质控样在检测

关于开展2012年国控重点污染源监测质控样考核暨能力验证工作的通知 总站统字 [2012]68号 各省(自治区、直辖市)环境监测中心(站)、新疆生产建设兵团环境监测中心站： 　　为了解掌握各级监测站总量减排主要污染物和典型重金属污染物的监测能力现状，促进监测水平提升，根据《2012年全国环境监测工作要点》(环办[2012]22号)有关要求，我站于2012年5月-8月组织开展国控重点污染源监测质控样考核暨能力验证工作。 　　现将《2012年国控重点污染源监测质控样考核暨能力验证工作方案》(见附件1)印发你们，请按方案要求，认真组织实施。总站外网文件通知栏目下，可下载本方案电子件。 　　为保证考核工作顺利，信息及时沟通，请各省确定1名联系人，于2012年4月23日前将联系信息(见附件2)发至我站环境统计与污染源监测室邮箱。 　　联系人及联系方式： 　　秦承华 010-84943161 　　传真：010-84943136 E-mail：wry@cnemc.cn 　　通讯地址：北京市朝阳区安外大羊坊8号院(乙)中国环境监测总站环境统计与污染源监测室 100012。 　　附件1: 2012年国控重点污染源监测质控样考核暨能力验证工作方案 　　附件2:污染源质控样考核联系信息 　　中国环境监测总站 　　二○一二年三月廿八日 2012年国控重点污染源监测质控样考核暨能力验证工作方案 　　根据《2012年全国环境监测工作要点》(环办[2012]22号)有关要求，我站于2012年5月-8月组织开展国控重点污染源监测质控样考核暨能力验证工作。 　　一、工作目标 　　了解掌握各级监测站总量减排主要污染物和典型重金属污染物的监测能力现状，促进监测水平的提升。 　　二、考核内容 　　1. 废水质控样考核 　　化学需氧量(COD)、氨氮(NH3-N)。 　　2. 废气质控样考核 　　二氧化硫(SO2)、氮氧化物(NOx)。 　　3. 废水重金属考核 　　汞(Hg)、铅(Pb)、镉(Cd)、铬(Cr)、砷(As)。 　　三、考核范围 　　1. 废水质控样考核 　　各省级环境监测中心(站)，以及辖区内承担废水国控重点污染源监测的地市级环境监测站。 　　2. 废气质控样考核 　　各省级环境监测中心(站)，以及辖区内承担废气国控重点污染源监测的地市级环境监测站。 　　3. 废水重金属考核 　　各省级环境监测中心(站)，重金属污染防治重点企业所在225个地市级环境监测站。 　　四、考核方式与进度安排 　　1.考核样品的发放 　　总站定制考核样品，统一进行编号，分废水、废气考核样品2批次，5月向各省级站快递发放。 　　废水考核样品的发放数量：每个考核项目，每个被考核站高、低浓度样品各1支。 　　废气考核样品的发放数量：10个以下地市的省份，每省1瓶4L气体样品 10-15个地市的，每省2瓶4L气体样品 15个以上地市的，每省3瓶4L气体样品。 　　随每批考核样品一同快递的材料包括：《考核样品信息表》(1份)、《作业指导书》(1套)、《结果报告单》(1套)、《考核样未能测试情况说明》(1份) 上述材料的电子件，请登录总站外网文件通知栏目下载。 　　2. 省级站组织本辖区的考核 　　5-8月，各省级站负责组织本辖区的考核工作：向各地市站分发、交接废水考核样品，携带废气考核样品钢瓶到各地市站供其测试 8月20日前汇总结果报总站。 　　五、注意事项 　　1.对废气考核样品，考核工作完成后，由省级站负责将气体钢瓶快递回我站。请务必寄回，对不寄回的省，将扣减明年监督性监测经费。邮寄地址：北京朝阳安外大羊坊8号(乙)中国环境监测总站 邮编：100012 联系人：秦承华 电话：010-84943161。 　　