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如何正确使用血清冻存方法以及注意事项

  如何正确使用血清冻存方法以及注意事项  使用 血清 时的注意事项具体如下:  1.供血的重生小牛必须是健康牛的产仔,并在产后24小时内抽血,此期间不得吸取母乳。  2.以无菌操作自颈动脉放血,并在无菌条件下分离血清及滤菌,全过程在36小时内完成。经滤菌的血清登一2 0 IC保存。  3.血清使用前需做细荫、支原体培育及内毒素测定,在的确无污染的情况下方可使用。  4.每批小牛血清测定总蛋白含量并别离配成10%,20%,25%于墓础培育墓和HAT培育墓中,对骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞进行培育,观察小牛血清对瘤细胞和融合细胞的细胞毒性。若在20%浓度小牛血清情况下,细胞生长差或死亡,则该批小牛血清不适宜使用。  实验室的噪音、防震、防尘、防腐蚀、防磁与屏蔽等方面的环境条件应符合在室内开展的检定项目之检定规程和计量标准器具及计量检测仪器设备对环境条件的要求!如果您对我们的产品或服务有什么建议和意见的话,欢迎您留下您的联络方法,咱们会及时与您取得联络。  怎样冻住血清才不会使产品质量受损:  1.将血清从冷冻箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室温下使之全溶。但有必要注重的是,溶解进程中有必要规矩地摇晃均匀。  2.血清冻住后发现有絮状沉积物出现,该怎样处置  3.血清中沉积物的出现有许多缘由,遍及的缘由是因为血清中脂蛋白的变性构成的;而血纤维蛋白在血清冻住后,也会存在于血清中,亦是构成血清沉积物的首要缘由之一。但这些絮状沉积物,并不影响血清自身的质量。若您欲去掉这些絮状沉积物,可以将血清分装至无菌离心管中,以400g略微离心,上清液即可接着参与培育基内一起过滤。不建议您以过滤的办法去掉这些絮状沉积物,因为它可能会堵塞您的过滤膜。  正确使用血清冻存 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2023.01.10

您了解大鼠(Rat)肿瘤坏死因子-α试剂盒吗?

大鼠(Rat)肿瘤坏死因子-α(TNF-α) ELISA 检测试剂盒本试剂仅供研究使用    标本:血清或血浆大鼠(Rat)肿瘤坏死因子-α试验原理:TNF- α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF- α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF- α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF- α的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份      大鼠(Rat)肿瘤坏死因子-α上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2023.01.09

ELISA原理:酶联免疫吸附测定原理及应用方向

  酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay),简称ELISA,是实验室常用的检测方法。 酶是能够催化化学反应的特殊蛋白质,其催化效力超过目前所有人造催化剂。ELISA是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后,既不影响抗原抗体反应的特异性,也不改变酶本身的活性。因此ELISA具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点,适合于大批标本的检测,广泛应用于食品安全检测、医疗检测以及免疫实验分析等领域。  ELISA必须遵守以下3个核心原理:1)抗原或抗体能吸附于固相载体表面,并保持其免疫学活性;2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。在ELISA中酶起到很关键的作用,常用于ELISA法的酶有辣根过氧化物酶,碱性磷酸酯酶等,其中尤以辣根过氧化物酶为多。酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作用下联结的产物,它不仅具有抗体抗原特异的免疫反应,还能催化酶促反应,显示出生物放大作用。  ELISA应用的范围很广,而且正在不断地扩大,原则上ELISA可用于检测一切抗原、抗体及半抗原,可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。在实际应用方面可用于疾病的临床诊断、疾病监察、疾病普查、法医检查、兽医及农业上的植物病害的诊断检定等。因此,它和生物化学、免疫学、微生物学、药理学、流行病学及传染病学等方面密切相关。按照待测物性质的不同,ELISA反应可以分为抗原检测反应及抗体检测反应。  而用ELISA检测抗体,已获得对多种传染病和寄生虫病的血清学诊断,亦开始广泛用于现场流行病学调查。在寄生虫病方面,它用于对疟原虫、阿米巴、利日曼原虫、锥虫、血吸虫、囊虫、弓浆虫、肺吸虫、肝吸虫、血丝虫、旋毛虫病等血清学诊断,这对人医和兽医都很重要。在病原微生物方面已用于检测链球菌、沙门氏菌、布氏杆菌、结核杆菌、麻疯杆菌、霍乱弧jun、淋球菌、假丝酵母菌等的抗体,还可用于和霍乱弧jun抗毒素的测定以及检测斑疹伤寒立克次氏体感染后的抗体作诊断,也可用于对立克次氏体的种属鉴别,还有用于检测鹦鹉热衣原体抗体的报导。ELISA也可应用于以下病毒抗体检测:流感病毒、腮腺炎病毒、麻诊、风疹、轮状病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒、腺病毒、肠道病毒、脑炎病毒、黄热病毒、狂犬病毒和脊髓灰质炎病毒等,其敏感性都超过目前常用的检测方法。此外,还可用于鉴定病毒型别,例如疱疹病毒。在免疫性疾病方面有试用作自身疫病抗体测定以及对过敏的诊断,例如检测各种过敏原的抗体、DNA抗体及甲状腺球蛋白抗体,红斑性痕疮抗体等等。在卫生学方面,可用于检测食品中葡萄球菌肠毒素及沙门氏菌毒素等等。  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

