包涵体溶解液

产品名称：包涵体溶解液

RIPA裂解液采用优质原料配制，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用，是经典常用的细组织快速裂解液。 本RIPA裂解液适用于从各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织样品中提取总蛋白。 本RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本裂解液提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白，下游应用范围广，提取液裂解细胞的能力较温和，需要根据实际样本情况优化裂解时间。 本裂解液中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

包涵体溶解液，注意事项

1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

4.如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

5.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

6.下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。

包涵体溶解液，使用方法

1. 裂解液的准备：

根据所需要提取的样本量，每500ul裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2. 在4℃ 10000×g条件下将菌液离心10分钟，弃上清，尽量吸干剩余液体，收集菌体。

3. 用PBS洗菌体2次。

4. 按每50-100mg湿重菌体样本加入500ul裂解液，混匀，冰上放置20-30分钟。

5. 在150w-300w，10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。

6. 在4℃ 12000×g条件下将菌液离心10分钟，将上清移入冷的干净离心管。

7. 即得到细菌总蛋白样品。

8. 将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。

包涵体溶解液，试剂准备

1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）

2.蛋白定量试剂盒

保存温度2-8℃

保质期1年

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