2.接到考核样品后，请各省级站对照《考核样品信息表》(随考核样品一起发放)，检查确认样品数量及状态 如果考核样品发生损坏，请及时联系总站补发。如2012年6月1日前尚未接到考核样品，及时联系我站。 　　3.每个废气考核项目，每个被考核站高、低浓度样品各1种，校准仪器用的标准样品请各站自行准备 同一种浓度水平SO2或NOx发放2个或3个气体钢瓶的省份，每个被考核站无需测试各个气体钢瓶，仅测试其中一瓶即可，但应准确记录所测试气体钢瓶的样品编号，随考核结果一并上报。 　　4.为保障所有站的考核，各被考核站要节约使用气类考核样品，每个被考核站只用一种原理的仪器测试，读数稳定后应尽量缩短测试时间 省级站应现场监督各被考核站节约用气，确保辖区内各地市级站均能有足够的考核样品。 　　六、结果报送与通报 　　各被考核站测试结束后，填写附表中的《结果报告单》、《未能测试情况说明》(无未测试样品的，不报此件)，经三级审核签字、盖章后，将原件、电子件报送省级站汇总。 　　2012年8月20日前，省级站负责汇总本辖区内所有被考核站的《结果报告单》、《未能测试情况说明》报送总站，同时将电子件发至wry@cnemc.cn。 　　总站汇总考核结果，通报考核情况。

有媒体报道，今年5月，浙江宁波、舟山等地上百名消费者在食用淡菜(贻贝的俗称)后，出现了腹泻、呕吐等症状。后经检测发现，他们食用的来自福建省福清的淡菜受到了腹泻性贝类毒素的污染。因受污染，淡菜不得不退市一个多月。6月，浙江省海洋与渔业局联合发出《关于进一步加强采捕期淡菜质量安全监管工作的通知》明确要求，重点抽检麻痹性贝类毒素、腹泻性贝类毒素和大肠杆菌。 　　“有毒赤潮藻类产生的毒素经贝类或鱼类摄取后在其体内转化累积为贝类毒素，被人摄食后就会危及食用者的身体健康和生命安全。”中国计量科学研究院生物研究室傅博强博士介绍了水产品受有毒赤潮污染的情况。全世界每年由有毒鱼类、贝类引起的食物中毒事件超过两万件，死亡率为1%。其中麻痹性贝毒(PSP)和腹泻性贝毒(DSP)是分布最广、危害最大的贝类毒素。 　　国家标准《农产品安全质量 无公害水产品安全要求》(GB 18406.4-2001)对水产品中的贝类毒素含量进行了规定：麻痹性贝毒限量≤80μg/100g，腹泻性贝毒限量≤60μg/100g。其实，贝类毒素离我们的日常生活并不遥远。据国家海洋局东海环境监测中心2004～2005年的研究，长江口水产品贝类毒素检出时段主要集中在5～6月和8～9月，麻痹性贝毒和腹泻性贝毒的检出率分别在5%和12%左右，敏感种类为养殖的紫贻贝。我国还是亚洲贝类产品出口第一大国，2010年我国贝类产品出口量26.07万吨，出口额11.58亿美元，在世界贝类产品出口总量中占14%。目前世界各国都制定了严格的贝类毒素限量要求。在我国贝类产品的出口贸易中，需要采用相关的标准方法对贝类毒素的含量进行检测，严格执行我国及贝类进口国关于贝类毒素的限量标准。不管是在我国水产品市场上还是在国际贸易中，准确检测贝类产品中贝类毒素的含量对保障食品安全、保障国际贸易的公平公正都显得格外重要。 　　傅博强介绍，目前世界上普遍采用“小鼠生物法”(Mouse Bioassay，MBA)作为测量贝类毒素的参考方法，我国有关国家标准也是采用的这种方法。所谓“小鼠生物法”，就是以小鼠为实验对象，给小鼠腹腔注射贝类毒素，观察贝类毒素对小鼠的致死剂量，来计算贝类毒素的整体毒力。“但该方法的测定结果会受到小鼠的种属、性别、健康状况等个体影响，可能会产生假阳性或假阴性的结果。而且小鼠生物法不能得出具体含有哪几种毒素及其质量含量。”