参数原理

2023.01.06

古朵带您了解、抗原抗体反应原理特点归纳

  古朵带您了解、抗原抗体反应原理特点归纳  抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应既可在机体内进行,也可以在机体外进行。抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化,包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段,以及由亲水胶体转为疏水胶体的变化。  由于抗体主要存在于血清中,在抗原或抗体检测中多以血清为试验材料,故将体外抗原抗体的免疫学反应也称作血清学反应(serological reaction)。该反应既可用已知的抗原检测未知的抗体,这是临床上常用的血清学诊断方法;也可用已知的抗体检测未知的抗原,如微生物及其代谢产物、激素、药物鉴定等的检测  古朵阐述抗原抗体反应反应特点  抗原抗体反应的特点主要有四性:即特异性、比例性、可逆性,阶段性。  特异性: 是抗原抗体反应的最主要特征,这种特异性是由抗原决定簇和抗体分子的超变区之间空间结构的互补性确定的。这种高度的特异性在传染病的诊断与防治方面得到有效的应用。随着免疫学技术的发展进步,还将在医学和生物学领域得到更加深入和广泛的应用,比如肿瘤的诊断和特异性治疗等。  比例性: 是指抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系,只有当二者浓度比例适当时才出现可见反应,在抗原抗体比例相当或抗原稍过剩的情况下,反应最彻底,形成的免疫复合物沉淀最多、最大。而当抗原抗体比例超过此范围时,反应速度和沉淀物量都会迅速降低甚至不出现抗原抗体反应。  可逆性: 是指抗原抗体结合形成复合物后,在一定条件下又可解离恢复为抗原与抗体的特性。由于抗原抗体反应是分子表面的非共价键结合,所形成的复合物并不牢固,可以随时解离,解离后的抗原抗体仍保持原来的理化特征和生物学活性。  阶段性:抗原抗体反应可分为两个阶段,第一个阶段为抗原抗体的特异性结合阶段,此阶段是抗原与抗体间互补的非共价结合,反应迅速,可在数秒钟至数分钟内完成,一般不出现肉眼可见的反应现象。第二个阶段为可见反应阶段,是小的抗原抗体复合物间靠正、负电荷吸引形成较大复合物的过程。此阶段反应慢,需要时间从数分钟、数小时至数日不等,且易受多种因素和反应条件的影响 。  抗原抗体反应影响因素  电解质:抗原和抗体通常为蛋白质分子,等电点分别为pH 3~5和pH 5~6,在中性或:弱碱性的环境中,表面均带负电荷,适当浓度的电解质会使他们失去一部分负电荷而相互结合,出现肉眼可见的凝集或沉淀现象:在抗原抗体反应中,常用0.85%的NaCI溶液或各种缓冲液作为抗原、抗体的稀释液,以提供适当浓度的电解质。  温度:抗原抗体反应必须在适宜的温度中进行,一般为15~40℃,通常最适为37℃。一定范围内,温度升高,可促进抗原抗体分子问的碰撞机会,加速抗原抗体复合物的形成,加快可见反应的速度,若温度高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或破坏;温度越低,结合速度越慢,但结合牢固,易于观察。某些特殊的抗原抗体反应,对反应温度有特殊要求,如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好,20℃以上反而解离。  酸碱度:抗原抗体反应必须在合适的酸碱度环境中进行,pH过高或过低都将影响抗原:抗体的理化性质,抗原抗体反应的最适酸碱度为pH 6~8。此外,当pH达到或接近颗粒性抗原的等电点时,即使没有相应抗体存在时,也会引起抗原非特异性凝集,即自凝,造成假阳性反应,严重影响试验的可靠性。  抗原抗体反应反应原理  抗体能特异性地识别相应的抗原,并与之结合。这种结合在体外也能发生,这种特性就是许多免疫检测方法的基础。抗原与抗体相互作用是非共价的,可逆的,其特性符合许多化学反应的基本原理。但因为抗体分子的结构特点,以及抗原分子结构的多样性,使抗原抗体结合反应表现出复杂性 。  交叉反应  抗体特异性与交叉反应:抗体是特异的。只与相应抗原反应。实际制备的抗体却常有非特异性反应,这是因为抗原不纯造成的。多组分抗原之间存在共同的抗原决定簇,或者两个抗原决定簇结构类似能与同一抗体结合,均可出现抗体与异源抗原的交叉反应。用琼脂双扩散能简便直观地反映不同抗原与同一抗血清,或不同抗血清与同一抗原的交叉反应。  抗原抗体反应应用  抗原:免疫动物是制备抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必须与大分子载体连接。抗原的用量视抗原种类及动物而异,—次注射小鼠可以少至几个微克,免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加,从几百μg/次至几mg/次。  佐剂及乳化:佐剂可以帮助抗原在注射部位缓慢释放,以增加免疫刺激的效果。佐剂有完全和不完全佐剂之分。完全佐剂加有灭活的分枝杆菌(如卡介苗)或棒状杆菌。福氏佐剂可从试剂公司购买,也可用羊毛脂和石蜡油按1:2—4混合自行制备。佐剂与抗原按1:1的比例混合乳化为均匀的乳液,放置后不会发生油水分离。  抗原抗体 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2023.01.05

华远阐述:避免大牛血清沉积物的好办法

  古朵阐述:避免大牛血清沉积物的好办法  大牛血清使用中的注意事项:  1、血清冻住选用逐步冻住法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),冻住过程中有必要随时轻摇,使血清受热温度均匀。  2、血清凝絮物,血清冻住后会出现少量片状或絮状物分出,这主要是因为血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白分出构成沉积物,试验证明沉积物不会影响血清本身质量。  3、热灭活本产品除注明外均未灭活。假如有必要灭活,请严峻按照56℃30分钟(水浴)处理已冻住血清。  4、常温状态下短期融化并不会影响血清质量。  避免大牛血清沉积物的发生:  1、冻住血清时,请按照所主张的逐步冻住法(-2O℃至4℃至室温),若血清冻住时改动的温度太大(如-20℃至37℃),试验显现十分简略发生沉积物。  2、冻住血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,削减沉积的发生  3、请勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,一起血清中许多较不稳定的成分也会因而遭到危害,而影响血清的质量。  4、血清的热灭活十分简略构成沉积物的增多,若非必要,可以无须做此过程。  5、若有必要做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,而且随时摇晃均匀。温度过高,时刻过久或摇晃不均匀,都会构成沉积物的增多。  血清冻住后发现有絮状沉积物出现,该怎么处理?欲去除这些絮状沉积物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g略微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤,但不主张以过滤的办法去除这些絮状沉积物,因为它可能会阻塞过滤膜。  大牛血清 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2023.01.05

您知道ELISA试剂盒组分及性能吗?

  标签:古朵生物 ELISA试剂盒 酶联免疫试剂盒      我司是国内知名的科研试剂供应商,上海古朵生物专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒,品质保证,技术严格,无效果直接退款退货,欢迎来电咨询及订购! 古朵生物ELISA试剂盒现货代测,量大从优,部分ELISA试剂盒特价销售。   ELISA试剂盒包含以下各组分:   (1)结合物及标本的稀释液;   (2)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;   (3)酶标记的抗原或抗体(结合物);   (4)酶的底物;   (5)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),ELISA试剂盒参考标准品和控制血清(定量测定中);   (6)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);   ELISA试剂盒性能:   1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。   2.灵敏度:低检测浓度小于10 pg/ml。   3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。   4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。   贮藏:2-8℃,避光防潮保存。   有效期:6个月   您知道ELISA试剂盒组分及性能吗?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。共 328 次关注     提问者:fanke001 

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2022.12.28

古朵阐述:ELISA试剂盒试验水浴保温办法与操作技巧

  古朵阐述:ELISA试剂盒试验水浴保温办法与操作技巧  古朵ELISA试剂盒的温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃等。37℃是试验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的适宜温度。在树立ELISA方法作反响动力学研究时,试验标明,两次抗原抗体反响一般在37℃经1~2小时,产品的生成可达高峰。为加快反响,可进步反响的温度,有些试验在43℃进行,但不宜选用更高的温度。但因所需时刻太长,在ELISA试剂盒中一般不予选用。  ELISA试剂盒实践进程操作技巧:  1)加样器应笔直参加标本,防止刮擦包被板底部,加样进程中防止液体外溅,血清残留在反响孔壁上。  2)加样器吸头要清洗干净,防止污染,加样次第要与说明书共同,否则可导致成果过错,试验重复性差。  3)在进行试验前应对试验的物理参数有充沛的了解,如环境温度、反响孵育温度和孵育时刻、洗刷的次数等,要先检查水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。  4)显色液量不行过多,加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色体系后要避光反响,显色液量不能过多,防止显色过强。  5)要确保加液量共同,在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量禁绝,造成显色不一致,判别过错。  古朵ELISA试剂盒试验水浴保温办法:  1、可将ELISA试板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度敏捷平衡。  2、为防止蒸腾,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,可让反响板漂浮在水面上。  3、湿盒应先放在保温箱中预温至规则的温度,特别是在气温较低的时分更应如此。  4、操作时的室温应严厉约束在规则的范围内,规范室温温度是指20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。  5、若用保温箱,应放在湿盒内,湿盒要选用传热性杰出的资料如金属等,在盒底垫湿的纱布,zui终将ELISA板放在湿纱布上。  6、室温温育时,只要平置于操作台上即可。  7、无论是水浴还是湿盒温育,反响板均不宜叠放,以确保各板的温度都能敏捷平衡。  8、应注意温育的温度和时刻应按规则力求。  9、为确保这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板一起测定。  Elisa试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

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2022.12.27

如何选择适合且质量又可靠的ELISA试剂盒呢?

