牛血清蛋白的法以及用途@古朵资讯

　　牛血清蛋白的法以及用途@古朵资讯

　　牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别，它不是一定的，而是多聚物的，有的地方测试

　　牛血清白蛋白分子式数据为70 000，这一数据是在做PCR的时候使用的数据。

　　牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等电点4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。

　　一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以铁为基本原料。

　　用途

　　1、特纯级牛血清蛋白

　　用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂，生化试验等。

　　电场対超感牛血清白蛋白截留率的影响

　　性状：淡黄色干燥粉末

　　2、无脂肪酸牛血清蛋白

　　用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。

　　性状：淡黄色干燥粉末

　　3、无蛋白酶牛血清蛋白

　　用途：用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。

　　性状：淡黄色干燥粉末

　　4、细胞培养级牛血清蛋白

　　用途：无血清培养基的蛋白添加剂，供细胞培养使用。

　　性状：淡黄色干燥粉末白蛋白

　　测定

　　标准曲线

　　一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。

　　测定方法

　　1.凯氏定氮法

　　2.双缩脲法

　　3.Folin-酚试剂法

　　4.紫外吸收法

　　5.考马斯亮蓝法

　　试剂

　　1.考马斯亮蓝试剂：

　　考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85%H3PO4，用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。zui终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。

　　2.标准蛋白质溶液：

　　纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。

　　器材

　　1.722S型分光光度计使用及原理。

　　2.移液管使用。

　　牛血清白蛋白制作步骤

　　试管编号0 1 2 3 4 5 6

　　100ug/ml标准蛋白（ml）0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

　　0.15mol/L NaCl（ml）1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4

　　考马斯亮蓝试剂（ml）5 5 5 5 5 5 5

　　摇匀，1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色

　　3、以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上绘制标准曲线。

　　（1）、利用标准曲线查出回归方程。

　　（2）、用公式计算回归方程。

　　（3）、或用origin作图，测出回归线性方程。即A595nm=a×X()+6

　　一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。

　　(4）、绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。

　　含量的测定

　　样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测范围内），依照操作步骤1操作，测出样品的A595nm，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。

　　一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A595nm值太大，可以稀释后再测A595nm值，然后再计算。

　　牛血清白蛋白操作注意事项

　　1.玻璃仪器要洗涤干净。

　　2.取量要准确。

　　3.玻璃仪器要干燥，避免温度变化。

　　4.对照：用被测物质以外的物质作空白对照

　　牛血清蛋白的测定方法以及用途 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨；牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。