傅博强表示，“小鼠生物法”存在的这些弊端让研究者开始着力研究新的测量方法。“小鼠生物法在应用时如果同时测定含贝类毒素的基体标准物质作为质控标准，则会在一定程度上保证小鼠法测定结果的可靠性。目前世界各国都在开发建立非生物依赖的仪器分析方法如质谱法进行贝类毒素含量的测定。” 　　中国计量院也开展了这方面的研究。由傅博强主要负责完成的“食品安全相关贝类毒素含量测量标准方法及标准物质研究”在国内率先建立起了贝类毒素检测的质控标准，研究了可替代现行国家标准中小鼠生物法的麻痹性贝类毒素液相色谱串联质谱分析方法，检出限达10～11g数量级。同时，他们还研制了国内首批麻痹性贝类毒素基体标准物质和腹泻性贝类毒素基体标准物质，不确定度达到欧盟水平。 　　据介绍，项目的研究成果已经在日常检测中得以应用。该项目研制的麻痹性贝类毒素基体标准物质和腹泻性贝类毒素基体标准物质已被山东出入境检验检疫局、厦门出入境检验检疫局和深圳出入境检验检疫局作为日常贝类毒素检测的质控标准，保证了我国口岸进出口贝类中麻痹性贝类毒素和腹泻性贝类毒素检测结果的可靠和可比，保障了我国贝类产品的出口和进口贝类的食品安全，维护了国际贸易公平和人民的生命安全。

随着我国艾滋病检测工作的持续发展和艾滋病检测服务可及性 的不断扩大，艾滋病检测实验室数目逐年增长，检测能力不断下沉。承担艾滋病检测工作的实验室已遍及全国各级医疗、疾病预防控制、采供血、妇幼保健、出入境检验检疫、军队等各个系统。 检测实验室的全面质量控制对获得客观、公正、科学的检测结果非常重要， 检测质量水平的高低，反映了实验室的综合实力。近日，为进一步规范和提升我国艾滋病检测实验室的工作质量，保证艾滋病检测结果的准确性和可靠性，中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心组织专家编写了《全国艾滋病检测实验室质 量控制指南》，从实验室质量管理和生物安全管理、室内质量控制和室间质量评价三个层面，为艾滋病检测实验室所开展检测项目的质量 控制策略和质量控制措施进行了系统全面的技术指导。艾滋病实验室使用的常规检测技术主要包括HIV抗体和抗原检测、CD4+T淋巴细胞计数HIV核酸检测、和HIV基因型耐药检测。&zwnj HIV抗体、抗原检测HIV CD4+ T 淋巴细胞计数检测HIV核酸检测HIV基因型耐药检测简介实验室使用的艾滋病筛查检测方法包括化学发光免疫检测、酶联免疫检测和快速检测。CD4+T 淋巴细胞计数常用的检测方法是流式细胞术（Flow cytometry，FCM）和便携式 CD4+ T 淋巴细胞仪。HIV 核酸检测分为对 RNA 和 DNA 的检测，以及急诊HIV-1 核酸即时检测（HIV-1 molecular point-of-care Testing，POCT）。目前常用的 HIV-1 RNA 检测方法包括实时荧光定量 PCR 扩增技术和 RNA 捕获探 针等温扩增技术。HIV-1 DNA 检测的主要方法有实时荧光定量 PCR、Alu-PCR 和数字 PCR 等。包括从样本采集及处理、核酸提取及纯化、 目的基因片段扩增、基因序列测定和质量评价、序列比对和耐药位点判读及耐药解释等 全部过程。基因序列测定：一 代 Sanger 测序、二代测序。序列比对和耐药位点判读：Sequencher 5.0 软件、Los Alamos 国家实验室（LANL）HIV 序列数据库 Gene Cutter 工具、BioEdit 软件、MEGA 11 软件等。作用意义用于补充试验的抗体确证检测，以及用于区分新近感染者 和既往感染者的新近感染检测等。