  酶联免疫吸附试验技术从1970年代发展至今已近半个世纪,是一项实验室zui基本的免疫检测技术,被广泛的应用于基础研究和临床检验。那么面对市面上数以千计的试剂盒,数百家供应商,对于刚进入实验室的新手或者准备开展ELISA实验的人员,又该如何选择适合且质量又可靠的ELISA试剂盒呢?古朵小编详解如下:  1.先选定ELISA类型  ELISA技术可用于测定抗原,也可用于测定抗体。ELISA方法中有三个必要的试剂:  (1)固相的抗原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);  (2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);  (3)酶反应的底物。  一般可将ELISA分为以下几种类型,实验君先需要根据自己的待检物来确定试剂盒类型。  A、双抗体夹心法:针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相捕获抗体和酶标检测抗体。适用于测定二价或二价以上的大分子抗原如血浆中的细胞因子,不适用于测定半抗原及小分子单价抗原。同理,也有双抗原夹心法测抗体。  B、直接法:将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一抗,即可测定抗原总量。此法操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。  C、间接法:间接法是检测抗体常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)来检测与固相抗原结合的待检抗体。  D、竞争法:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。  2.根据实验物种及待检样品性质来选择ELISA  如果实验君的实验样品为人、小鼠或大鼠样品,那么要选择一个合适的试剂盒相对容易,但如果您的实验样品来源于其他物种如鸡、牛、猴等,则市面上能提供的试剂盒种类却很少。且不可轻信能提供近万种试剂盒,覆盖多物种的供应商。但如果又非要检测这些物种的指标时,zui好要对待检物(如有种属差异性)进行同源性分析以及试剂盒的种属交叉反应数据。对于样品类型而言,一般的商业化试剂盒都经过血清、血浆和细胞培养上清液的验证。在选择试剂盒时,zui好要详细阅读说明书,比如血浆样本抗凝剂的使用是否与试剂盒兼容。另外,在某些情形下样品中会存在干扰因素比如溶血血浆、高脂肪含量的样品、人抗鼠抗体(HAMA)、细胞培养上清中含胎牛血清等。因此需根据样品来选择试剂盒,必要时还要根据样本来适当优化。或在样品收集前,zui好先阅读一些可靠供应商试剂盒的说明书或直接咨询。如果您的样品为组织或细胞裂解物,则需要更谨慎的选择试剂盒。市面上大多数的商业化试剂盒没有经过多种来源组织样本的验证。这需要实验君能理解不是所有试剂盒所用的抗体对,都能特异的从一堆裂解物蛋白中特异检出您的目的蛋白,还要考虑组织样品的基质效应(Matrix Effect)等。但如果实验君要了解组织样品的制备问题,我们另起一文来总结。  3.根据样品中检测物水平来选择试剂盒  如果实验君对于样品中待检物的水平没有任何可参考的数据,zui好选择宽动力学检测范围的试剂盒。如果样品中待检物的含量很低,建议选择高灵敏度的试剂盒。为了降低基质效应,有必要用稀释液至少做2倍稀释。如果样品中待检物含量远超过试剂盒的检测范围(标曲范围),也需做适当的倍数稀释。在zui后计算结果时,需乘以相应的稀释倍数。  4.根据样本可获得性来选择试剂盒  通常而言,商业化试剂盒的样品用量都在50ul或100ul,但也有一些供应商的试剂盒对样品的用量要求可少至10ul。如果您的样品很珍贵或较难获取,则需要认真考虑试剂盒对样品用量的要求。如果样品量少,且要做多因子检测时更需谨慎。  5.细致比较试剂盒关键性技术参数  ELISA试剂盒的关键技术参数包括板内差异性、板间差异性、批间差异性、重复性、特异性及交叉反应性、回收率等。如果实验君经常开展ELISA实验,建议使用同一厂家的试剂盒,这样可尽量保证数据的重复性(当然前提是实验条件的一致性)。对于科研用的定量ELISA试剂盒,不同的生产厂家使用的抗体对、酶以及底物、生产工艺和研发实力不尽相同,自然不同厂家试剂盒测出的数据会有差异。  6.供应商资质评估  纵观外ELISA试剂盒供应商,估计至少100余家。有些供应商可提供数百种常用指标ELISA,然而有些供应商则声称可提供数千种甚至上万种指标的试剂盒,但质量参差不齐,更有滥竽充数祸害科研之辈。那如果选择供应商呢?.从同行或实验室同僚了解供应商的口碑,售前售后的处理情况。第二.查询供应商的网站详细了解相关指标,可查询这些指标是否已经开发出特异性抗体?如果查遍连抗体都还不可获取,又如何开发出ELISA试剂盒呢?第三.文献引用是王道,尤其是SCI期刊文章对供应商产品的引用。第四.了解供应商的研发历史和品牌史,很多供应商频频更换公司名或更换公司注册地,其中名堂实验君应该能悟出。不要迷信国外“品牌”,国外“品牌”不代表是知名品牌。很多打着国外旗号的公司,其实就是空壳的皮包公司,从OEM劣质产品。国外供应商也有售后不给力的时候。  7.经费预算  说了半天,还是要看课题经费的预算。没经费咋搞科研呢?公认的知名品牌一般质量可靠,文献引用多。但品牌由于进口和运输等成本较高,因此售价也较高。其实优质国产品牌也是不错的选择,因省去不少物流和报关费用,与国外进口试剂盒相比价格上有比较大的优惠,而且能提供比较灵活的包装规格,如48tests小包装,非常适合国情。ELISA品牌靠谱的还是有4到5家,这里就不做硬广告了,实验君可以上行业资讯平台或论坛等了解。当然您可以随时联系“柏君”为您排忧解难。  8.认清订购渠道  不论是还是品牌,都需要在订购前先与生产厂商详细沟通产品细节(比如酶标板是否可拆卸),了解售前售后技术服务能力等。然后咨询其订购渠道,比如直接向厂家订购或通过区或省级授权代理商经销商订购。谨防假冒产品,花了钱是小事,实验数据的可靠性、真实性是大事呀,耽误了时间延迟了毕业更是不无处诉苦!空留伤心泪。选择正规渠道,选择优质品质!早发高质量Paper!  Elisa试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

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2022.12.26

古朵教您如何正确使用生物素标记抗体及蛋白?

  标签:生物素标记抗体 古朵生物 蛋白 生物试剂      生物素是一个分子量只有244.31Da的小分子,经活化后可与蛋白、抗体等生物大分子结合,不仅可以很好地保持大分子的生物活性,而且与亲和素结合使用时具有多级放大作用,使其广泛应用于微量抗原、抗体定性、定量检测及定位观察研究。   那么如何使用生物素标记抗体或蛋白呢?下面古朵生物给大家分享一下。      工具/原料   1.10ul,50ul,200ul,1000ul可调移液器   2. 恒温箱(37℃)   3. 离心机(离心力可达到12,000×g)   4. 生物素标记试剂盒(Cata.No:EBLK0002, Elabscience)   古朵生物详解实验前准备   1.仔细阅读使用说明书。   2.计算待使用NH2-Reactive Biotin的量。   3.提前20min从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温(注:不需要用到的NH2-Reactive Biotin继续放置冰箱中)。   4.溶解NH2-Reactive Biotin:加入30ulDMF至NH2-ReactiveBiotin瓶中,静置10min,待其充分溶解,此时生物素的浓度为10mM。   操作步骤:(本操作步骤按照1mg的量进行标记)   1.取1mg待标记抗体于Filtration tube中,并加入相应体积的Labeling Buffer,使抗体的终浓度为2mg/ml,12,000 x g离心10min。(注:①Filtration tube的大体积为0.5ml②待标记抗体浓度低时,可先超滤离心一次)   2. 加入13.3ul NH2-Reactive Biotin 和适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中,使终体积为0.5ml,并轻轻吹打混匀。放入37℃恒温箱中避光温育30min。12,000 x g离心10min。   3. 加入适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中,使终体积为0.5ml,并轻轻吹打混匀,12,000 x g离心10min。   4. 操作3重复一次。   5. 加0.2ml Labeling Buffer至Filtration tube中,轻轻吹打。将滤芯倒转放置于另一个离心管中,6,000 x g离心10min。   6. 收集离心管中的溶液,即为生物素标记的抗体。   古朵教您如何正确使用生物素标记抗体及蛋白? 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.20

