【飞诺美色谱】血浆中 6 种儿茶酚胺类物质的 LC-MS 分析

艾杰尔飞诺美

2024/08/30 14:13

阅读：5

嗜铬细胞瘤及副神经节瘤 (PPGL) 是一种能够引起内分泌性高血压的少见神经内分泌肿瘤，在普通高血压门诊中患病率为 0.2% - 0.6%，在儿童高血压患者中为 1.7%。PPGL 患者的主要临床表现为儿茶酚胺 (catecholamine ，CA) 类物质分泌增多，进一步导致高血压及心、脑、肾血管并发症和代谢性改变，在经准确诊断后，可通过手术治疗，属于一种可治愈的继发性高血压。

CA 是一类含有儿茶酚和胺基的神经类物质，是人体内重要的神经递质和激素，包括肾上腺素(E)、去甲肾上腺素 (NE) 和多巴胺 (DA)。CA 在儿茶酚 -O- 甲基转移酶 (COMT) 的作用下生成变肾上腺素类物质(metanephrines，MNs)，主要包括甲氧基肾上腺素 (MN)、甲氧基去甲肾上腺素 (NMN) 和 3- 甲氧酪胺 (3-MT)。在《嗜铬细胞瘤和副神经节瘤诊断治疗的专家共识 (2020)》中，推荐：诊断 PPGL 的实验室检查首选血浆游离或尿液甲氧基肾上腺素 (MN)、甲氧基去甲肾上腺素 (NMN) 浓度测定；建议：可同时检测血或尿 NE、E、DA 及其他代谢产物 3-MT 等浓度以帮助诊断。

样品制备

预处理：

取 350 μL 血浆，加入 10 μL 标准品溶液及 10 μL 内标溶液，涡旋震荡 1 min，加入 350 μL 50 mM 乙酸铵溶液，涡旋震荡 1 min，待净化。

固相萃取 (SPE)：

前处理耗材：Cleanert PWCX 96 Well Microplates (5 mg/mL) 货号：WC00501-MW

活化：依次使用 200 μL 甲醇，200 μL 25 mM 乙酸铵溶液进行活化。上样：将预处理的样品全部上样。

淋洗：依次使用 400 μL 25 mM 乙酸铵溶液，400 μL 乙腈进行淋洗。洗脱：使用 100 μL 5% 甲酸乙腈溶液对孔板两次洗脱。

氮吹复溶：将 2 次洗脱溶液涡旋并在 37℃下氮吹，然后使用 100 μL 初始比例流动相复溶，并涡旋 1min 后进样检测。

液相条件

色谱柱：Kinetex F5

规格：3.0×100 mm ，2.6 μm 货号：00D-4723-Y0

流动相：A：含甲酸的水溶液