准确可靠的 CD4+ T 淋巴细胞检测为评价 HIV 感染者免疫状况、判断疾病进程、评价抗病毒药物治疗效果和估测预后提供了重要指标。 对 HIV-1 的病毒储存 库检测和监测治疗效果等应用均有重要指导意义。耐药突变的产生和发展会影响抗病毒治疗的疗效。因此，及时进行耐药 检测在艾滋病预防与治疗中具有重要作用。对应仪器设备化学发光仪酶联免疫分析仪流式细胞仪PCR仪基因测序仪指南中描述到，导致 HIV 抗体确证检测失控的因素很多，如操作失误、试剂或质控品失效、仪器设 备维护不当等原因。而对于CD4+ T 淋巴细胞计数检测质控而言，吸液不准确竟然是导致检测错误的最常见原因。在实验过程中，样本和试剂的质量、实验操作人员的技能（例如对电压值调试、荧光补偿值的确定、阈值设定、数据获取量、图形分析能力）、仪器状态及数据分析方法等多 种因素均有可能影响流式细胞检测结果。——流式细胞仪的性能质量控制篇——笔者特别摘录出流式细胞仪性能质控相关的部分：2、仪器性能质控 2.1 流式细胞仪2.1.1 检测前的仪器设置 每次开机后，应先检查所有类型流式细胞仪的液路和光路稳定性以及激光管、滤光 器和光电倍增管（PMT）的效率和性能。通过后再进行室内质控检测，质控通过后再进 行标本检测。每次开机和关机应做好仪器保养维护。需定期进行荧光补偿的验证和调整， 由仪器厂家工程师定期进行检测维护。 （1）确定仪器性能大多数台式流式细胞仪在每次实验前应使用生产厂家建议的方法验证校准颗粒（如 标准化荧光微球），以确定仪器性能是否符合规范。 （2）“分析窗口”在“样本空间”中的定位 根据应用需要调整每个参数的荧光信号放大器增益或 PMT 电压设置，以便该应用 程序的常规样本出现在这些直方图通道的范围内（即“分析窗口”）。 （3）设置多色标记光谱重叠的荧光补偿（“颜色补偿”） 荧光补偿是校正一种荧光染料进入滤光片的光谱重叠的过程用于监视另一个荧光 染料的窗口（见图 2-3-1）。在临床上使用的大多数仪器中，这种校正是通过调整流式细 胞仪上的荧光信号补偿来完成的。经过该校正，将不应该是两种荧光抗体双阳性的细胞 群调整到相应的直角荧光象限中，使双阳象限中无荧光重叠。同时，避免过度补偿这是 至关重要的，因为过度补偿可能会导致将双阳性细胞错误地归类为单阳性细胞。该程序 可以手动执行；或者软件可以自动执行。图 2-3-1 荧光补偿示意图 直方图 A1 至 A3 及其各自的示意图 B1 至 B3 说明分别为未补偿、欠补偿和正确补 偿的双色显示器。这个标记为“S”的空心圆表示需要精确颜色补偿的细胞群体。标有 “C”的空心圆表示用于调整颜色补偿设置。如果补偿设置的强度没有超过所分析样本 的荧光强度，该样本将被过补偿（A2、B2）。如果补偿设置的强度超过荧光分析样本的 强度，样本不太可能被过度补偿（A3，B3）。注：在图 A3 和 B3，未染色、补偿粒子和 染色粒子的中值荧光（y 轴）单元格将大致相等。当采用两种及以上抗体组合方案进行淋巴细胞亚群分析时，或当光学检测通道的电 压及增益发生变动时，或当仪器维修保养后，都需要进行荧光补偿调整。按照操作说明 书执行，避免过度补偿。 2.1.2 日常监测：利用 Levey-Jennings 质控图，观察质控品检测的趋势和变化，如果 任何值超出要求的标准差范围，则应重复检测。如果问题持续存在，则调整仪器设置， 或联系相关仪器厂家工程师。 2.2 移液器 定期对移液器进行鉴定并校准，确保移液器精度和准确度在正常范围内。 3. 数据分析质控 3.1 用高亮度的 CD45 和低亮度的侧向散射光确定淋巴细胞。