小鼠双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒

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【中文名称】：小鼠双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒

【英文名称】：MouseDihydrotestosterone,DHTELISAKit

【产品货号】:CL-D3262

【产品规格】:96T/48T

【保存条件】：2-8℃低温保存

【保质期】：6个月，提供试剂盒最新批次

7、小鼠双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒每次做尽量要把阴阳空三个对照做好，如出现问题也好分析。

相关知识要点：

1、问：做间接Elisa法测试小鼠血清中的IgE抗体，设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等，用的是生物素标记的羊抗鼠IgE抗体，和亲和素的辣根过氧化物酶。可是结果除了空白对照孔没有颜色外，其余各孔全有颜色，而且OD值都相差不大，为什么？

回答：可能原因如下： 

（1） 水质被金属离子等污染；防止办法尽量使用新鲜水或蒸馏水。

（2） 洗涤不充分，样品中其它成分残留或酶残留；防止办法洗涤液应注满微孔，充分洗涤。

（3） 移液头重复使用，未洗净或消毒不完全； 防止办法移液头最好一次性使用。

（4） 酶标板灵敏度过高。

（5） 一抗显色时间的控制等等，关于ELISA的每一步都要注意才行。

2、小鼠双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒ELISA加样时的防错小经验

（1）用一张写满字的纸，字越多越好，比如报纸，垫在下面，这样，加过标本的小孔看过去下面的字会变小，没加的字正常，非常容易区分。

（2）可以利用液面反光与没有加的孔加以区别

（3）在标本加完后，再把加样枪全压下，使液面产生小气泡，也可以加以区分 

3、棋盘试验的操作方法：

（1）将抗原按一定的梯度倍比稀释后，按照ELISA从上到下（或者从左到右）的顺序包被。

（2）将抗体按一定的梯度倍比稀释后按照ELISA从左到右或者从上到下加入。

（3）二抗的稀释倍数是一定的，然后显色，读值。

OD值的测定时，波长要根据显色剂的不同而定，一般上大家都使用TMB显色，450nm读值。根据读值得结果可以选定合适的抗原和抗体效价，这就是棋盘 实验的目的，如果抗原包被量已知而二抗的工作浓度不确定的话就用一抗和二抗作棋盘试验。

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小鼠双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒酶联免疫吸附试验（又称酵素免疫分析法，Enzyme-linked immunosorbent assay，简称ELISA）利用抗原抗体之间专一性键结之特性，对检体进行检测；由于结合于固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性，因此设计其键结机制后，配合酵素呈色反应，即可显示特定抗原或抗体是否存在，并可利用呈色之深浅进行定量分析。

间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为：

将已知之抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余之抗原

加入待测检体，检体中若含有待测之一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结

洗去多余待测检体，加入带有酵素之二次抗体，与待测之一次抗体键结

洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。