【古朵生物】溶解与稀释ELISA标准品方法步骤

  【古朵生物】溶解与稀释ELISA标准品方法步骤  ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay)的简称,是一种检测方法,而标准品是相对于具体的物质有具体的标准品,所以不存在说ELISA的标准品,ELISA标准曲线是结果计算的尺子,标准品是ELISA实验成功与否的关键点。  正确溶解、稀释标准品如下:  1.粉末标准品短暂离心,让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。  2.根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水,加水后轻柔涡旋震荡,室温静置溶解10-30min,让粉末完全溶解。  注意:加水后暂不用移液枪吹吸,避免蛋白未溶解,枪头带出部分蛋白,待完全溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。  3.标准品梯度稀释:  (1)标准品稀释液的选择:  若血清、血浆、组织匀浆样本,用试剂盒中的标准品稀释液,梯度稀释标准品。  若细胞上清样本,建议用细胞培养基梯度稀释标准品。  (2)耗材准备:准备8个1.5Ml离心管,写上S1-S7、空白。  (3)梯度稀释:根据说明书,每管加入等体积的标准品稀释液(培养基),吸取同体积溶解好的标准品到S1管中,吹打10次混匀,涡旋5S,从S1管中吸取同体积溶液到S2管,吹打10次混匀,涡旋5s,同法稀释S3-S7浓度。  (4)空白:标准品稀释液(培养基)作为空白即零浓度。  注意:梯度稀释标准品时,涡旋震荡混匀后可短暂离心,让到盖子、壁上的液体到管底,再开始稀释下个浓度。  溶解与稀释ELISA标准品方法步骤上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.19

人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒的操作步骤

                                人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒的操作步骤  人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人谷胱甘肽(GSH)的含量。  实验原理  试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),往预先包被人谷胱甘肽(GSH)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色,颜色的深浅和样品中的人谷胱甘肽(GSH)呈正相关,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。  古朵人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒样本处理及要求  1.血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。  2.血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。  3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎,将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录,推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨,为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融,最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。  4.细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。  操作步骤  1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。  2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。  3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。  4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。  5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。  7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。  实验结果计算  以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。  人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.16

古朵生物白细胞介素2您了解多少?

    古朵生物白细胞介素2您了解多少?  白细胞介素是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。由于最初是由白细胞产生又在白细胞间发挥作用,所以由此得名,现仍一直沿用。它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调,相互作用,共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息,激活与调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。  白介素2(IL-2)分子量为1.5万的糖蛋白,对T细胞激活及生长有作用。IL-2主要由CD4+和CD8+T细胞产生,IL-2主要以自分泌或旁分泌方式发挥效应。不同种属间,IL-2沿种系谱向上有约束性,向下无约束性。IL-2是参与免疫应答的重要细胞因子,并参与抗肿瘤效应和移植排斥反应。  白介素2(IL-2)有着非常强大的功能,对各种细胞有不同的作用,让我们一起来看看吧!  1.IL-2对T细胞的作用  IL-2是T细胞生长因子,能使T细胞在试管内长期存活,刺激T细胞进入细胞分裂周期。IL-2能增强T细胞的杀伤活性,在体外它与IL-4、IL-5和IL-6一起共同诱导细胞毒性T细胞(Tc)的产生,并使其活性大大增强,延长其生长期;在体内IL-2也能增强抗原诱导的TC活性,甚至可以辅助抗原和半抗原直接在祼鼠体内诱导产生TC¬。由IL-2诱导产生的TC输入体内后可产生明显抗肿瘤作用,但TC在体内不易存活,如同时再输入少量IL-2,则可明显延长Tc在体内的存活时间,并增强其抗肿瘤效果。IL-2并可诱导T细胞分泌IFN-γ,TNF,CSF等细胞因子。  2.IL-2对NK细胞的作用  IL-2可促进NK细胞的增殖,维持NK细胞长期生长。肿瘤病人经IL-2治疗后,血中NK细胞数量明显增加。IL-2在体内、外都能增强NK细胞活性。在体外,IL-2于短时间内就可使NK细胞活性增强。肿瘤病人经IL-2治疗后NK细胞活性变明显增强,且有累积效应,即随着IL-2剂量的增加和疗程的延长,NK细胞活性亦因之不断增强,IL-2并能矫正NK细胞活性低下状态,使之恢复正常或超过正常。白血病病人外周血单核细胞(PBMC,其中10%是NK细胞),经IL-2培养后具明显的细胞毒作用,以此输回给病人治疗白血病。IL-2还能促进NK细胞分泌IFN-γ,增加其表达IL-2R+亚基等。  3.IL-2对LAK、TIL细胞的作用  IL-2可促进LAK,TIL细胞的体外存活、扩增及活化LAK(即淋巴因子激活的杀伤细胞lymphokine activated killer cells)。LAK是淋巴细胞与IL-2接触后产生的一种具有高效率抗ZL效应的杀伤细胞,只有在IL-2的存在下LAK才能产生,亦只有在IL-2存在下,LAK才能发挥其效果。实验证明,淋巴细胞经IL-2培育后所得LAK细胞的活力,比不加IL-2培育的强100~1000倍,而且LAK只识别肿瘤抗原,对宿主正常细胞没有影响。LAK与IL-2合用,对原发性及转移性肿瘤,均有明显抗肿瘤作用。  4.IL-2对B细胞的作用  IL-2可促进B细胞表达IL-2R,促使B胞增殖和产生免疫球蛋白,并刺激巨噬细胞,提高其吞噬能力。近年发现,重组IL-2可刺激某些中枢神经细胞的生长和成熟,并作用于吗啡肽受体,产生镇痛作用。有关白细胞介素一2(IL-2)的调节免疫作用。  5.IL-2对肿瘤细胞的作用  IL-2的抗肿瘤作用除与LAK,TIL有关外,还与其诱导NO的产生有关。实验发现对LAK无效的Meth A小鼠皮肤癌,用IL-2治疗可见存活期延长,且小鼠尿中NO2;-含量较对照组高8倍;如同时应用NO诱导抑制剂L-NMMA,使尿中NO含量下降60%,同时使IL-2组的存活期大大缩短,提示IL-2诱导NO合成,是其抗肿瘤作用机制之一。  白细胞介素2上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.15

