大家看到ELISA试剂盒可能很多人会觉得陌生，这个是什么？ELISA就是酶联免疫吸附试验，所以ELISA试剂盒其实就是酶联免疫试剂盒。该技术是目前在生物或是医学检测中应用最为广泛的技术，其基本的方法就是将已知的抗原或是抗体放在载体上，然后用酶去标记它，带到反应后就可以根据被酶标记过的反应来确定检测结果。　　而酶标仪是专门用于酶联免疫检测的仪器，主要是一个比色计。用于抗原或是抗体在反应后对比分析。酶标仪的实质是一个光电比色计，其原理和一般的光电比色计相当。光源灯发出的光波经过滤光片变成单束光后，进入待测样本胡总。检测器再根据不同的强弱光信号将其转换成对应的电信号，最终在显示器上显示出结果。而有些酶标仪是手工移动微孔板的，这种酶标仪更加小巧，结构也简单许多。　　微孔板其实就是事先经过处理的用于放置待检样本的透明塑料板，板上有大小排列均匀的小孔，而在其孔内被放着相应的抗体或是抗原，用于试验。

试剂操作准备不当可能影响酶联免疫吸附测定ELISA结果。在实验室，对试剂准备一般不太注意，通常的做法是，在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此，在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是，在实验开始前，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20min以上后，再进行测定，以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。其次，目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制，因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外，当试剂盒以OPD为底物时，则底物溶液应在反应显色前临时配制。注意事项：1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。3. 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。7. 底物请避光保存。8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

现在，小鼠ELISA试剂盒用一个70%肝切除的肝脏再生小鼠模型所进行的实验，显示了内皮细胞在切除手术后维持肝脏再生的一个分子通道。在所定义的肝脏内皮细胞的一个亚组中VEGFR2的激发，导致内皮特定转录因子Id1的上调，这种上调反过来又诱导Wnt2和肝细胞生长因子（HGF）的分泌，小鼠ELISA试剂盒它又触发肝细胞的增殖。越来越多的证据表明，内皮细胞并不简单是提供氧气和营养物的被动通道。例如，在胚胎生成过程中，它们在这表明，来自促进肝再生的脉管系统的诱导性信号，小鼠ELISA试剂盒有可能被用来在这些手术之后启动和加速肝脏恢复循环系统形成之前诱导器官生成。异质性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP G ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP E ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP D ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP C ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP A3 ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP A2/B1 ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP A1 ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP A0 ELISA Kit异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)ELISA试剂盒 ，英文名： hnRNP/RA33 ELISA Kit异质核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)ELISA试剂盒 ，英文名： SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1 ELISA Kit异锁链素(IDES)ELISA试剂盒 ，英文名： IDES ELISA Kit异柠檬酸脱氢酶(ICD)ELISA试剂盒 ，英文名： ICD ELISA Kit异常凝血酶原(APT)ELISA试剂盒 ，英文名： APT ELISA Kit异丙肾上腺素(iso-Hyd)ELISA试剂盒 ，英文名： iso-Hyd ELISA Kit乙酰乙酸(ACAC)ELISA试剂盒 ，英文名： ACAC ELISA Kit乙酰肝素酶(HPA)ELISA试剂盒 ，英文名： HPA ELISA Kit乙酰辅酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA试剂盒 ，英文名： ACC ELISA Kit乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒 ，英文名： AChE ELISA Kit乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 ，英文名： AChRab ELISA Kit乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒 ，英文名： ACH ELISA Kit乙醛脱氢酶18家族成员A1(ALDH18A1)ELISA试剂盒 ，英文名： ALDH18A1 ELISA Kit乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒 ，英文名： ALDH ELISA Kit乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)ELISA试剂盒 ，英文名： HBV-LP ELISA Kit乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒 ，英文名： ADH ELISA Kit乙胺碘呋酮(AD)ELISA试剂盒 ，英文名： AD ELISA Kit胰脂肪酶(PL)ELISA试剂盒 ，英文名： PL ELISA Kit胰抑制素(Pancreastatin)ELISA试剂盒 ，英文名： Pancreastatin ELISA Kit胰激肽原酶(PK)ELISA试剂盒 ，英文名： PK ELISA Kit胰高血糖素样肽2受体(GLP2R)ELISA试剂盒 ，英文名： GLP2R ELISA Kit胰高血糖素样肽2(GLP2)ELISA试剂盒 ，英文名： GLP2 ELISA Kit胰高血糖素样肽1受体(GLP1R)ELISA试剂盒 ，英文名： GLP1R ELISA Kit胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒 ，英文名： GLP-1 ELISA Kit胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒 ，英文名： GC ELISA Kit胰多肽(PP)ELISA试剂盒 ，英文名： PP ELISA Kit胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒 ，英文名： Amylin ELISA Kit胰淀粉酶(PAMY)ELISA试剂盒 ，英文名： PAMY ELISA Kit胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)ELISA试剂盒 ，英文名： IA-2A ELISA Kit胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒 ，英文名： ICA ELISA Kit胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒 ，英文名： IAA ELISA Kit胰岛素原(PI)ELISA试剂盒 ，英文名： PI ELISA Kit胰岛素样因子3(INSL3)ELISA试剂盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit

    研究的资深作者、生物化学和发育生物学教授Philip Beachy博士说：“我们已经知道，在癌症发展的一个中间阶段，一种癌症干细胞和它的后代细胞可以快速并完全取代整个膀胱粘膜。所有这些细胞一路经历数个步骤变成了一种侵袭性肿瘤。因此，当用手术成功切除浸润性癌症时，这一遭到破坏的粘膜仍然存在，并有极高的进展概率。”    尽管这些癌症干细胞以及它们在膀胱粘膜形成的癌前病变普遍表达一种重要的信号蛋白sonic hedgehog，随后形成的浸润性癌症癌细胞却一律不表达sonic hedgehog——这一开关似乎对于侵袭和转移至关重要。这或许可以解释以往人类膀胱癌细胞起源研究某些令人困惑的方面。它也指出了可被治疗靶向的、癌症进化中的一个薄弱环节。    论文的共同作者、泌尿科助理教授Michael Hsieh博士说：“就治疗和诊断方法而言这有可能改变游戏的规则。到现在为止，还不清楚膀胱癌是膀胱粘膜许多细胞癌性突变的结果，或是持续接触尿液中排泄的毒素所致，或是将它转而归因于一个细胞或一种细胞类型的缺陷。如果我们能够更好地了解膀胱癌的发生和发展机制，我们或许能够靶向这种癌症干细胞，或是找到一些分子标记物实现较早期诊断及疾病监测。”    膀胱癌分别是男性和女性的第四位和第九位常见癌症。抽烟是一个重要的风险因子。这一疾病可分为两种主要类型：一种侵入到膀胱周围的肌肉并转移至其他的器官，另一种则局限于膀胱粘膜。不同于更容易治疗的非浸润性癌症，占70%膀胱癌病例的浸润性形式无法治愈。浸润性膀胱癌难于治疗且费用昂贵，高复发可能使得治疗后需接受持续的监测。    在第一种情况下，他们看到了一些令人吃惊的结果：在BBN暴露几个月内，几乎整个膀胱粘膜都标记上了绿色荧光标记物，表明这些细胞是由表达sonic-hedgehog的基底干细胞所生成。当移植到其他小鼠体内时，这些标记细胞能够生成膀胱癌，但不表达sonic hedgehog的细胞则没有生成膀胱癌。    在第二种情况下，在选择性杀死干细胞的动物体内没有肿瘤生长。Shin说：“现在我们获得了两项证据表明，膀胱干细胞单独导致了肿瘤发生。当我们标记这些膀胱干细胞时，这些肿瘤也被打上标记。当我们除去这些干细胞时，BBN处理后没有肿瘤形成。”

