在化学检测

大家好，我是流式荧光崔工，一个旨在链接与流式荧光相关的朋友，一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。——流式荧光崔工前段时间，有很多新关注崔工公众号的朋友问崔工一个问题，什么是流式荧光检测技术？它的原理是什么？传统的化学发光检测技术又有什么？问崔工这个问题的朋友应该是刚进入到这个行业，还不是很了解这个行业。今天就跟大家聊聊，供大家参考。— 1 —什么是流式荧光检测技术？从百度百科了解到，流式荧光，又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为核心，集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，最多可一管同时准确定量检测2-500种不同的生物分子。具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点。可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。流式荧光检测技术的原理是什么？将荧光标记后的单细胞（或颗粒）悬液进入吸样管，进而随鞘液进入流动室。进入流动室之前的管道变细，迫使鞘液从四周、样本在中心进入流动室，在外加压力的作用下由下向上（或由上向下）直线流动。鞘液充满流动室将样品裹挟，当二者通过流动室喷嘴流出时，压力迫使鞘液包裹的液滴包含单一细胞或颗粒垂直通过检测区。在检测区与液滴垂直的位置设置激光，在与激光垂直的位置设置探测器（透镜等），液流、激光、探测器互相垂直并聚焦于一点实现流体动力聚焦。荧光标记的细胞或颗粒在激光激发下发出散射光和荧光的发射波，散射光和发射光被检测器获取，再经一系列滤光片、光栅处理去除干扰并将光信号经光电转换和放大后输入计算机，并由软件分析处理。而细胞分选则是对荧光标记的目的分子分别加载正或负电荷，当其在随液滴滴落的过程中受到外加高压电场的作用发生偏转而落入接收容器，从而获得目的细胞群。流式荧光检测技术有什么技术特点？1、高通量：将许多种不同荧光编码的微球放在同一反应体系内，一次可同时检测2-500种生理病理指标，这与传统方法的逐个检测相比是质的飞跃。2、高敏感性：流式荧光技术最高的检测下限可达0.01 pg/ml，常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)仅为μg级，比后者检测的灵敏度提高10—100倍。3、线性范围宽：检测的线性范围比常规的ELISA方法高10倍以上，可达3-5个数量级。检测浓度范围为pg-μg级。4、反应快速：因流式荧光技术的杂交或免疫反应在悬浮的液相中进行，反应所需的时间短(从2 h缩短到20—40 min)，杂交后常不用清洗，即可直接读数，所以检测效率高于固相杂交。5、重复性好：杂交发生在准均相液体环境中，其结果稳定，重复性非常好。检测时，抽取其中的100颗微球读数，最终的数据取其均值或中位值，这样可将误差减到最小。6、利于探针和被检测物的充分反应：由于液相环境更有利于保持蛋白质的天然构象，所以也更有利于探针和被检测物的反应。7、操作简便：流式荧光技术平台的整个反应过程只涉及加样和孵育，最后上机读数，操作步骤少，简单易用。— 2 —什么是化学发光检测技术？这里既然是跟流式荧光检测相比较的，那这里的化学发光检测技术指的是化学发光免疫分析技术。化学发光免疫分析：是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。化学发光检测技术的类型及原理化学发光检测技术的类型分为直接化学发光免疫分析，化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。直接化学发光免疫分析用吖啶酯直接标记抗体(抗原)，与待测标本中相应的抗 原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H2O2）和 NaOH使成碱性环境，吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、 发光 。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生 的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。化学发光酶免疫分析酶免疫分析（chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA）是用参与催化某一化学发光反应的酶 如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成 固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物；经洗涤后，加入底物(发光剂)，酶催化和分解底物发光，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。电化学发光免疫分析电化学发光免疫分析 （electrochemiluminescence immunoassay， ECLIA）是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原)，以三丙胺(TPA)为电子供体，在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应，它包括电化学和化学发光两个过程。化学发光免疫分析技术的优势是什么？1、灵敏度高：灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性。化学发光免疫分析能够检出放射性免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质，对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。2、宽的线性动力学范围：发光强度在4-6个量级之间，与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色酶联免疫分析吸光度（OD 值）2.0 的范围相比，优势明显。虽然同位素放射免疫也有较宽的线性动力学范围，但是放射性限制其应用。3、光信号持续时间长：化学发光免疫分析的光信号持续时间可达数小时甚至一天，简化了实验操作及测量。4、分析方法简便快速：绝大多数分析测定仅需加入一种试剂（或符合制剂）的一步模式。5、结果稳定、误差小：样本本身发光，不需要额外光源，避免了外来因素的干扰（光源稳定性、光散射、光波选择器），分析结果稳定可靠。6、安全性好及使用期长：到目前为止还未发现化学发光免疫分析试剂的危害性；另外这些试剂稳定，保存期可达一年之久。以上是对什么是流式荧光技术检测与化学发光技术检测基本原理做了一个说明，供大家参考。【行业征稿】若您有生命科学、医药、临床等行业相关研究、技术、应用、管理经验等愿意以约稿形式共享，欢迎自荐或引荐投稿联系人：刘编辑word图文投稿邮箱：liuld @instrument.com.cn微信：JaysonXY（备注来意：投稿）（本文编辑：刘立东 点击查看KOL主页）