【古朵生物】活性蛋白提取试剂盒的应用

      【古朵生物】活性蛋白提取试剂盒的应用  活性蛋白提取试剂盒用于从动物组织中提取有活性的总蛋白,该试剂由一种温和的非离子型去污试剂、缓冲试剂和氯化钠等组成。采用匀浆或超声破碎时,该试剂高效提取的蛋白质可以尽可能地保持活性,可以用于1D和2D电泳、免疫共沉淀、Pull down、EMSA、报告基因分析(Luciferase、β-galactosidase、Chloramphenicol Acetyltransferase等)、蛋白质激酶分析(PKA、PKC、Tyrosine Kinase等)、酶免分析(Western Blot、ELISA、RIA)、蛋白质纯化等实验,含有的去污试剂可通过透析去除。  活性蛋白提取试剂盒由抽提试剂、蛋白酶抑制剂混合物、DTT和PMSF组成。  活性蛋白提取试剂盒特点:  整个实验过程只需要20 min左右;  可以处理20×100 mg的动物组织样品;  提取的蛋白质可以透析去除离子和去污试剂,或将缓冲液替换为所需要的合适缓冲液;  提取的活性蛋白质保持非变性状态,可以直接用于1D和2D电泳、Pull Down、EMSA、免疫共沉淀、蛋白纯化、酶活分析等实验;  可以维持报告基因酶(Luciferase、β-galactosidase、Chloramphenicol Acetyltransferase等)、蛋白质激酶(PKA、PKC、Tyrosine Kinase等)的活性。  活性蛋白提取试剂盒操作步骤:  1.将100 mg组织剪切成小块,尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织,加入适量的预冷的1X PBS于4°C,700 g(3000rpm)离心3 min,弃掉上清,重复洗涤两次。  2.向以上洗涤后的组织中加入1 mL预冷的抽提试剂(使用前向每1 mL抽提试剂中加入1μl DTT,10μl PMSF,1μl蛋白酶抑制剂),置玻璃匀浆器冰上均质30~50次至组织完全成匀质状液体无明显组织小块。  3.最大速度涡旋振荡10 sec,冰上放置20 min,期间取出振荡3~5次,再于4°C,12830g(12000 rpm)离  心10 min以沉淀组织或细胞碎片,转移上清为组织活性总蛋白部分,分装并保存于-80°C,用于下游实验。  活性蛋白提取试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.14

古朵生物:大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT的应用

  古朵生物:大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT的应用  大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)的含量。  大鼠谷胱甘肽S转移酶P试剂盒实验原理:  试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。  谷胱甘肽S-转移酶是谷胱甘肽结合反应的关键酶,催化谷胱甘肽结合反应的起始步骤,主要存在于胞液中。  大鼠谷胱甘肽S转移酶P试剂盒操作步骤:  1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。  2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;  3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。  4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。  5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。  7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.13

古朵带您了解猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒使用方法

  古朵带您了解猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒使用方法  猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒使用方法操作步骤  将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)  加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。  加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。  温育:操作同3。  洗涤:操作同5。  显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.  终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。  计算和结果判定:  试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10  临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15  阴性判定:样品OD值  阳性判定:样品OD值≥临界值(CUT OFF)者为旋毛虫(Trichinella)阳性  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.12

古朵全面解析:减少ELISA实验误差需注意的事项

  古朵全面解析:减少ELISA实验误差需注意的事项  做任何实验,都不可能完全没有误差,我们能做的就是尽zui大的努力减少实验误差,在ELISA试剂盒实验操作中,误差分有系统误差、偶然误差、过失误差,而一个小小的误差主意能够影响到实验,那么怎样才能缩小实验误差呢?古朵小编详解除了需要细心之外,还有一些需要重点  ELISA试剂盒注意事项:  ①:检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械,具有一定总结和分析问题的能力,对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。  ②:使用校对过的微量移液器,排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。  ③:仔细阅读说明书,严格按照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方,反复试验确定成立后才能改进。  ④:洗涤彻底,如若洗板不彻底,酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗涤液要新鲜,现用现配,陈旧的洗涤液会出现本底增高现象,也可能出现假阳性。  ⑤:严控反应时间,反应时间过长,酶失活;反应时间过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假阴性。  ⑥:注意试剂盒保存期,过保存期的试剂不能使用。  ⑦:评估试剂的实用性,试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定试剂符合要求后方可使用。  ⑧:严格掌握显色时间,显色时间过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性。超过显色要求时间后显色,应判为假阳性,这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色,不可报阳性,这可能是本底显色的结果。  ⑨:加样要准确、快速。如果加样不准确,酶生成物的量不能确定,直接影响显色结果。显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关,所以加样应慎重。要求在一定时间内加样完毕的实验,如果加样迟缓,便出现误差,而且试剂长时间暴露在外,尤其室温过高时,保存期会缩短甚至失效。  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.08

特级胎牛血清主要效果有哪些? 古朵新闻

                                特级胎牛血清主要效果有哪些? 古朵新闻  特级胎牛血清具备稳定性好、内du素低和较完善的检测报告,关于使用环境要求也不高,无论是医疗机构、出产研发机构或者小型试验室都可适用,所以稳定性好的特级胎牛血清遭到各行各业用户的推崇和喜欢,但胎牛血清有哪些效果很多用户并不清楚,古朵小编详述胎牛血清主要的效果有以下三方面:  1.供给营养物质  因为特级胎牛血清是从母牛体内提取出来的营养物质,其营养成分十分高,可认为细胞的成长供给各类必须的成长营养物质,可促进细胞正常成长,再加上血清可更好的结合蛋白物质,能有用的识别对微生物有利的各类维生素、脂类以及激素类,为细胞供给营养成分。  2.解du、酸碱平衡效果  特级胎牛血清在有些情况下可与蛋白质结合,结合后其络合物可与有du的热源或则金属结合在一起,然后起到解du的效果。别的特级胎牛血清还可作为酸碱缓冲液对培养基中的酸碱起到平衡的效果,不用别的独自参加其它缓冲剂。  3.按捺蛋白酶活性  因为特级胎牛血清可供给一定的按捺蛋白酶活性的物质,能够让细胞中的过剩的胰蛋白酶失去活性,然后更好的维护细胞膜、细胞壁不受损伤,起到维护细胞的效果,所以其在各类试验室、医疗试验机构使用极为广泛。  现在,服务完善的特级胎牛血清主要的效果除了能够为细胞供给必需的营养物质、对培养基进行酸碱平衡、解du以及按捺某些酶制剂的活性外,特级胎牛血清还能为细胞做别离液、做动物培养基以及作为专门的检测制剂等效果。随着胎牛血清提取技术的不断改良,特级胎牛血清效果也将越来越多。  特级胎牛血清上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.07

【古朵生物】ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤

 【古朵生物】ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤  每一盒ELISA试剂盒里面都有一份对应的说明书,而每一份说明书里都会有写样本和稀释液的稀释比例,为什么样本都需要稀释呢?今天古朵小编的文章中,将为您分析:为何ELISA实验血清样本都需要稀释?  在ELISA试剂盒实验血清为什么要稀释?有两个原因:  1)竞争抑制比较明显,应稀释竞争物;  2)以降低非特异性反应,使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。血清稀释用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低ELISA本底,当然如果你嫌麻烦我觉得用生理盐水替代PBS关系也不大。不管你是用直接竞争还是间接竞争,血清的稀释倍数肯定要事先确定,但也不用一点点,你做一个预试验即可,选择OD在1.0左右的稀释倍数,即你的竞争ELISA中阴性孔OD在1.0,这样作出来的曲线比较敏感。  ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤:  先把蛋白稀释一定的倍数,比如说10倍、20倍稀释(这样可以大体确定一个参数),将抗原进行一系列稀释包被微量反应板,再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤,再加酶结合物进行反应,经孵育洗涤后,加底物溶液显色,终止反应后分别测定O.D值,选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。  一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0,而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.06