    星形细胞瘤和少突神经胶质瘤是神经胶质瘤的两种亚型。这些无法治愈的脑肿瘤都是起源于中枢神经系统的一类支持细胞——胶质细胞。低级别的神经胶质瘤生长相对缓慢，以一种弥漫的方式扩散至整个大脑，很难通过手术完全清除。在许多情况下，化疗和放疗的疗效非常有限。神经胶质瘤可发展为极具侵袭性的胶质母细胞瘤。    低级别的神经胶质瘤具有一个共同的特点：超过70%的病例肿瘤细胞中显示相同的基因突变。这一相同的DNA“错误”导致了异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)中发生特异的单氨基酸置换。因此，大多数的癌细胞没有遵循蛋白质的原构建计划；在分子序列的第132位氨基酸位置，它们用组氨酸替代了精氨酸。    德国癌症研究中心的神经肿瘤学家Michael Platten 教授说：“这一频发且高度特异性的突变立即引起了我们这些免疫学家的注意：在癌细胞中，氨基酸置换给蛋白质增添了一些能够被机体自身免疫细胞所识别的新特性。”    没有其他的肿瘤类型以这样的频率显示相同的突变。利用德国癌症研究中心、海德堡大学附属医院神经病理学家Andreas von Deimling教授开发的一种高度特异性的抗体就可以可靠地检测到这一突变蛋白。这种形式的IDH1存在于所有肿瘤细胞的表面，且完全为肿瘤所特有。“这表明我们或许能够利用一种疫苗使患者的免疫系统警惕突变IDH1，在不损伤健康细胞的情况下对抗这一肿瘤，”Platten解释道。    通过与来自海德堡大学医院、美因兹大学、图宾根大学等机构的医生和科学家合作，Platten和同事们现在朝着开发出特异性靶向这种肿瘤突变的疫苗迈出了成功的第一步。研究人员利用单个的氨基酸构建出了具有这种特征性突变的人造IDH1片段。这一版本的肽包含有15个氨基酸，与肿瘤细胞表面一种递呈分子精确匹配。这至关重要，因为免疫细胞只对细胞表面“MHC分子”递呈的靶标做出反应。如果没有这样相匹配的递呈，机体将不会启动免疫反应。    为了得出疫苗接种试验人类免疫系统相关的结论，研究人员利用了具有人类MHC分子的小鼠。“在用这种肽接种小鼠后，我们能够检测特异性识别肿瘤细胞变异IDH1而非健康细胞中正常IDH1的免疫细胞和抗体，”研究的第一作者Theresa Schumacher博士说。在实验动物中，疫苗接种诱导的特异性免疫反应阻止了显示特征性IDH1突变的癌细胞生长。如期望的那样，疫苗接种没有破坏正常IDH1酶的功能，它在机体所有健康细胞的能量代谢中发挥作用。

    科学家们首次在肠道菌群中大规模分析了菌种内部的基因变异。人类消化道中居住着大量的微生物，它们被统称为肠道微生物组。肠道微生物组在人类代谢食物、抵御感染和应答药物等过程中起到了重要的作用。许多人类疾病都与微生物组失衡有关。    我们知道肠道菌群的菌种组成是因人而异的，而一项大规模宏基因组进一步揭示了微生物组惊人的复杂性。    了解菌株水平上的多样性，对于理解肠道菌组成及其对健康和疾病的影响，是非常关键的。    研究团队将人类微生物组作为一个复杂的系统进行研究，开发了分析微生物组数据的复杂计算方法。这种方法可以在多种肠道菌中分析菌株水平上的遗传变异。同种细菌的不同菌株之间，基因或基因拷贝数会出现很大的差异。这种基因拷贝数变异能显著改变菌株的多种能力，包括耐药性、毒力、从环境摄取生化分子、分解物质获得能量、移动方式等等。这些因素决定着菌株的生活方式，能对人类宿主的健康产生影响。    我们可以直接根据鸟枪法宏基因组数据，在群体中评估指定菌种中给定基因的拷贝数变异。    通过计算分析精确定位了每个序列的菌种来源，发现在一百多人的微生物组中，有几十个菌种的五千多个基因存在着显著的拷贝数变化。这样的基因出现在他们所分析的每个菌种中，有些菌种近四分之一的基因都存在拷贝数变异。    这项研究为人们展示了微生物组的广泛菌株差异，并且鉴定到了一些新菌株。研究显示，这种基因拷贝数变异与细菌的运动能力、物质运输和能量获取有关。菌株水平的多样性体现了微生物对肠道环境变化的快速适应。    研究人员还发现，一些菌株的基因拷贝数变异与肥胖症、炎症性肠病等疾病有关，具有一定的临床意义。我们希望这项研究能鼓励人们从一个新的角度研究肠道微生物组，将其视为一个高度适应性的复杂系统，帮助人们通过操纵肠道菌的组成和功能来进行疾病管理。

