【飞诺美色谱】腌肉中 9 种 N-亚硝胺类化合物的分析方法

摘要：本实验优化了 GB 5009.26-2016 熟肉制品中 N-亚硝胺类化合物的前处理方法，采用

QuEChERS 方法结合气相色谱串联质谱（GC-MS）对腌肉中的 9 种 N-亚硝胺类化合物进行

了测定。样品经乙腈和 QuEChERS 提取包提取后，用 Cleanert Nitro 亚硝胺专用净化管进行

净化，ZB-WAX(30 m × 0.25 mm × 0.25 µm)色谱柱进行检测，外标法定量。结果表明，当加

标量为 0.4 mg/kg 时，回收率在 90% ~ 120%之间，按照 3 倍信噪比计算，9 种亚硝胺的方法

检出限在 2 µg/kg ~ 80 µg/kg 之间。能够满足检测要求。

关键词：腌肉；N-亚硝胺；QuEChERS；ZB-WAX

样品信息

表 1. 9 种 N-亚硝胺样品信息

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

气相色谱串联质谱仪（GC-MS）。

试剂材料

乙腈、二氯甲烷为色谱纯；

提取管：MS-MG5054（内含无水硫酸钠和氯化钠）；

净化管：Cleanert Nitro 亚硝胺专用净化管（P/N：MS-NT02）；

9 种 N-亚硝胺物质混合标准品：二氯甲烷稀释。

前处理方法

样品提取

称取 5 g 样品置于 50 mL 离心管中，加入 10 mL 水和 10 mL 乙腈，涡旋 1 min

混匀样品，加入 4 颗玻璃珠均质子，再加入提取包（MS-MG5054），振荡 1 min，

10000 rpm 离心 5 min，上清液待净化。

样品净化

取上述待净化液 1 mL 加入到 Cleanert Nitro 净化管中，涡旋混匀，8000 rpm

离心 5 min，准确移取上清液 0.5 mL 于 40℃氮吹至近干（剩余 100 µL 左右），用二氯甲烷定容至 1 mL，过 0.22 µm 尼龙针式过滤器过滤，待检测。

实验需注意氮吹时不可以吹干液体，否则会对目标物造成很大损失，导致回

收率低。

基质标准工作溶液配制

取高浓度混合标准溶液，用空白样品基质溶液制成 0.1 µg/mL 的基质标准工

作溶液。

色谱条件

色谱柱：ZB-WAX，30 m × 0.25 mm × 0.25 µm；

程序升温：初温 50℃保持 4 min，以 5℃/min 速率升至 100℃，再以 20℃/min

的速率升至 250℃保持 5min；

后运行：240℃运行 5 min；

进样量：1 µL；

进样口温度：250℃。

质谱条件

溶剂延迟：8 min；

离子信息：见表 2。

表2. 9种亚硝胺物质离子信息

实验结果

由表 3 可知，采用 Cleanert Nitro 净化管净化腌肉样品，回收率在 90% ~ 120%

之间，能够满足检测要求， RSD 小于 15%，重复性良好。由图 1 ~ 图 4 可知，

Cleanert Nitro 净化管的净化效果良好，并且，使用 ZB-WAX 气相柱检测 9 种 N-

亚硝胺，分离度良好，保留时间稳定。

表 3. 腌肉样品加标回收实验结果（添加水平 0.4 mg/kg，n=3）

实验谱图

图 1. 0.1 µg/mL 9 种亚硝胺混合标准溶液色谱图

图 2. 0.1 µg/mL 基质混合标准工作溶液色谱图

图 3. 腌肉基质空白色谱图

图 4. 0.4 mg/kg 腌肉基质加标色谱图

结论

本实验建立了腌肉基质中 9 种 N-亚硝胺的 QuEChERS 前处理方法，并结合

GC-MS 对样品进行了检测。实验表明，对于加标量为 0.4 mg/kg 的加标样品，9

种 N-亚硝胺类物质的回收率在 90% ~ 120%之间， RSD 值均小于 15%，能够满

足实验要求。按照 3 倍信噪比计算，9 种 N-亚硝胺的方法检出限在 2 µg/kg ~ 80

µg/kg 之间。说明 QuEChERS 方法可以用于腌肉中 9 种 N-亚硝胺物质的检测。

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