ELISA试剂盒实验-如何选择最优化的包被条件?
1.包被抗原的选择
包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类.天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被(先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再通过特异性反应使抗原固相化).ELISA试剂盒经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板.小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上.
2.包被液的选择
一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以使用pH7.2的磷酸盐缓冲液.
3.包被温度的选择
通常是4-8度条件下过夜或者37度保温2小时,我们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的保持.
4.包被浓度的选择
包被的最适浓度随固相载体和包被物的性质变化,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的最适包被浓度需要通过实验来确定.
更多
支持大规模设备更新行动方案,将传统氮吹仪更新为常压闭路快速蒸发浓缩系统
厂商
2024.06.11
赛多利斯推出创新 Picus® 2 ,定义互联电动移液器
新品
2024.07.22
【第二轮用户会通知】2024马尔文帕纳科X射线用户技术交流会
厂商
2024.08.21
日立应用 | 光谱分析技术在纺织材料遮热性能表征中的应用
厂商
2024.08.22