    最近，研究人员在杂志上发表的一项研究表明，一个被称为OSMR的基因，在推动胶质母细胞瘤的生长过程中，发挥关键的作用。    在成年人中，胶质母细胞瘤是最具侵袭性的脑瘤。不幸的是，这种疾病还没有有效的治疗方法。平均而言，病人在诊断后仅仅16个月，就会死去。    为了研发更有效的治疗方法，我们需要更好地了解，在这些肿瘤内部到底发生了什么。漏掉的一块拼图    一段时间以来，研究人员知道，在胶质母细胞瘤中，另一个基因的一个突变体变异，称为EGFRvIII，可产生一种主要的肿瘤形成蛋白。但是，这些旨在抑制这些患者体内EGFRvIII的治疗策略，效果一直都是令人失望的。    这个分子谜题中，一定是漏掉了一些东西。所以，研究人员一直都在胶质母细胞瘤患者的组织样本中搜寻答案。研究人员发现，OSMR基因在恶性胶质瘤细胞中非常活跃。而且，通过使用现有的癌症遗传和临床数据库，他们发现，这个基因越活跃，病人的寿命就越短。    然后，研究小组研究了取自胶质母细胞瘤患者的人类大脑肿瘤干细胞。当这些细胞被注入实验室小鼠体内时，通常能够增殖，并形成新的肿瘤。然而，令研究人员吃惊的是，他们发现，当敲除胶质母细胞瘤细胞中的OSMR基因时，它们失去了形成肿瘤的能力。这意味着，这种蛋白质是谜题的一个关键所在。    研究人员得出结论：这两个基因——OSMR和EGFRvIII，能够通过形成所谓的“前馈”机制，合力促进肿瘤的生长：当OSMR产生其蛋白质时，它给EGFRvIII发信号，让其加快并生产其肿瘤形成蛋白。所以，抑制OSMR，你就抑制了EGFRvIII。    潜在的治疗靶标    这一发现具有重要的临床意义。它为治疗这种毁灭性的疾病，提供了一条新的治疗途径，但是，开发任何有效的治疗，可能还需要多年的工作。    研究人员现在正在开发抗体和小分子，旨在抑制OSMR蛋白质或其与EGFRvIII之间的相互作用——这是找到方法治疗这些肿瘤迈出的一步。如果我们发现，它们可以在动物模型中逆转肿瘤形成，那么我们就能够将这些技术用于患者测试。 

    土壤过酸或过碱都是限制植物生长及品质的重要因素，大多数的植物均不耐过酸或过碱的土壤。因此，了解土壤的酸碱度和湿度是相当重要的。土壤酸度计是用来检测土壤酸碱度的仪器，可以直接插入土壤测量土壤的酸碱度，较传统测量土壤酸碱度的方法有所不同，操作更为简单，直接插入土壤测量更能反应土壤的实际情况。    土壤酸度水分计工作原理：    土壤酸度水分计是由数值指示的电流表、金属传感器和功能数值切换装置而组合构成。即：以金属传感器为核心的硬件系统，由金属传感器与土壤相接触，利用化学反应中的氧化还原反应，所产生的电流。电流数值的大小来驱动电流表所对应的不同pH值和湿度值的单元数据（无需电池或其他外部电源支持的方法）。   土壤酸度水分计/土壤酸度计技术参数：   深度6cm，适用于地表酸度的测量。   PH范围:3-8 PH，精度：±0.2PH，   水分范围:1-8%，水分精度：±1%

    细胞为了成功地分裂，染色体就必须排成行，才进入它们的新细胞，就像打开一个剧院帷幕。它们要完成这一壮举，在某种程度上要得益于称为中心粒的结构，为幕布绳索提供一个锚点。最近，约翰霍普金斯大学的研究人员发现，没有中心粒，大部分细胞就不会分裂，并且他们发现了其中的原因：一种称为p53的蛋白质，由于其他原因可阻止细胞分裂，同时也监控着中心粒的数目，以防止可能灾难性的细胞分裂。生物通 www.ebiotrade.com     这项研究结果于七月六日在国际知名学术期刊《Journal of Cell Biology》在线发表。这一新的信息，加上中心粒操纵的新工具，可以帮助研究人员弄清“p53如何帮助保护细胞，以及当它这样做时如何会导致癌症"。延伸阅读：P53抑癌蛋白如何与基因组结合的新见解。约翰霍普金斯大学医学院分子生物学和遗传学助理教授Andrew Holland说：“p53已知可监测许多事情，如DNA损伤以及染色体的错误数目，这都对细胞造成了分裂危险。我们这项研究发现了它监测的另外一件事情：中心粒数目。"生物通 www.ebiotrade.com     细胞通常有两个中心粒，共同作为一个单位来锚定和组织微管——形成细胞骨干的分子棒。当一个细胞分裂准备时，在每个中心粒旁边形成一个新的中心粒。然后，每对中心粒到达细胞的相对侧。在分裂前，一对相同的染色体在延长细胞的中部排成行，微管——从两边中心粒散发出来，帮助将染色体拉向相反的方向，这样每个新的细胞都能接收每对染色体中的一个成员。    Holland实验室的研究生Bramwell Lambrus说：“如果细胞不能正确分离它们的染色体，可能就有可怕的后果。例如，唐氏综合症，是因为胚胎遗传了21号染色体的额外拷贝所致。有趣的是，分裂产生女性卵细胞的细胞却没有中心粒，所以我们知道，它们不是绝对必要的，但是非常有帮助的。"生物通 www.ebiotrade.com 为了更好地了解中心粒在细胞分裂中的作用，研究小组需要知道，如果没有它们，细胞会表现如何。然而，为了研究，足够长时间地完全消灭细胞的中心粒，是一项严峻的挑战，当一个细胞感觉到它的中心粒没有了，会形成一个新的中心粒。为了克服这个障碍，Holland的研究小组研究中心粒形成所需的蛋白质Plk4。研究人员不是永久性地删除细胞中的Plk4基因，而是用植物生物学中的一种诀窍，去除细胞中的Plk4基因——以前从未被应用于动物细胞中的蛋白质。免费获取CellInsight CX5全自动细胞定量成像分析仪的最新资料生物通 www.ebiotrade.com 研究人员用人的视网膜细胞，调整Plk4，这样每当他们给细胞一种植物激素（称为植物生长素）时，它就被发送到细胞垃圾桶中。只要它是存在的，生长素就能防止形成新的中心粒，所以每一次细胞分裂时，每个细胞的中心粒数量减半。到第四次细胞分裂时，大多数细胞没有中心粒，它们不再进行分裂。但是，即使生长素去除并且Plk4得以恢复后，细胞也拒绝分裂或制造出更多的中心粒。    Holland解释说：“这些细胞被永久性地被卡住了。没有产生新的中心粒，它们不再分裂，但是如果不开始分裂的过程，它们就不能制造新的中心粒。很显然，有什么机制告诉细胞不要分裂。"生物通 www.ebiotrade.com 研究小组检验了几个不同的假设，来解释为什么细胞被困，他们转向了p53，当出故障时这个蛋白已知可防止细胞分裂。当他们在没有中心粒的细胞中停止p53生产时，它们又开始分裂。正如预期的那样，新形成的细胞有许多的染色体异常。在最后的一个实验中，科学家们恢复缺乏中心粒和p53的细胞中的Plk4，以探讨细胞是否会形成新的中心粒细胞。由于p53没有阻止它们的分裂，Plk4的恢复是细胞重新开始中心粒形成所必需的。生物通 www.ebiotrade.com     该研究小组计划继续分析新中心粒的形成，以及p53如何检测中心粒并防止没有中心粒的细胞进行分裂。Holland说：“百分之九十的肿瘤有染色体异常，我们知道，它们很多都是通过p53的突变形成的。如果中心粒没有帮助正确的染色体分离，p53就作为后备，防止形成异常细胞。这是我们想了解更多的重要保障。"