使用 FS-SS 设门检测 CD3\CD4\CD8 时，要求待测样本尽可能新鲜，鞘液和洗液洁净，溶血和洗涤充分。检测 时，可以适当增大前向散射光（FSC）和侧向散射光（SSC）的电压，有助于将淋巴细胞 与碎片及单核细胞明显区分开。 3.2 对淋巴细胞进行设门时，单核细胞不能超过 3%，设门不能过小，应保证门内有 97%以上的淋巴细胞。 3.3 可靠性分析数据符合下面情况视为有效（以质控血样为参照）： 以 CD45 设门时，CD3+CD4+%与 CD3+CD8+%总和应在 CD3+%±5%范围之内； 当两管都有 CD3 的三色试剂检测 CD3+CD4+与 CD3+CD8+T 淋巴细胞时，CD3 的变异 性应小于等于 2%；更换操作者时，用正常血液，或者质控全血进行不少于 5 次重复检 测，实验结果的变异系数应小于 10%。4. 质控品的选择和检测频次 在 CD4+ T 淋巴细胞测定过程中，同时使用室内质控品，可帮助分析和判断仪器的 准备和分析是否均处于最佳状态。稳定的全血样本可用于室内质控品，首选使用商品化 质控品，使用全血质控品时，应按照说明书操作。 质控品应和检测样本同时进行免疫荧光染色，并在样本检测前进行上机测定和数据 分析。如无法获取商品化质控品，实验室宜选择与检测值水平相近的质控品浓度，以保 证检测值的有效性。 检测当日至少做一次室内质控，并至少包括两个浓度水平，CD4+ T 淋巴细胞的绝 对细胞计数应包括低值浓度水平质控。有条件的实验室宜每批检测均进行室内质控。实验室应建立每一批次质控品的靶值和可接受范围，不可直接引用说明书提供的质控范围。 更换新批号质控品前，可通过每日检测 4 次质控品（不同时间点），连续 5 天收集 20 次 数据，计算均值。均值作为新批次靶值，结合既往累计 CV 值推算 SD。应至少选择 13S 和 22S 作为失控判断标准，应有相应的失控纠正措施。5. 室内质控失控原因分析 如果阳性对照超出了既定的预定目标范围，则必须确定偏差的原因。 5.1 吸液不准确是导致检测错误的最常见原因。核查人员是否经过周期性培训和测 评，移液器是否定期校准。 5.2 仪器设置是否按照生产厂家的要求用商业化的校准物质（如荧光微球）校准流式细胞仪并建立档案，监测仪器的性能变化。 5.3 核查试剂是否在有效期内。5.4 全血质控品染色后的活力验证（不使用含固定剂溶血素溶血的情况下），7-AAD（7-氨基放线菌素 D）阴性者为活细胞群，7-AAD 阳性者为细胞膜不完整的死细胞群。 将 7-AAD 阴性细胞群计数为 75%时称为最低细胞活力。对于低于 75%的细胞活力的标 本，使用结合 CD45（评估淋巴细胞、单核细胞和粒细胞死亡）复染进行细胞活力的评 估。 5.5 流式细胞仪的携带污染率是否大于 0.5%。（携带污染率：分析物被仪器由一个检测样本到下一个样本的携带量，从而错误地引起第二个被测样本分析物浓度的增加。） 5.6 流式细胞仪使用后是否根据厂家要求定期进行清洗及维护。检测环节诸多，需要根据具体情况逐项排查。全国艾滋病检测实验室质量控制指南 W020241014482791173322.pdf 精彩预告——流式细胞术在临床/免疫学/CGT中的应用仪器信息网3i讲堂将于2024年10月29日-31日举办第六届流式细胞术网络会议（iCFCM2024）。会议开设流式细胞术在临床免疫学中的应用，邀请领域内杰出科学家、流式技术应用专家、临床检验医学专家、仪器研发技术专家等分享精彩报告。欢迎点击下方链接报名在线参会交流。参会链接https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/icfcm2024/