【古朵生物】显色和比色在ELISA试剂盒实验的影响

  【古朵生物】显色和比色在ELISA试剂盒实验的影响  Elisa法得到科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。ELISA试剂盒有着准确性高、灵敏度高、特异性强等很多的优点,它在检测抗体、抗原等方面有很好的应用,深受广大用户朋友的喜爱。然而,在实验过程中,也需要注意很多问题,特别是显色、比色问题。  elisa知识要点显色和比色分析显色  显色是ELISA中的zui后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色deqing况适当缩短或延长反应时间,及时判断。  OPD(邻苯二胺)底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深,再延长反应时间,可使本底值增高。OPD底物液受光照会自行变色,显色反应应避光进行,ELISA试剂盒显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD产物用硫酸终止后,显色由橙黄色转向棕黄色。  TMB(四甲基联苯胺)受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后,约40分钟显色达,随即逐渐减弱,至2小时后即可*消退至无色。TMB的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。  比色  比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验,需先将板置于标准96孔的座架中,才可进行比色。在加底物液显色前,先将软板边缘剪净,这样,此板就可*平妥坐入座架中。  比色时应先以蒸馏水校零点,测读底物孔(未经任何反应仅加底物液的孔)和空白孔(以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔),以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点,以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度,然后进行计算。  比色结果的表达以往通用光密度(oplical density,OD),现按规定用吸光度(absorbence,A),两者含义相同。通常的表示方法是,将吸收波长写于A字母的右下角,如OPD的吸收波长为492nm,表示方法为“A492nm"或“OD492nm"。  酶标比色仪  酶标比色仪简称酶标仪,通常指于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同,各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可到0.001,准确性为±1%,重复性达0.5%。举例说,若某孔测得的A值为1.083,则该孔相对于空气的真实A值应为1.083±0.01(1.073~1.093),重复测定数次,其A值均应1.083±0.05(1.078~1.088)在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000~2.000,新型号的酶标仪上限拓宽达2.900,甚至更高。超出可测上限的A值常以“*"或“over"或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同,线性范围常小于可测范围,比如某一酶标仪的可测范围为0.000~2.900,而其线性范围仅0.000~2.000,这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下,操作时室温宜在15-30℃,使用前先预热仪器15-30分钟,测读结果更稳定。  测读A值时,要选用产物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波长。ELISA试剂盒有的酶标仪可用双波长式测读,即每孔先后测读两次,*次在zui适波长(W1),第二次在不敏感波长(W2),两次测定间不移动ELISA板的位置。例如OPD用492nm为W1,630nm为W2,zui终测得的A值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。  显色和比色在ELISA试剂盒实验的影响上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.05

ELISA试剂盒试验代测需求留意那些?

  ELISA试剂盒试验代测需求留意那些?  ELISA试剂盒试验代测需求留意那些,在科研实验中如何安全,快捷的处理样本,样本前处理是酶联免疫试验中关键的一步,稍有不慎将导致实验满盘皆输,试剂盒样本处理我司专家有办法,只要您有疑问只需来详询我司客服。  在各种试验办法中,ELISA试验代测相关于其他试验而言,比较简单易懂,关于初次做试验的教师来说,容易上手,而且很好操作,首先要处理样本,把需求测的目标的样本搜集好,然后处理好标本,比方常见的血清、血浆、安排、细胞上清等,将样本处理好后并妥善保存(样本处理办法若不明白可咨询我司销售人员)然后再挑选相对应的ELISA试剂盒,合适您试验目的测的这个目标的ELISA试剂盒,ELISA试剂盒都是一个试剂盒对应检测一个目标,不存在能够用一个试剂盒一起检测出多个目标。试剂盒分为48T和96T两种,这个得根据教师自己的需求来挑选试剂盒的标准,一般96T的能够测89个样本,48T的能够做41次样本,还有7个孔是做标准曲线分析试验数据用的。试剂盒选购好了之后就能够开始测了,ELISA试验代测必要的一种仪器-----酶标仪(如没有酶标仪,我司能够代测,只收取试剂盒的费用即可)  在ELISA试验代测的对试剂预备一般不太留意,通常的做法是,在试验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而疏忽了这种做法有可能影响后边温育时间不行的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA试验代测中试剂的预备尤为关键的是,在试验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,首要是为了在后边的温育反响步骤中,能使反响微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。其次,目前的产品ELISA试剂盒中的洗板液均需在试验室使用时对所提供的浓缩液稀释制造,因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外,当试剂盒以OPD为底物时,则底物溶液应在反响显色前暂时制造。  ELISA试验代测是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技能。酶联免疫吸附试验的标准程序,通常是把蛋白、抗体、或激素等直接或是以捕捉抗体固定在固相载体上,再参与一级检测抗体,构成一个抗原抗体的复合物。若是该抗体现已用酶符号了,即可用来直接测定抗原的量,若无,则可运用另一个酶符号的二级抗体来测定抗原的量。测定抗原量的办法是参与该酶的底质,作用后发作出现的色彩深浅和样本中的抗原量呈正比的,依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.12.02

你知道ELISA试剂盒加样问题及解决方法吗

  你知道ELISA试剂盒加样问题及解决方法吗  在ELISA试剂盒实验操作中,加样是重要的一项步骤,这一步骤在整个实验中都有着很大的影响。今天上海研域生物针对这一问题作出了一些整理,希望可以给大家带来帮助。  一、加样问题的可能原因  1.血清或血浆标本分离不好即进行加样;  2.手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);  3.加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。  二、解决方法  1.标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。  2.加样后及时放入孵箱。  3.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。  4.如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。  5.标本较多时,请分批操作。  你知道ELISA试剂盒加样问题及解决方法吗上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

新品

2022.12.01

古朵多粘菌素E硫酸盐现货促销中

古朵多粘菌素E硫酸盐现货促销中   名称:多粘菌素E硫酸盐 CAS号:1264-72-8 货号:HY-K0061 规格 1g ,现货 单价:30元   多粘菌素E硫酸盐   英文名称:Colistin sulfate salt ;Polymyxin E   其他名称:硫酸粘杆菌素;多粘菌素E;硫酸粘菌素;粘杆菌素B;黏菌素硫酸盐   CAS号:1264-72-8   分子式:C53H102N16O17S   分子量:1267.54   PH:4.0~6.0   比旋光度:-63~-73º   干燥失重:≤3.5%   性状:白色至类白色或微黄色粉末;无臭或几乎无臭。有引湿性。在水中易溶,在乙醇中微溶,在丙酮、或中几乎不溶   用途:生化研究。对革兰氏阴性杆菌具有杀菌作用。   保存:2~8℃,常温运输   有效期:2年。   多粘菌素E硫酸盐 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

应用实例

2022.11.30

古朵试剂盒:ELISA实验标本该如何处理?