    大家都知道，在细胞凋亡的早期，线粒体膜电位的下降是一个标志性的事件。而对于线粒体膜电位的检测，JC-1这种亲脂性阳离子染料是个很好的工具，也使用了很多年。生物通 www.ebiotrade.com     当线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，产生红色荧光；而当线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，产生绿色荧光。这样就可以很方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。人们常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体膜去极化的程度。    对于传统的JC-1检测，在使用带有单个488 nm（蓝色）激光器的流式细胞仪进行分析时，JC-1单体和JC-1聚合物这两个检测通道需要荧光补偿。在今年4月发表于《Current Protocols in Cytometry》的一篇文章中，意大利摩德纳大学的Sara De Biasi等人对此方法进行了改进。他们使用的是赛默飞世尔的Attune? NxT声波聚焦流式细胞仪。生物通 www.ebiotrade.com 这种仪器采用模块化设计，配有红、黄、蓝、紫四个激光器。作者认为，多激光器的使用能最大限度减少荧光补偿的需要，从而有助于实现更轻松、更高效的检测。同时，多激光器的激发也让作者能够检测其他的凋亡标志物，如PS外翻和活性氧簇的形成。    在这项研究中，De Biasi及其同事使用两个激光器来检测JC-1：蓝色（488 nm）激光器来激发JC-1的单体，而黄色（561 nm）激光器来激发JC-1聚合物。他们利用缬氨霉素（valinomycin）处理U937细胞后，开展JC-1染色。在使用单色激光激发时，不使用补偿就无法轻松分开JC-1的单体和聚合物；不过，在使用双色激光激发时，就不需要荧光补偿。生物通 www.ebiotrade.com     在同时检测多个凋亡标志物时，作者利用两种额外的探针：Pacific Blue? annexin V检测磷脂酰丝氨酸的暴露（紫色激光），而CellROX? Deep Red试剂检测活性氧簇（红色激光）。同时使用Attune? NxT流式细胞仪上的四个激光器，作者证明了三种凋亡标志物的检测。他们认为，这些方案适用于凋亡的多参数检测。

1、胡萝卜胡萝卜具有很高的保健作用和医疗价值，但美国食品专家却告诫人们：“胡萝卜下酒”的吃法是不利健康的。因为胡萝卜中丰富的胡萝卜素和酒精一同进入人体，就会在肝脏中产生毒素，引起肝病。所在，人们要改变“胡萝卜下酒”的传统吃法，胡萝卜不宜做下酒菜，饮酒时也不要服用胡萝卜素营养剂，特别是在饮用胡萝卜汁后不要马上饮酒，以免危害健康。2、凉粉因其在加工过程中要加入适量白矾，而白矾具有减缓肠胃蠕动的作用，用凉粉佐酒则会延长酒精在胃肠中的停留时间，因而增加人体对酒精的吸收，同时也增加了酒精对胃肠的刺激，减缓了血流速度，延长了酒精在血液中的停留时间，促使人醉酒，危害健康。3、熏腊食品因其含有较多的亚硝胺和色素，与酒精产生反应，不仅伤肝，而且损害口腔、食道与肠胃粘膜，还会诱发癌症。4、烧烤很多人喜欢和亲朋好友到大排档聚会，边喝酒边吃烤串，其乐融融。然而，在饮酒时用烧烤食品做下酒菜，这种吃法对健康不利。在烧烤过程中，不仅食物中蛋白质的利用率降低了，同时还会产生致癌物质苯并芘。而且，肉类中的核酸经过加热分解产生的基因突变物质，也可能导致癌症的发生。当饮酒过多而使血铅含量增高时，烧烤食物中的上述物质与其结合，容易诱发消化道肿瘤。原因一，酒精是一种有机溶剂，它能使消化道血管扩张，并溶解消化道黏膜表面的黏液蛋白，使致癌物质极易被人体吸收。其二，酒精能降低肝脏的解毒功能，促使致癌物发生作用。此外，酒精还能抑制人体的免疫功能，加强致癌物的活化。因此，喝酒最好要适量。烧烤食品致癌性大小与食入量有关，建议每周不超过2次，每次不多于100克。

熬夜吃海带对身体好海带中的褐藻胶有治疗动脉硬化，阻止人体吸收铅、镉等重金属和排除人体内的放射性毒素的作用。褐藻胶因含水率高，在肠内能形成凝胶状物质，故有助于排除毒素物质，并可防止便秘和肠癌的发生。所以熬夜后可以吃一份海带汤，或者经常熬夜的人，最好一日三餐中来一份海带汤，对身体是极有好处的。熬夜吃菌类食物对身体好熬夜吃菌类食物能有效补补身体，像黑木耳、银耳、蘑菇、香菇等都可以。这些菌类含有丰富的硒，经常服用可降血压、降胆固醇、防止血管硬化、提高机体免疫功能，增加体内免疫球蛋白的含量，兴奋骨髓造血功能及滑肠、洁血、解毒、增智等，经常熬夜的人应该多吃点。熬夜吃洋葱对身体好洋葱能促进肠胃蠕动，加强消化能力，且含有丰富的硫，和蛋白质结合的情形最好，对肝脏特别有益，因此有助于排毒。熬夜后第二天煮一锅以洋葱为主的蔬菜汤，加入绿花椰菜、胡萝卜、芹菜等多种高纤水果蔬菜，能分解体内积累的毒素，有助排便。熬夜吃绿豆对身体好绿豆可解酒毒、野菌毒、砒霜毒、有机磷农药毒、铅毒、丹石毒、鼠药毒等。中医认为绿豆可解百毒，能帮助体内毒物的排泄，促进机体的正常代谢。不过煮的时间不宜过长，以免有机酸、维持生活素受到破坏而降低作用。熬夜后身体的毒素还未排出，喝完绿豆汤最好不过了。熬夜吃猪血对身体好猪血的血浆蛋白经胃酸和消化液分解后，能产生一种有润肠作用和解毒作用的物质。这种物质可与粘附于胃肠壁的粉尘、有害金属微粒等发生化学反应，从而使这些有毒有害物排出体外，所以说，猪血非常适合经常熬夜的食用。熬夜吃莲藕对身体好莲藕的利尿作用，能促进体内废物快速排出，藉此净化血液，所以经常熬夜的人饮食上可以多些莲藕。莲藕冷热食用皆宜，将莲藕榨打成汁，可加一点蜂蜜调味直接饮用，也可以小火加温，加一点糖，趁温热时喝。

