古朵生物:大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT的应用
古朵生物
2022/12/13 18:26
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古朵生物:大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT的应用
大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)的含量。
大鼠谷胱甘肽S转移酶P试剂盒实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
谷胱甘肽S-转移酶是谷胱甘肽结合反应的关键酶,催化谷胱甘肽结合反应的起始步骤,主要存在于胞液中。
大鼠谷胱甘肽S转移酶P试剂盒操作步骤:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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