标准品污染：

重新取样，或更换标准品

3.4 样品转移过程损失：

避免天平转移到样品管过程中，样品损失，或挂壁

3.5 玻璃器皿污染：

清洗玻璃器皿

3.6 消解时发生喷溅：

调整加热档，使消解仪缓慢升温，避免样品因喷溅造成损失

3.7 消化时发生泄漏：

检查抽吸模块密封性

3.8 尾气吸收抽吸力不足：

检查尾气吸收仪管路密封性，定期清洗尾气吸收仪的泵

3.9 消解期间抽吸力太强：

使用旁路阀降低尾气吸收装置的抽吸力

3.10 消解未完成，消解时间太短：

延长消解时间，保证样品澄清后继续消解 30 分钟

3.11 蒸馏时发生泄漏：

进行蒸汽力度测试

3.12 蒸馏和滴定时搅拌器不工作：

清洗搅拌器，必要时进行更换

3.13 滴定系统、滴定管、样品管中有气泡：

检查滴定酸液位，如滴定酸不足及时补充，并在滴定系统上进行排液操作

3.14 pH 电极校准不正确或未校准：

使用标准溶液校准电极，必要时进行更换，如使用标准缓冲盐进行校准多次仍不能通过滴定仪要求则建议更换

3.15 滴定管被堵塞、松脱、太短或损坏：

检查滴定管，清洁或重新连接

3.16 手工滴定指示剂变性：

重新配置母液