伪健康食物1:全麦面包全麦面包的主要原材料是没有去掉外面麸皮和麦胚的全麦面粉，它含有大量的粗纤维以及B族维生素，因此食用全麦面包不仅能增强消化道功能，还可以防止糖原的堆积，对于减肥是非常有帮助的。但是，真正的全麦面包口感较比较差，所以超市中售卖的很多全麦面包为了弥补这个弱点都会加入很多精面粉、黄油和糖来弱化不好的口感，使面包吃起来更美味，由于加入了很多辅料食材，面包的热量也会提高不少，违背了全麦面包本身所表达的健康意愿。伪健康食物2:燕麦片燕麦属于粗粮食物，因此纤维质以及B类维生素含量很高，用来冲牛奶或是煮粥食用都是很好的选择。不过，超市中所售卖的燕麦片通常都经过了加工，尤其是即食麦片，其中含有大量的糖分以及奶精(反式脂肪酸)，并不利于减肥或是保持身材。伪健康食物3:益生菌饮料很多乳饮料中都含有益生菌，有利于维持肠胃健康，但同时，这类饮料中糖分的含量也高的吓人，一瓶含益生菌的乳饮料中通常要添加60g甚至更多的糖，而一瓶可乐中的糖分通常不会超过40g，对比来看，含益生菌的乳饮料并不适合经常喝。伪健康食物4:含茶叶成分饮料绿茶、花茶、乌龙茶本身含有大量的茶多酚，能够帮助身体和肌肤抵抗自由基的侵袭，但如果做成茶饮料，势必要添加糖以及防腐剂，这不仅会导致茶饮料本身的热量增加，还会破坏茶多酚的活性。伪健康食物5:罐装咖啡早起喝一杯煮制的黑咖啡能加速身体的水分循环和新陈代谢，更能帮助脸部和眼睛摆脱浮肿，虽然罐装咖啡也有相同的作用，但为了改善口感也加入了很多不利于健康的添加剂，比如奶精和糖，当然这些对于减肥来说都是多余热量，看来，想保持身材还是自己煮咖啡或是买那些含糖量低，只加鲜奶的现磨咖啡更好。伪健康食物6:黑巧克力黑巧克力有什么好处?它能补充抗氧化能量，延缓身体和肌肤老化，还能提供促进燃脂的生物碱，既然这样，为什么还是伪健康食物呢?因为在超市里所买到的有别于牛奶巧克力的黑巧克力并不够“黑”，其中含有很多的糖分以及其他添加剂，以此来中和纯黑巧克力那种令人没有勇气尝试的苦涩感。真正的黑巧克力可可脂含量至少要在70%以上，同时糖分以及乳含量不超过12%，可以以此来作为黑巧克力是否够“黑”判断选购标准。伪健康食物7:深海鱼罐头其实用深海鱼罐头来拌沙拉既不健康也不低卡，尽管深海鱼经过深加工变成罐头之后其中的维生素A，维生素E以及不饱和脂肪酸不会损失，但考虑到产品保存的问题，多数鱼罐头都会用大量的油脂浸透，食用之后，这些油脂也会变成脂肪堆积在你的身上。

医院看骨科门诊的人逐渐增多，他们大多50岁以上，都是膝盖的毛病，一问才知道，很多人前不久才爬过山!膝关节磨损不可修复50岁后爬山锻炼，反伤身在我们传统的印象中，爬山、上下楼梯是一个很好的有氧运动，能够帮助我们锻炼到大腿和臀部的肌肉群，同时，还能够锻炼我们的心肺功能。但事实不仅如此。台湾骨科名医、台大医院前骨科部主任韩毅雄形容:爬楼梯或爬山是“最笨的运动”。爬楼梯或爬山属于负重运动，腰部以下的关节都要承受自己身体的重量，尤其膝盖受力最多。当身体爬阶向上时，膝盖负担的重量会瞬间增为平常的4倍左右。以一个体重60公斤的人为例:平路行走时，两边膝盖各承重60公斤。爬楼梯或爬山时，膝盖负重瞬间变成240公斤，相当于左右膝盖上各扛了一架钢琴。而且，速度越快，对膝盖产生的压力就越大。而且，这种对膝盖的磨损是不可修复的!磨损如果过度严重，只能够置换关节!膝关节寿命只有60年改变运动习惯，延长40年很轻松一方面我们需要锻炼大腿和臀部的肌肉群。但是另一方面，我们又不能伤害的膝关节，因为膝关节的寿命由基因决定，是60年，过度使用会加重对它的磨损，并且不可修复。但其实解决这个问题并不难，我们只需要改变我们的运动习惯就可以了~延长膝盖寿命40年--坚决不做这些动作不在坚硬水泥上★  下蹲、跑步、跳绳、跳舞  ★在坚硬地上所有剧烈运动，包括下蹲、蛙跳、跑步、跳绳还有跳舞，都会加重对膝盖骨的磨损。尤其是蹲下去再站起来，对关节的磨损最大。关节软骨大概有1到2毫米，作用就是缓冲压力，保护骨骼不破裂。它就相当于跑道上的橡胶，能够帮助我们缓冲上下运动时的一个力，进而来保护我们的关节。在水泥地上跳舞、跳绳、跑步，地是硬的，这么大的反作用力一弹回来，对关节和骨骼的损伤就很大。▲ 记得在橡胶运动场地做运动哦50岁后★  拒绝爬山、爬楼等运动  ★上面已经介绍了，在爬山和爬楼梯的时候，膝关节会承受超过本身体重3到4倍的压力。50岁以后，我们的膝关节多少都会有些磨损的情况，此时，就要减少此类运动。而有些有过膝关节损伤的朋友40岁以后就要注意了。台安医院复建科主任钟佩珍表示:爬楼梯或爬山，确实有增强心肺功能、消耗热量等诸多优点，但缺点太严重，实在是得不偿失。所以，她行医30年来，从不曾建议病人把爬楼梯或爬山当作运动。--这些运动不可少最适合膝关节的运动★  游泳、骑车、做体操  ★对于普通人来说，对关节最有好处的运动就是游泳。在水里人体是与地面平行的，各个关节基本不负重.有糖尿病、高血压等慢性病的人多游泳，对全身都好。为了达到锻炼身体的目的，可以选择游泳、骑车、做体操等关节负重较轻的运动。膝盖复健术★  最适合的运动方法  ★不管您现在有没有膝盖不舒服的情况，这个运动都会适合您，因为这个运动:不需要外出，不需要器械，不损伤膝盖，还能锻炼到膝盖!方法:找一把可以靠背的椅子，臀部往后坐，靠着椅背。双手放在椅子背后，背部垫靠垫。大腿下垫一条浴巾，也可以将几条浴巾和毛巾捆绑在一起，只要够厚、捆得扎实就可以，目的是要将膝盖垫高。坐姿端正，腰背挺直，两脚垂放，一前一后地自然晃动。不需太大幅度摆动，轻轻松松地晃啊晃就可以了!这一招看似十分简易，对强化膝盖却非常有帮助。举个例子，如果每天可以晃到4000下，运动效果会比跑步更厉害!膝盖有旧伤或脚痛的人，可以用健康的脚去带动痛的那只脚，健康的脚托着痛的脚同时前后来回自然晃动，这么做相当于复健，可以让膝盖渐渐恢复健康。

