【古朵生物】ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤

　【古朵生物】ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤

　　每一盒ELISA试剂盒里面都有一份对应的说明书，而每一份说明书里都会有写样本和稀释液的稀释比例，为什么样本都需要稀释呢?今天古朵小编的文章中，将为您分析：为何ELISA实验血清样本都需要稀释?

　　在ELISA试剂盒实验血清为什么要稀释？有两个原因：

　　1）竞争抑制比较明显，应稀释竞争物；

　　2）以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。血清稀释用普通的PBS即可，可加1％的BSA，能有效降低ELISA本底，当然如果你嫌麻烦我觉得用生理盐水替代PBS关系也不大。不管你是用直接竞争还是间接竞争，血清的稀释倍数肯定要事先确定，但也不用一点点，你做一个预试验即可，选择OD在1.0左右的稀释倍数，即你的竞争ELISA中阴性孔OD在1.0，这样作出来的曲线比较敏感。

　　ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤：

　　先把蛋白稀释一定的倍数，比如说10倍、20倍稀释（这样可以大体确定一个参数），将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤，再加酶结合物进行反应，经孵育洗涤后，加底物溶液显色，终止反应后分别测定O.D值，选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。

　　一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0，而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。

　　ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨；牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。