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【瑞士步琦】通过SFC(超临界流体色谱)分离三萜香树脂醇的方法

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分享: 2023/04/12 09:39:49
640.jpg

分离三萜香树脂醇的方法


香树脂醇属于三萜类的天然产物,它们有一个双键,结构为五环三萜醇。自然界中的香树脂醇通常以 α-香树脂醇和 β-香树脂醇形式存在,它们互为同分异构体。其中 β-香树脂醇,又称白桦酯醇,具有较高的药用价值,能抑制胆固醇和甘油三酯合成,有效预防肥胖症、动脉粥样硬化症和 2 型糖尿病。


α-香树脂醇

β-香树脂醇


作为两个极性接近的同分异构体,如何利用色谱法有效分离和收集 α-香树脂醇和 β-香树脂醇一直是天然产物界的研究课题之一。


由于香树脂醇的化学结构特性,在 HPLC-UV 上会采用 200nm 左右的吸收波长来检测,很容易受到溶剂或其他杂质的影响,而且分离时间也比较长。如图 1 采用 250×3mm I.D,3μm 的 C18 色谱柱分离一系列三萜化合物的混合物。


 M. Martelanc et al. / J. Chromatogr. A 1216

 (2009) 6662–6670



图1、用 HPLC-UV 分离羽扇豆醇(L1),羽扇烯酮(L3),α-香树脂醇(αAm),β-香树脂醇(βAm),δ-香树脂醇(δAm),乙酸环阿屯酯(C2), β-谷甾醇(S2)以及豆甾醇(S1)混合物,流动相为 6.5%水/93.5% 乙腈。


本文介绍了一种利用 BUCHI Sepiatec SFC 仪器分离 α-香树脂醇和 β-香树脂醇的方法。SFC 仪器与蒸发光散射检测器(ELSD)相连。为了提高生产效率,采用了堆叠注入模式。


640 (1).jpg

 BUCHI Sepiatec SFC-50


 1

实验条件

设备

Sepiatec SFC-50

色谱柱

Reprosher C30 10um 100x10mm

流动相种类

A=CO2

B=甲醇

流动相条件

A/B=85%/15%,等度 18min

流速

30 mL/min

背压

150 bar

柱温

40℃

样品

25 mg/mL 香树脂醇甲醇溶液

进样量

11 次叠层进样,每次 100uL


 图2、香树脂醇经过 11 次叠层进样,

分离为 α-香树脂醇和 β-香树脂醇


 2

结果与讨论

由于 α-香树脂醇和 β-香树脂醇之间没有基线分离,所以分为三组馏分收集,中间部分重新注入以提高回收率。在图 1 的 HPLC-UV 分离方法中,α-香树脂醇和 β-香树脂醇的出峰时间为 20-25 分钟,基线部分波动较大。在图 2 中,SFC-ELSD 采用 11 次叠层进样,总时长为 18 分钟,相比 HPLC 法效率更加高,基线也更加平稳。在馏分收集方面,得益于叠层进样和主要溶剂为 85% CO2,可以在收集大量样品的同时减少溶剂后处理的时间。


 3

结论

α-香树脂醇和 β-香树脂醇可以用 Sepiatec SFC-50 有效分离,结合 ELSD 可实现高产率的检测和连续分馏。


 4

文献来源

Separation and identification of some common isomeric plant triterpenoids by thin-layer chromatography and high-performance liquid chromatography


Mitja Martelanc, Irena Vovk, Breda Simonovska

National Institute of Chemistry, Laboratory for Food Chemistry, Hajdrihova 19, SI-1000 Ljubljana, Slovenia




仪器信息网_新闻后缀.png

[来源:瑞士步琦有限公司 BUCHI Labortechnik AG]

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瑞士步琦
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