如果你对自己的身高或胖瘦不满意的话，可以从父母身上各自找到确切的答案。英国近日一项研究发现，父亲通常影响孩子的身高，而母亲则通常决定了孩子的胖瘦程度。研究人员分别对1150个孩子在刚出生、三个月大、一岁和两岁大时的身高、体重和头部周长进行了测量并做了记录，还收集了孩子们的脐带血样。初步的研究结果显示，父亲越高，他的婴儿在出生的时候也就越长，至于孩子身体的胖瘦情况，主要是由母亲的身体肥胖指数决定的。一、绝对遗传1.肤色 让人别无选择。它总是遵循父母“中和”色的自然法则。如，父母皮肤较黑，绝不会有白嫩肌肤的子女；若一方白、一方黑，那么子女会是“中性”肤色，也有偏向一方的情况发生。 2.下颚 是不容“商量”的显性遗传。比如，即使父母任何一方有突出的大下巴，子女们常毫无例外地长着酷似的下巴，“像”得有些离奇。 3.双眼皮父亲的双眼皮，大多数会留给子女们，有些儿童出生时是单眼皮，到长大后又“补”上像他父亲那样的双眼皮。另外，大眼睛、大耳垂、高鼻梁、长睫毛，都是五官遗传时从父母那里最能得到的特征性遗传。二、有半数以上概率的遗传 1.肥胖父母双方肥胖子女们有53%的机会成为大胖子，如果父母有一方肥胖，孩子肥胖的概率便下降到40%。这说明，胖与不胖，大约有一半可以由人为因素决定。因此，父母完全可以通过合理饮食和充分运动使自己体态匀称。 2.秃头 秃头是传男不传女。比如，父亲是秃头，遗传给儿子概率则有50%，就连母亲的父亲，也会将自己秃头25%的概率留给外孙们。 3.青春痘 父母双方若患过青春痘，子女们的患病率将比无家庭史者高出20倍。三、概率不高的遗传1.白头发 属于概率较低的隐性遗传，因此，不必过分担心父母的少白头，会在孩子的头顶上如法炮制。四、后天可塑的遗传 1.声音 通常男孩的声音大小、高低像父亲，女孩像母亲。但是，这种由父母生理解剖结构的遗传所影响的音质如果不美，多数可以通过后天的发音训练而改变。这使某些声音条件并不优越的人，可以通过科学、刻苦的练习而圆一个甜美嗓音的梦。 2.腿型 酷似父母那双脂肪堆积的腿，完全可以通过充分锻炼而塑造为修长健壮的腿。到是那双腿若因遗传而显得过长或太短时，就无法再塑，只能顺其自然了。

天气一暖和起来，跑道上和健身房里的女孩们也多了起来。运动的好处千千万，可一不小心就会练成“萝卜身 + 肌肉腿”，今天就交大家6个简单易学的拉伸动作，让你从肩膀、胸口、腹部、背部、臀部、双腿都能得到伸展与舒缓!站姿前弯伸展部位:后侧腿筋、下背部、胸口、肩膀Step1:站着让双脚分开与臀同宽，将双手互扣握在身体后方。Step2:吐气前弯让脸部尽量接近双腿，保持双脚伸直、膝盖尽量不要弯曲，接着让互扣的双手往前延伸拉长。Step3:保持深吸深吐维持动作30秒后恢复。单手骆驼式伸展部位:股四头肌、腹肌、肩膀Step1:跪在瑜加垫的前方保持大腿垂直地面，让小腿与脚背贴在瑜加垫上与大腿呈90度。深吸气后深吐慢慢地将上半身往后仰延展，让左手往下找到左脚扣住支撑，把右手顺着身体的方向往后延伸拉长，与地面保持接近平行。Step2:在过程中将头部与右手一直保持向后的力量，把身体前侧从大腿、肚子到胸口通通拉长，保持深吸深吐维持动作30秒换边。半轮式伸展部位:股四头肌、腹肌、肩膀、脖子Step1:上半身平躺在瑜加垫上，屈膝脚踩瑜加垫。用力将臀部抬起后把双手往后撑住臀部，让上手臂紧贴地面、前手臂与地面呈90度垂直支撑。Step2:维持手臂向后、胸口向前伸展，将肩膀向后夹紧尽量靠拢，双脚踩地帮忙支撑臀部，避免让重量全部都压在手上。Step3:保持深吸深吐维持动作30秒。蜥蜴式伸展部位:髋关节、臀部Step1:双手放在地面支撑，先做右脚在前的弓箭步后把后脚膝盖放下、小腿与脚背紧贴地面，将臀部下沉、前脚膝盖向外侧倒，维持右脚脚刀紧贴地面。Step2:维持双手支撑、脸部与整个胸口向斜前侧拉长，并持续让臀部下沉。Step3:保持深吸深吐维持动作30秒后换另一侧。蝴蝶式伸展部位:臀部、下背部Step1:坐在瑜珈垫上将两腿膝盖弯曲，并将两脚的脚掌面对面尽量靠拢，深吸一口气将脊椎延伸拉长，接着吐气向前延展让头部尽量靠近地板，双手自然地放置在地板前方。Step2:保持深吸深吐维持动作30秒后恢复坐姿。坐姿分腿前弯式伸展部位:后侧腿筋、下背部Step1:坐在瑜珈垫上将两腿往外侧伸展，伸展到最大幅度后停止。深吸气将脊椎延伸拉长，接着吐气背部平平地往下、向前拉长整个背部。Step2:往前延展后可以将手扣在脚大拇指上，如果筋比较软的人也可以将手放在地板，还可以再压得更深的话，就把额头也靠在地板上休息。Step3:保持深吸深吐维持动作30秒后恢复坐姿。