11月14日，陕西省公共检测中心、化学品监测中心揭牌授牌仪式在陕西省生产力促进中心举行。科技部科研条件与财务司司长王伟中，科技部中国二十一世纪议程管理中心副主任周元，陕西省科技厅副厅长邱义路出席会议，仪式由省科技厅副巡视员杜克飞主持。 　　建立公共检测中心和专业化检测中心，是响应省政府进一步整合科技资源，改变目前大型科学仪器设备开发共享总量较低、服务范围相对较窄、仪器设备资源分布不平衡、开展配套服务能力较弱，探索大型科学仪器设备协作共用工作的一项新的举措。建成后的公共检测中心，将以陕西省大型科学仪器设备协作共用网为基础，联合省内60多家专业技术先进的科研、教学和生产单位，通过有效整合相关领域、行业、区域的大型仪器设备及科研技术力量，逐步实现我省部分科研实验室设备整体对社会开放与共享共用，从而在更广大的范围和更深入的领域实现全省科技资源的共享共用，更好地为广大中小企业服务。 　　目前，公共检测中心有陕西省材料分析研究中心、陕西省地质资源与环境检测中心、陕西省化学品检测中心和陕西大仪科技检测中心4个实体机构开展日常分析检测服务业务，陕西省大型科学仪器设备协作共用网的数百台(套)大型科学仪器设备及陕西省分析测试协会近千名专业技术人员作为公共检测服务的技术支撑，可向全社会提供分析检测领域的信息交流、检测服务、专业培训、技术咨询等方面的服务。下一阶段中心将继续整合、建立若干行业专业化检测中心，增强分析检测服务能力 在完善现有分析测试培训体系基础上，在省内其他地区新建若干培训基地 探索建立公共检测远程服务系统。 　　新组建的陕西省化学品检测中心是由西安近代化学研究所分析测试中心、陕西应用物理化学研究所分析测试中心 、西北大学分析测试研究中心、陕西师范大学化学实验教学中心、西安工程大学环境与化学工程学院分析测试中心、陕西省大型科学仪器设备协作共用网管理办公室等六个省内从事化学品科学研究试验机构组成的科技资源协作共享联合体。共有100多台(套)大型科学仪器设备，总价值约1.3亿元，技术专家100余名。中心将联合省域内化学品分析测试技术力量，发挥协作单位大型科学仪器设备的资源优势，提高综合科技资源的利用率，以科学、公正、准确的检测手段，面向社会开展广泛的专业检测服务、学术交流和技术合作，为化学品研发培养分析测试技术人才，提供技术咨询、工程示范和化学危险品的应急处置故障分析等服务。

在实验过程中，影响化学仪器正常工作和稳定性的因素有很多，有些影响在常规检测工作中不易被察觉，当不良影响积累到一定程度，会造成所使用的化学仪器状态发生变化，并直接影响检测结果准确。为提高和保证仪器使用的准确度，化学检测实验室做好仪器的校准、维护、核查工作等是十分必要的。但由于化学检测仪器的复杂性，实验室在仪器设备核查中存在一定的难点。近日，中国合格评定国家认可委员会发布《化学检测仪器核查指南》，旨在阐明化学检测仪器核查的原则，对不同仪器在不同使用阶段的核查重点提出建议，并介绍一些常用化学检测仪器可供选择的方法和手段。《指南》主要涉及在使用化学仪器开展定性定量分析的情况下，化学仪器核查的技术和方法指导，适用于化学检测过程中常用的化学仪器，对规范化学检测实验室的仪器核查起重要作用。 点击查看