  古朵试剂盒:ELISA实验标本该如何处理?  ELISA试剂盒标本处理复杂多样,一不小心没处理好可能会导致实验的数据偏差。那到底怎么处理才算是比较合理的呢?恒远生物为您总结一份ELISA实验标本处理攻略,请收好啦!  一、血清的采集、处理和保存  1.真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中。  2.采血后室温静置1小时。  3.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。  4.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。  5.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。此外还应避免细菌污染,因为菌体中可能含有含有内源性过氧化物酶,也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜时检测。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。  二、血浆的采集、处理和保存  1.真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中。  2.按1:9加入抗凝剂(EDTA、草酸钠、肝素),30分钟内于冰上分离血浆以减少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集)。  3.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心5 min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。  4.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。  5.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。请注意指标说明书上对于抗凝血剂是否有特殊要求,建议使用EDTA。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。注意事项:制备血浆标本需借助于抗凝剂EDTA,抗凝的标本因纤维蛋白原干扰而造成假阳性。  三、尿液的采集、处理和保存  1.采集尿液样本500ul加入无菌试管中。  2.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10 min,将离心好的样本留上清,弃下面沉淀。  3.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。  4.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。  四、细胞上清液的采集、处理和保存  1.采集细胞培养上清液500ul,加入无菌试管中。  2.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10 min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。  3、取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。  4.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。  五、各类组织匀浆的采集、处理和保存  1.采集组织,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,剔除附属的结缔组织,称取组织块。  2.用移液管量取0.1M PBS或者用0.86%冷生理盐水,匀浆介质或生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍,用眼科小剪尽快剪碎组织块(天然时操作要在冰水浴中进行,将盛有组织的小烧杯放入冰水中)。  3.匀浆的方式有多种:  a)手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,使组织匀浆化。  b)机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000r/min上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。  4.将制备好的10%匀浆用离心机4℃,3000rpm离心15min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。  5.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。  6.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。  古朵试剂盒:ELISA实验标本该如何处理?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.11.29

古朵生物兔抗FTL多克隆抗体您了解嘛?

  古朵生物兔抗FTL多克隆抗体您了解嘛?  英文名Anti-FTL rabbit polyclonal antibody  别名ferritin,light polypeptide;LFTD;NBIA3  相关类别一抗储存冷冻(-20℃)  宿主Rabbit反应种属Human  标记物Unconjugate克隆类型rabbit polyclonal  抗原FTL  兔抗FTL多克隆抗体包装  25 ul  100 ul  200 ul  Background:This gene encodes the light subunit of the ferritin protein.Ferritin is the major intracellular iron storage protein in prokaryotes and eukaryotes.It is composed of 24 subunits of the heavy and light ferritin chains.Variation in ferritin subunit composition may affect the rates of iron uptake and release in different tissues.A major function of ferritin is the storage of iron in a soluble and nontoxic state.Defects in this light chain ferritin gene are associated with several neurodegenerative diseases and hyperferritinemia-cataract syndrome.This gene has multiple pseudogenes.  Applications:ELISA,WB,IHC  Name of antibody:FTL  Immunogen:Fusion protein of human FTL  Full name:ferritin light chain  Synonyms:LFTD;NBIA3  SwissProt:P02792  ELISA Recommended dilution:5000-10000  IHC positive control:Human colorectal cancer  IHC Recommend dilution:50-200  WB Predicted band size:20 kDa  WB Positive control:HepG2 and A549 cell lysates  WB Recommended dilution:500-2000  兔抗FTL多克隆抗体上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.11.28

趋化因子配体2(CCL2)ELISA检测试剂盒技术资料

  趋化因子配体2(CCL2)ELISA检测试剂盒技术资料  【产品名称】:趋化因子配体2(CCL2)ELISA检测试剂盒  【产品用途】:被测样品定性定量分析  【产品规格】:96T/48T(两种规格)  【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)  【保存条件】:2-8℃  【产品性状】:液体盒装  【产品价格】:(含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)  【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退  【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等  趋化因子配体2(CCL2)ELISA检测试剂盒操作步骤:  1,试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。  2,实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。  3,不用的其它试剂应包装好或盖好。  4,使用一次性的吸头以免交叉污染,避免使用带金属部分的加样器。  5,使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。  6,洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。  7,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。  8,严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主。  趋化因子配体2(CCL2)ELISA检测试剂盒使用注意事项:  1.检测前,检查各种仪器,打开酶标仪,稳定20分钟左右。  2.检测样本要澄清,不能含杂物,否则会直接影响结果。  3.实验开始前要将试剂盒取出,室温放置30-40分钟,使各种试剂都恢复到室温,以使检测结果更为稳定。  4.尽量做双标准实验,这样可以保证数据的准确性。  5.底物具有毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,要避免接触。  6.实验中,要使底物避光保存,酶标板均可拆卸,多余的部分应密封好,低温保存。  古朵生物常见指标:  常见ELISA试剂盒系列  IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等  大鼠常见ELISA试剂盒系列  大鼠:TNF-α、IL-1β、IL-7、IL-32、IL-21、IL-27、IL-23、IFN-γ、TGF-α、TGF-β1等  小鼠常见ELISA试剂盒系列  小鼠:IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-13、IL-10、IL-11、IL-17、TNF-α、TNF-β、VEGF、TGF-β1等  另有兔、猪、猴、鸡、鸭、羊、植物等多种种属ELISA试剂盒,所有试剂盒经过充分验证,保证有效且重复性佳。  趋化因子配体2(CCL2)ELISA检测试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.11.25

辣根过氧化物酶稳定剂(HRP STABILIZER)古朵

  辣根过氧化物酶稳定剂(HRP STABILIZER)古朵  HRP稳定剂对HRP标记的抗原或抗体有很强的保护作用,可以延长液体状态的HRP标记物的有效期。  规格:  本产品包装规格为10ml、50ml、100ml、250ml、500ml  运输、储存和有效期  常温运输(勿超过30°C),2-8°C储存,在有效期内使用。正常储存条件下自生产之日起有效期2年。  使用注意事项:  HRP稳定剂用于ELISA、WB、免疫组化以及所有应用HRP标记的实验,用于稀释HRP标记物。  本产品原浓度使用,稀释可能会降低产品的效能。  稳定剂中含有0.05%Tween 20。  本产品经过过滤除菌,并添加0.05%ProClin300作为防腐剂,如若进行分装,应使用洁净的容器,必要时可补充添加防腐剂(避免使用叠氮钠)。减少反复开盖次数或分装使用可有效避免细菌污染。  本品中不含血清蛋白成分,用户可根据需要另加BSA或其它蛋白质而不影响稳定剂活性。  产品效能:  100ng/ml HRP标记的羊抗鼠37°C孵育2周可以保持90%以上的活性,4°C贮存1年以上仍能保持良好的抗体和酶活性,较许多市售同类产品稳定HRP效能更强。  辣根过氧化物酶稳定剂 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.11.24

牛血清蛋白的法以及用途@古朵资讯

  牛血清蛋白的法以及用途@古朵资讯  牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别,它不是一定的,而是多聚物的,有的地方测试  牛血清白蛋白分子式数据为70 000,这一数据是在做PCR的时候使用的数据。  牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml),分子量68kD,等电点4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。  一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以铁为基本原料。  用途  1、特纯级牛血清蛋白  用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂,生化试验等。  电场対超感牛血清白蛋白截留率的影响  性状:淡黄色干燥粉末  2、无脂肪酸牛血清蛋白  用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂,尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。  性状:淡黄色干燥粉末  3、无蛋白酶牛血清蛋白  用途:用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂,尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。  性状:淡黄色干燥粉末  4、细胞培养级牛血清蛋白  用途:无血清培养基的蛋白添加剂,供细胞培养使用。  性状:淡黄色干燥粉末白蛋白  测定  标准曲线  一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。  测定方法  1.凯氏定氮法  2.双缩脲法  3.Folin-酚试剂法  4.紫外吸收法  5.考马斯亮蓝法  试剂  1.考马斯亮蓝试剂:  考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85%H3PO4,用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。zui终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。  2.标准蛋白质溶液:  纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。  器材  1.722S型分光光度计使用及原理。  2.移液管使用。  牛血清白蛋白制作步骤  试管编号0 1 2 3 4 5 6  100ug/ml标准蛋白(ml)0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6  0.15mol/L NaCl(ml)1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4  考马斯亮蓝试剂(ml)5 5 5 5 5 5 5  摇匀,1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色  3、以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。  (1)、利用标准曲线查出回归方程。  (2)、用公式计算回归方程。  (3)、或用origin作图,测出回归线性方程。即A595nm=a×X()+6  一般相关系数应过0.999以上,至少2个9以上。  (4)、绘图时近两使点在一条直线上,在直线上的点应该在直线两侧。  含量的测定  样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内),依照操作步骤1操作,测出样品的A595nm,然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。  一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间,所以上述样品如果A595nm值太大,可以稀释后再测A595nm值,然后再计算。  牛血清白蛋白操作注意事项  1.玻璃仪器要洗涤干净。  2.取量要准确。  3.玻璃仪器要干燥,避免温度变化。  4.对照:用被测物质以外的物质作空白对照  牛血清蛋白的测定方法以及用途 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.11.23