尽管我们每个人每天每餐都在饮食，但是不一定就证明我们可以避免一些错误地饮食事件的发生，现在就让食物养生告诉你怎样饮食减肥的禁忌，这个样才可以健康的饮食。食物养生,怎样饮食减肥　　禁忌一　　起床就吃早餐有些人由于赶着上班或者上学早上醒来就立刻吃早餐，食物养生指出这样做大错特错的，太早进食早餐，脾胃还没有恢复正常的工作，进食会给肠胃造成很大负担。　　禁忌二　　早餐丰盛不一定就是好早餐不吃是不健康的，所以就吃很多食物，其实早餐丰盛不一定就是好。吃太多食物，反而会导致食物无法及时被消化，胃脏负担重，就会引起肥胖。　　禁忌三　　油条配豆浆油条配豆浆是中国的传统早餐搭配，其实这是不利于身体健康的，油条油炸后营养素会被破坏，产生了大量致癌物质。这样的早餐组合的油质量明显超标，不要经常吃。食物养生告诉你怎样饮食减肥的禁忌，上面的饮食禁忌你触碰到了吗?健康饮食一定要会拒绝他们。

对于不少高血压患者来说，血压忽高忽低的现象比较多见。尤其是已经按照医嘱服用药物的患者，面对此情况更是无能为力，甚至因此背上了沉重的心理负担。辽宁中医药大学附属医院教授张艳建议，出现这一情况的人可以从下面五个方面查找原因。首先是对血压的数值变化过于敏感。有些高血压患者对疾病有一定的了解，非常担心自己因此出现严重的心脑血管意外事件，所以就经常检测血压，而且对数字变化非常敏感。发现数值高一点就加药；数值低一点马上减药。这就造成了血压的忽高忽低。实际上，只要血压在合理的区间内浮动，就无需患者过多关注。其次是多疑苦闷的心理因素在作怪。有一些病程较长的高血压患者，到后期备受疾病折磨，于是产生多疑、苦闷、抑郁的情绪，爱发脾气，对事物失去兴趣。这样的心理状态也会诱发血压波动。第三是服用了干扰降血压作用的药物。有一些药物和降压药同服，可能会影响血压稳定。所以，服药前必须遵医嘱。此外，部分患者忽视了其他因素的影响。他们只关注血压，忽视血糖、血脂等因素。其实，血糖、血脂如果控制不好，完全可以影响到高血压的治疗，使得血压忽高忽低。另外，很多人忽视了饮食习惯的调整。高血压患者应该遵医嘱对生活习惯，尤其是饮食习惯进行调整。这是保证药物疗效的根本。如果饮食习惯不改善，服再多的药物也是无济于事。

DAPI染色液可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ，且对活细胞无毒副作用。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。DAPI染色液注意事项：荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(货号：AR1109)。DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。为了您的安全和健康，使用时戴一次性手套操作。DAPI染色液步骤：1.  对于固定后的细胞或组织样品，适当洗涤去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI染色。2.  对于贴壁细胞或组织切片，加入少量DAPI染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的色液，混匀。3.  室温孵育5-10分钟。4.  吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟，洗掉未结合的DAPI。5.  用带有360nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

造血干细胞移植，英文为“干”，有“树干”、“起源”之意，就像一棵树干可以长出树杈、树叶、开花和结果等一样，干细胞也具有极强的长期自我更新及多项分化潜能。研究表明，干细胞可以来源于胚胎和胎儿组织，即胚胎干细胞，又称ES细胞，也可来自于出生后的器官和成年个体组织，即成体干细胞。造血干细胞移植，是患者先接受超大剂量放疗或化疗（通常是致死剂量的放化疗），有时联合其他免疫抑制药物，以清除体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞，然后再回输采自自身或他人的造血干细胞，重建正常造血和免疫功能的一种治疗手段。异基因造血干细胞移植时造血干细胞来源于正常供者，无肿瘤细胞污染，且移植物有免疫抗肿瘤效应，故复发率低，长期无病生存率（也可以理解为治愈率）高，适应证广泛，甚至是某些疾患惟一的治愈方法，但供者来源受限，易发生移植物抗宿主病，移植并发症多，导致移植相关的死亡率高，患者需长期使用免疫抑制剂，长期生存者生活质量可能较差。造血干细胞移植可以治疗许多血液病，包括：血液系统恶性肿瘤，如急性白血病、慢性粒细胞白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征等，某些血液系统非恶性肿瘤，如重型再生障碍性贫血、地中海贫血。造血干细胞移植、多发性骨髓瘤患者以及某些危险程度较低的急性白血病患者适合进行自体造血干细胞移植，危险程度中等或较高的急性白血病、慢性粒细胞白血病、骨髓增生异常综合征、重型再生障碍性贫血、地中海贫血患者适合进行异基因造血干细胞移植。应当强调的是，慢性粒细胞白血病、骨髓增生异常综合征都是造血干细胞异常引起的造血系统恶性肿瘤，虽然目前有很多先进的药物从遗传学水平治疗这些患者，但是异基因造血干细胞移植仍是治愈这些疾病的惟一治疗手段。

本公司产品有微生物干粉培养基：有细菌总数，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌，霉菌酵母菌，李斯特菌等所有细菌的普通培养基和显色培养基。欢迎来电咨询订购：RNS培养基生产一次性成品培养基的产品有：血琼脂平板、营养琼脂平板、伊红美蓝平板、SS平板、麦康凯平板、TSA平板，沙宝罗葡萄糖琼脂平板，显色培养基平板；一次性管装培养基：乳糖胆盐管装培养基/10ML、硫乙醇酸盐管装培养基/50ML、改良马丁管装培养基/50ML等。微生物生化管：大肠杆菌科生化管，沙门氏菌生化管等。RNS培养基生产厂家另还有elisa试剂盒、免疫组化试剂盒、培养基、抗体、标准品等产品；重复性高；可靠性强；购买ELISA试剂盒，免费代测；Elisa试剂盒技术服务要求：专业，规范，高效。我司提供更多、更全、更好的产品技术服务。欢迎来电咨询！

