小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒

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【中文名称】：小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒

【英文名称】：MouseProstaglandinE1,PG-E1ElisaKit

【产品货号】:CL-D3265

【产品规格】:96T/48T

【保存条件】：2-8℃低温保存

【保质期】：6个月，提供试剂盒最新批次

3、封闭：小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙，从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使用（5%－10％）；还有一些稀有用到的各种动物血清　　（主要为了排除相似蛋白干扰）和酪蛋白等等。但最终选用什么，要依据试验具体来实践。

4、洗涤板：可以说在ELISA操作中，洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的，清除残留在板孔中游离的物质，以及非特异性地吸附的干扰物质，在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差，人为因素很大（当然有条件的用洗板机除外），洗的不彻底或串了孔，对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。

　　5、加抗体标本(和二抗)：注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用pbs稀释，也可用封闭液去稀释。如需加二抗，还要注意二抗的工作浓度，太高浪费，太低则着色浅。

　　6、显色：显色系统又很多，我们一开始做的时候，要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵，AP结合物可加叠氮钠。

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小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒酶联免疫吸附试验（又称酵素免疫分析法，Enzyme-linked immunosorbent assay，简称ELISA）利用抗原抗体之间专一性键结之特性，对检体进行检测；由于结合于固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性，因此设计其键结机制后，配合酵素呈色反应，即可显示特定抗原或抗体是否存在，并可利用呈色之深浅进行定量分析。

小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为：

将已知之抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余之抗原

加入待测检体，检体中若含有待测之一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结

洗去多余待测检体，加入带有酵素之二次抗体，与待测之一次抗体键结

洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。