古朵阐述:新生牛血清蛋白检测指标

  古朵阐述:新生牛血清蛋白检测指标  新生牛血清(Newborn Calf Serum)是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。经大规模混合后除菌过滤制成成品,主要用于动物细胞培养,是医药生物技术产品的重要原材料之一,其质量好坏直接影响细胞生长情况。  总蛋白含量是新生牛血清需要检查的指标。它属于化学成分的初步分析。有人统计过国产新生牛血清的蛋白含量1,在比较各产区各年份后,发现其含量在3.7%~4.4%之间。进口新生牛血清并不与之完全一致。因为国内的血清常采自奶牛,而国外的血清常采自肉牛。蛋白质是新生牛血清的主要成分,在细胞培养中起着维持渗透压、pH值缓冲、物质运输和提供营养、促进细胞粘附等重要作用。在胎牛血清中,其总蛋白含量要更低。  血红蛋白含量也是新生牛血清一项重要检测指标。它是在血清运输和加工过程中细胞裂解释放到血清中的。之所以检测主要是由于牛血清中血红蛋白具有氧化性,其含量过高会引起羧基的产生和脂质过氧化反应,从而导致生产细胞受损,也会增加下游纯化处理的难度,给药品质量带来安全隐患2。有报道血红蛋白具有神经毒性。  使用时常见问题及解决方法:  一、保存血清-好的方法?  血清应保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。  二、如何解冻血清才不会使产品质量受损?  将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。  三、如何避免沉淀物的产生?  1.解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。  2.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生  3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。  4.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。  5.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。  四、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?  欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。  新生牛血清蛋白检测指标有哪些?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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2022.11.23

古朵带您了解质粒提取工作原理

  古朵带您了解质粒提取工作原理  根据不同的应用需要,质粒提取服务分为两个等级:  普通质粒提取 古朵生物  根据您的需要,可一次性提取10-500μg的质粒。提取后的质粒基本不含蛋白质、基因组DNA及Total RNA污染,带型清晰标准,可满足PCR扩增、测序、限制酶酶切、转化等常规实验的需要;  无内毒素质粒提取  革兰氏阴性细菌由于自溶或其他原因被破坏而从其细胞壁上释放出的毒性脂多糖称内毒素,它是影响细胞转染效率的重要因素,无内毒素质粒是获得高质量转染实验所必备的。  客户需知  1.如果您提供的样品为质粒,请保证质粒的量≥1μg,以满足琼脂糖凝胶电泳检测及转化需要;如果您提供甘油或穿刺保存菌种,请确保菌  体活力较高,或将重新活化后的菌种寄给我们。  2.我们首先对您提供的样品进行小量培养提取预实验,以鉴定质粒的正确性(与您提供的背景资料相符)及拷贝数(2ml培养提取量小于  1.5μg为低拷)。  3.如果质粒为非氨卞青霉素、卡那霉素和氯霉素抗性时,请您提供抗生素及抗生素工作浓度。  4.收费标准是针对高拷贝质粒制定的,低拷贝质粒请询价。  5.如果需要进行PCR或测序检测,请提供PCR引物或测序引物,或您提供引物序列,由本公司合成。引物合成、测序等费用,需额外收取。  6.进行无内毒素质粒提取后我们通常不进行内毒素含量检测。由于提取质粒的所有步骤均按照试剂盒的标准流程进行,因此提取的质粒内毒  素含量小于100 EU/mg。  订购信息  项目名称内容服务周期  普通质粒提取提取量10μg、50μg、100μg  无内毒素质粒提取提取量100μg、200μg  备注:以上价格是针对高拷贝质粒,低拷贝和较大质粒的提取请询价。以上实验周期是针对正常实验样品制定的,样品特殊或样品多时除外。  客户提供  提供样品  质粒:要求最低保证量≥1μg,如果质粒为非氨苄青霉素、卡那霉素和氯霉素抗性时,请提供抗生素及抗生素工作浓度。如需要进行PCR或测序检测,请提供PCR引物或测序引物。  菌液:请确保菌体活力较高,或将重新活化后的菌种寄给我们。

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2022.11.22

大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒技术原理

    大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒技术原理  英文名Rat IL-6(Interleukin 6)ELISA Kit  别名IL6;BSF2;HGF;HSF;IFNB2;CDF  产品描述  应用:用于大鼠血清、血浆或其他相关生物液体中白介素6的测定。  For the determination of Rat IL-6(Interleukin 6)concentrations in serum,plasma and other related biological fluids.  大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒技术规格  工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术(ELISA)。测定样品中大鼠白介素6水平。向预先包被了抗大鼠白介素6抗体的酶标孔中,加入标准品和样本,温育后,加入生物素标记的抗白介素6抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后,在450 nm处测定反应孔样品吸光度(OD)值,样本中的大鼠白介素6浓度与OD值成正比,通过绘制标准曲线计算出样本中大鼠白介素6的浓度。  Purpose This assay employs the Sandwich enzyme immunoassay technique.Determine the level of Rat IL-6(Interleukin 6)in the sample.Add standard and sample to the microplate that have been pre-coated with Anti-Rat IL-6(Interleukin 6)antibody.After incubation,add Biotin-conjugated anti-Rat IL-6(Interleukin 6)antibody.It is then combined with HRP-conjugated streptavidin to form an immune complex,then incubated and washed to remove unbound enzyme,and then added to the chromogenic substrate TMB to produce a blue color,and converted to the final yellow under the action of acid.Finally,the absorbance(OD)value was measured at 450 nm.The concentration of Rat IL-6(Interleukin 6)in the sample was proportional to the OD value.The concentration of Rat IL-6(Interleukin 6)in the sample can be calculated by drawing a standard curve.  大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒古朵生物  灵敏度7.5 pg/mL  Sensitivity 7.5 pg/mL  检测范围12.5-800 pg/mL  Examination range 12.5-800 pg/mL  特异性可检测样本中的大鼠白介素6,且与其类似物无明显交叉反应。  Specificity This kit recognizes Rat IL-6(Interleukin 6)in samples.No significant cross-reactivity or interference between Rat IL-6(Interleukin 6)and analogues was observed.  重复性三种不同浓度的样本在同一块板子上分别检测20次,以及在不同的板子上分别检测20次,板内和板间变异系数均小于10%。  Repeatability Three different concentrations of samples were detected 20 times on the same board and 20 times on different boards.Within the plate or between the plates,the coefficient of variation is  回收率分别往稀释不同倍数的5个样本中加入已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。  Recovery A known concentration of the target protein was added to 5 samples which were diluted to different multiples,and a recovery experiment was performed to obtain a recovery range and an average recovery rate.

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2022.11.22

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