如何避免沉淀物的产生?1、解冻ELISA试剂盒时，请按照所建议的逐步解冻法（-2O。C至4。C至室温），若血清解冻时改变的温度太大（如-20。C至37。C），实验显示非常容易产生沉淀物。2、解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生3、请勿将血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，ELISA试剂盒血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。5、若必须做血清的热灭活，请遵守56。C，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。 [5]血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，ELISA试剂盒该如何处理?　欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被促甲状腺激素（TSH）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的促甲状腺激素（TSH）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    由于各种抗原成份，包括小分子的半抗原，ELISA试剂盒均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体，利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原，因此免疫测定的应用范围极广，在临床检验中可用于测定：1) 体液中的各种蛋白质，包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等。2) 激素，包括小分子量的甾体激素等。3) 抗生素和药物。4) 病原体抗原，HBsAg、HBeAg等。5) 另外，也可利用纯化的抗原检测标本中的抗体，例如抗-HBs等。5．标记的免疫测定    如上所述，免疫测定是一种很敏感的测定方法，抗原抗体反应后直接测定形成的沉淀或浊度，敏感度可达5~10μg/ml，但在临床检验中，某些待测物在标本中的含量远低于这一水平，因此要寻找增加敏感度的方法。标记的免疫测定是将检测试剂中的抗原或抗体用可微量测定的物质加以标记，通过测定标记物来提高敏感度。在放射免疫测定和中，ELISA试剂盒标记物分别为放射性核素和酶，最后用测定放射性和酶活力来计算待检物的量，敏感度可比直接测定沉淀物提高数百至数千倍。在标记免疫测定中，一般加入过量的标记试剂以保证与待测物彻底反应。以标记抗体（Ab ※）检测抗原（Ag）为例，反应式如下：Ag+ Ab※ →AgAb※+Ab※    在反应产物中有与Ag结合的Ab※和游离和Ab※ ，如不将两者分离而测定标记物，测得的结果将为两者之和。因此，游离标记物与结合标记物的分离是标记免疫测定中的重要步骤。可采用多种手段，固相载体是其中之一。如将抗原或抗体包被在固相载体上，然后再与标记的抗原或抗体直接反应，结合的标记物被固定在载体上，而游离的标记物留于溶液中。这样可以通过洗涤将游离的Ab※除去，ELISA试剂盒结合标记物的测定可在固相上进行。IgM抗体一般为保护性抗体具有免疫性。因此IgM抗体的测定，对某些传染病如甲型肝炎有较高的临床诊断价值。

elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度，损失越少，回收率越高，如果作标液1PPM，就是1毫克/升，而作出标准数据为0.99毫克/升，就是说你的回收率是99％，这个与真实成分有密切的关系，说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定, 样品水中含有无机氯 20 mg/L, 取 100mL 被测水样品, 加入 0.1mL 浓度为 10mg/mL 的含无机氯标准样品, 测定时忽略体积变化, 如果测定出样品中无机氯为 2.98mg/L, 则认为回收率为 98%。对于定量检测来说，elisa试剂盒主要还是一个准确度的验证。不过我看到别人写的内容比我自己想说的要好，所以就贴上去了。相对回收率可能会高于100%的，如果只是说“损失程度”，其实是不准确的。应该说，回收率越接近100%，说明这个试剂盒的准确度越高。

生物芯片由于其高通量的特性，逐渐成为医学研究中必不可少的实验手段。利用生物芯片可以从基因组和组两大方面对疾病发生的分子机制进行研究，从基因水平探索疾病发生与基因的关系，如DNA水平、RNA水平和表观遗传学水平。蛋白质是基因表达的产物，ELISA试剂盒是生物功能的主要体现者，蛋白质的结构和功能直接影响着生命活动的变化，对基因表达的蛋白质水平进行定性、定量的研究，能够真实地解释各种疾病现象。    很多疾病的产生与基因有直接或间接的关系，包括遗传因素后天的遗传物质变异，遗传因素如致病基因和疾病易感基因，后天的遗传物质变异包括DNA水平上的基因突变、染色体变异等。这种改变在肿瘤发生中特别重要，癌基因的扩增、抑癌基因的缺失均与肿瘤发病的多个步骤密切相关。ELISA试剂盒有些疾病虽然没有基因的变异，但与基因的调控与转录有关，基因的异常表达导致功能失调，最终导致疾病的产生。转录水平的基因表达谱从mRNA水平反映了细胞或组织特异性表型和表达模式，临床上出现的症状和体征有着必然的内在联系。     运用大规模、高通量的基因芯片技术，对大量的同一类型疾病状态下的各类组织和细胞的mRNA表达谱进行生物信息学和统计学的比较分析，可以建立疾病类型特定的基因表达谱数据库并找出各类疾病及亚型的相关基因，阐述各种疾病发生过程中各基因的作用机制。表观遗传的改变也是各类疾病发生的重要因素，已经发现肿瘤等疾病跟相关基因的空间结构及大量存在的甲基化、乙酰化等修饰有关，生物芯片是研究甲基化、乙酰化等修饰很有力的工具。ELISA试剂盒疾病在基因水平、转录水平和表观遗传学水平的异常最终都是通过蛋白质的表达与活性改变而起作用的。生物芯片技术可以从疾病发生的上述几个层面进行机制研究。

此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，ELISA检测试剂盒出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。如果您一直被所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面ELISA检测试剂盒、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。    最常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。在这种测定方法中有三个必要的试剂：（1）固相的抗原或抗体，即"免疫吸剂"（immunosorbent）；（2）酶标记的抗原或抗体，称为“酶联物"、“结合物"（conjugate）；（3）酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、ELISA检测试剂盒寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA试剂盒法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。

血清标本可按常规方法采集，应留意避免溶血，红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。如在冰箱中保留过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。本文将叙述板式ELISA各个操纵步骤的留意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，严格遵照划定操纵，必能得出正确的结果。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不可溅出，不可产气愤泡。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清，可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。    ELISA的操纵因固相载体的形成不同而有所差异，海内医学检修一般均用板式点。除特殊情况外，在医学检修中均以血清作为检测标本。加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。每次加标本应更换吸嘴，以发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。优质的试剂，良好的仪器和准确的操纵是保证ELISA试剂盒检测结果正确可靠的必要条件。ELISA顶用的蒸馏 水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。有些标本可直接进行测定(如血清 、尿液)，有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。   在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清天然凝固、血块收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液，再在其加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体 或抗原成份，ELISA试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。

ELISA试剂盒实验-如何选择最优化的包被条件？1.包被抗原的选择包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类.天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被(先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再通过特异性反应使抗原固相化).ELISA试剂盒经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板.小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上.2.包被液的选择一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以使用pH7.2的磷酸盐缓冲液.3.包被温度的选择通常是4-8度条件下过夜或者37度保温2小时,我们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的保持.4.包被浓度的选择包被的最适浓度随固相载体和包被物的性质变化,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的最适包被浓度需要通过实验来确定.

ELISA试剂盒实验-如何选择最优化的包被条件？1.包被抗原的选择包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类.天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被(先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再通过特异性反应使抗原固相化).ELISA试剂盒经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板.小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上.2.包被液的选择一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以使用pH7.2的磷酸盐缓冲液.3.包被温度的选择通常是4-8度条件下过夜或者37度保温2小时,我们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的保持.4.包被浓度的选择包被的最适浓度随固相载体和包被物的性质变化,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的最适包被浓度需要通过实验来确定.