【飞诺美色谱】莽草酸色谱柱筛选

概述

莽草酸，是一种有机化合物，化学式为C7H10O5。 莽草酸通过影响花生四烯酸代谢，抑制血小板聚集，抑 制动、静脉血栓及脑血栓形成，并具有有抗炎、镇痛作 用，还可作为抗病毒和抗癌药物中间体。2017年10月 27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清 单初步整理参考，莽草酸在3类致癌物清单中。

关键词

莽草酸；LC-MS/MS；

化合物信息

莽草酸，分子量174.151，结构：

实验部分

1.1 主要仪器设备

液相色谱串联质谱仪(AB SCIEX Triple QuadTM4500)，配有电喷雾离子源(ESI)

1.2 试剂

实验用水、乙腈均为色谱级；

甲酸铵为分析纯；

1.3 标准品

草莽酸标准品，纯度98%，粉末，客户提供。

1.4质谱条件

离子源类型：电喷雾离子源（ESI-）

扫描方式：多反应监测负离子模式（MRM）

喷雾针电压：-4500 V

离子源温度：500 ℃

加热器（GS1）：45 psi

辅助加热气（GS2）：55 psi

气帘气（CUR）：35 psi

碰撞气（CAD）：9 psi

各化合物监测离子和碰撞电压（CE）参数均经 过系统优化，优化信息参见表2。（此参数仅为 参考，不同仪器化合物参数会有差异）

1.6 色谱条件

1.6.1反相模式

流动相A：0.1%FA水；

流动相B：乙腈；

柱 温：40 ℃；

进样量：10 μL；

梯度程序见表3：

1.6.1.1 色谱柱： Synergi Fusion-RP（3×100mm, 2.5μ m, 100Å）；P/N:00D-4423-Y0

1.6.1.2 色谱柱： Luna Omega Polar C18（3×100mm, 3μm, 100Å）；P/N:00D-4760-Y0

1.6.1.3 色谱柱： Kinetex F5（2.1×100mm, 2.6μm, 100Å）；P/N:00D-4723-AN

1.6.1.4 色谱柱： Kinetex PS C18（3×100mm, 2.6μm, 100Å）；P/N:00D-4780-Y0

1.6.2 HILIC模式

流动相A：水（含5mM甲酸铵0.1%FA）；

流动相B：95%乙腈（含5mM甲酸铵0.1%FA）；

柱 温：40 ℃；

进样量：10 μL；

梯度程序见表3：

1.6.2.1 色谱柱：Luna HILIC（2×100mm, 3μm, 200Å）；P/N:00D-4449-B0

1.6.2.2 色谱柱：Kinetex HILIC（2.1×100mm, 2.6μm, 100Å）；P/N:00D-4461-AN

1.6.2.3 色谱柱：Biozen Glycan（2.1×100mm, 2.6μ m）；P/N:00D-4773-AN

结论

综上比较，莽草酸色谱柱筛选结论如下：

一、反相模式下，Synergi Fusion-RP相较于其他几根 色谱柱，保留较强；

二、Hilic模式下，Glycan保留最强，等度80%有机相 可保留在2.5min左右出峰，次之Luna HILIC，95%有 机相1.5min出峰，但是Glycan灵敏度下降4-5倍；

三、HILIC模式下灵敏度比反相模式较高，考虑是有 机相对负模式离子化效果差异；

四、流动相中加入盐会抑制离子化效果，灵敏度会 降低，流动相0.1%甲酸灵敏度稍有提高；

五、在反相模式下，样品需要高水相溶解，在HILIC 模式下，样品需要高有机相溶剂，否则会出现容积 效应导致峰型不好。