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食用油中的真菌毒素的高效自动化检测方案

2021/08/06 22:17

阅读:184

分享:
应用领域:
食品/农产品
发布时间:
2021/08/06
检测样品:
食用植物油
检测项目:
真菌毒素
浏览次数:
184
下载次数:
参考标准:

方案摘要:

哲斯泰GERSTEL的自动化解决方案可以高效准确的自动提取食用油中的霉菌毒素结合LC-MS/MS分析;可重复性高,平均RSD为 4.32%;四种黄曲霉毒素的平均回收率为101%;线性高,R2 大于 0.999

产品配置单:

分析软件

GERSTEL LabWorks 平台

型号: MPS Robotic

产地: 德国

品牌: GERSTEL

面议

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方案详情:

nimg.ws.126.net.jpg



黄曲霉毒素



黄曲霉毒素(AFT)是黄曲霉和寄生曲霉等某些菌株产生的双呋喃环类毒素,属于真菌毒素。其衍生物有约20种,分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等。其中以B1的毒性最大,致癌性最强。1993年,黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)癌症研究机构划定为一类天然存在的致癌物,是毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素主要污染粮油及其制品,各种植物性与动物性食品也能被污染。

世界各地都对食品和动物饲料中的霉菌毒素水平进行了规定,因此人们对快速,灵敏和选择性的分析方法产生了极大的兴趣。但是困难在于,存在大量粘性油基质的情况下确定痕量水平(PPb水平)的霉菌毒素浓度是一项艰巨的任务。分析结果的准确性和精确度取决于用于从复杂食品基质中分离霉菌毒素的提取和净化方法,还取决于准确转移粘性液体的量。


哲斯泰自动化解决方案



哲斯泰有好方法:使用自动化液液萃取从食用油样品中提取霉菌毒素,然后使用LC-MS/MS来检测。以下示意图就是我们的整体解决方案。应用文献可以点击原文阅读来获取。

image.png

哲斯泰自动化提取食用油中霉菌毒素的样品前处理平台。关键模块:快速振荡机、多位真空蒸发站、天平、离心机、孵育搅拌器、2米双头样品前处理平台。


image.png

分析设备:配备Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(3.0 x 50 mm,2.7μm)的 Agilent 1260 HPLC与配有喷射流电喷雾源的Agilent Ultivo三重四极杆质谱仪联用。

HPLC是近几年发展起来的检测黄曲霉毒素的方法,主要是用荧光检测器检测。黄曲霉毒素经柱后电化学衍生化后,能发射特征性荧光,被荧光检测器捕获后而得到检测。




自动化流程

将食用油样品放入10 mL小瓶中,然后将小瓶放在MPS上(唯一手动步骤)

  1. 将小瓶移至60°C的培养箱中10分钟

  2. 使用加热针(在65°C下)将1.5 mL食用油样品转移到一个空的10 mL小瓶中

  3. 添加7.5 mL(95:5)乙腈:甲酸(v / v)

  4. 搅拌10分钟 (2000 rpm)

  5. 离心5分钟 (2000 g)

  6. 将4 mL上清液转移到干净的空10 mL小瓶中

  7. 添加4 mL己烷

  8. 搅拌10分钟(2000 rpm)

  9. 离心5分钟(2000 g)

  10. 将2.5 mL的下层样品转移到一个空的,圆底的4 mL样品瓶中

  11. 将提取物在45°C蒸发至干

  12. 添加500μL(1:1)甲醇:水重构。

  13. 将重构的提取物注入LC(或可选地通过0.2μm过滤器进行注入)。




自动化分析结果



AFLAT.png

为了验证自动化结果的准确性,我们使用四种黄曲霉毒素标样B1、B2、G1、G2来验证。以下是四种目标化合物的质谱分析的采集参数。

image.png

自动化方法的线性非常好,黄曲霉毒素的校正曲线的R2 大于0.999,下图为B1的标准曲线。

image.png

下图为添加了10 ng/mL (Aflatoxins B1, G1) 和2.5 ng/mL (Aflatoxins B2, G2)的亚麻籽油的色谱图,峰形好并且信噪比理想。

image.png

在四种食用油的样品中,四种黄曲霉毒素的平均加标回收率为89.7%、101%、91.5% 和 122%。

image.png

自动化的可重复性高,4次重复检测的结果RSD % (%CV)小于6.90 %。

image.png



哲斯泰的解决方案总结

  • 高效准确的自动提取食用油中的霉菌毒素结合LC-MS/MS分析

  • 可重复性高,平均RSD为 4.32% 

  • 四种黄曲霉毒素的平均回收率为101%

  • 线性高,R2 大于 0.999




黄曲霉毒素的最高允许含量:

联合国世界卫生组织(WHO)和粮农组织(FAO)1975年规定食品中Aflatoxin B1的最高允许含量为15 µg/kg。欧洲法规的最高允许含量:Aflatoxin B1: 8.0 µg/kg (花生), 0.1 µg/kg (婴儿食品); Aflatoxins B1, B2, G1 and G2总量: 15 µg/kg (花生), 4.0 µg/kg (粮食)


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