精炼一级玉米油

介绍01为加快粮食产业经济发展，推进粮食产业供给和结构性质改革，国家粮食局推出“优质粮食工程”，并开展“中国好粮食”行动。睿科集团积极响应政策的同时，凭借丰富的实验室经验，针对相关政策标准制定了系列解决方案，并将各种自动化设备应用于前处理过程，尽可能地帮助实验员提高工作效率，保证粮油产品检测的准确性。值此世界粮食日（2021年10月16日）来临之际，我们分享用Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪分析粮油中玉米赤霉烯酮的解决方案。试样经过90%乙腈水溶液提取，提取液经离心、稀释后用含有玉米赤霉烯酮特异抗体的免疫亲和柱自动净化。用5 mL水淋洗柱子将免疫亲和柱上的杂质除去，以甲醇洗脱免疫亲和柱。将洗脱液在55°C条件下氮吹干，用1 mL初始流动相定容，经高效液相色谱仪上机分析。图-1玉米赤霉烯酮结构式本应用文章参考GB5009.209-2016《食品中玉米赤霉烯酮的测定》第一法，采用免疫亲和柱净化，高效液相色谱检测，建立了复杂粮油样品基质中玉米赤霉烯酮高灵敏度的前处理和分析方法，得到四种常见粮油基质中玉米赤霉烯酮的加标回收率在88.0%-112.0%之间，RSD值小于5%。仪器与耗材02Auto Prep 200全自动液体样品处理工作站；Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪 ；Auto EVA 80 全自动平行浓缩仪；玉米赤霉烯酮免疫亲和柱 (Romer，1500ng/3mL)；高效液相色谱: Waters ACQUITY UPLC I-Class配备大体积流通池；甲醇（Merck，色谱纯）；乙腈（Merck，色谱纯）；吐温-20（Sigma，试剂纯）；超纯水（Waston）；PBS盐包配标净化浓缩标准曲线配制03使用Auto Prep 200全自动液体样品处理工作站可实现标准品的全自动化配制，将单标母液(1000 mg/L)通过工作站的直接稀释模式，配制成浓度为10 mg/L的工作中间液，紧接着可通过程序设置，吸取该工作液，配制一条浓度分别为0.01 mg/L，0.02 mg/L，0.1 mg/L，0.2 mg/L和0.5 mg/L的标准工作曲线。图-2. Auto Prep 200 液体工作站配标程序样品提取与前处理04大米、玉米、小麦样品准确称取5 g粉碎过的样品于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈-水溶液(9:1)(v/v)，涡旋震荡提取20 min，以7000 r/min的转速离心5 min；取5 mL上清液于试管中，加入20 mL 0.1%吐温-20的PBS缓冲液混匀，以7000 r/min的转速离心5 min，取10 mL上清液于80 mL上样管中，待用。玉米油样品准确称取5 g样品于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈-水溶液(9:1)(v/v)，涡旋震荡提取20 min，以5000 r/min的转速离心5 min；余下步骤同上。固相萃取净化条件全自动固相萃取仪Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪固相萃取柱玉米赤霉烯酮免疫亲柱 (1500ng/3mL)淋洗超纯水洗脱甲醇表-1 固相萃取净化条件以2 mL/min的速度精确上样10 mL待测液，5 mL水清洗样品瓶，5 mL水淋洗免疫亲和柱，气推30 mL吹干免疫亲和柱，推速为80 mL/min。最后用2 mL甲醇以0.5mL/min的速度洗脱样品，收集洗脱液用Auto EVA 80 全自动平行浓缩仪于55°C、1 L/min条件下吹干，用初始流动相定容至1 mL，过滤膜上机分析。详细步骤见图-3。图-3. Fotector Plus 玉米赤霉烯酮免疫亲和柱净化方法检测条件05色谱柱Waters BEH-C18(2.1×100 mm,1.7 um)流速0.200 mL/min流动相水:甲醇:乙腈=46:8:46柱温35°C进样体积10 μL梯度洗脱等度洗脱荧光检测器激发波长303nm，发射波长440nm表-2 玉米赤霉烯酮液相色谱检测条件样品测试06分别取大米、玉米、小麦样品各5g，添加20 ug/kg的玉米赤霉烯酮标准品，进行上述步骤的前处理净化。取空白玉米油样品5 g，添加20 ug/kg的玉米赤霉烯酮标准品，进行上述步骤的前处理净化。样品回收率如下表-3所示：表-3添加水平为20 ug/kg样品回收率结果结果与讨论071.样品提取液pH对回收率的影响只用纯水稀释样品提取液进行上述净化步骤，样品中的加标回收率只有71-78%；若采用0.1%吐温-20的PBS缓冲液进行样品提取液稀释，样品回收率为88-112%。2.洗脱速度的影响采用1 mL/min的洗脱速度，洗脱效果不佳，回收率在72%-81%；降低洗脱速度至0.5 mL/min，洗脱效果有明显提升，回收率在88-112%。因此洗脱速度不宜设置得过快。3.乙腈提取液用PBS缓冲液稀释后容易变浑浊，用滤纸过滤混合液效果不佳，因此建议采用高速离心的方式使混合液变澄清以利于后续的过柱。4.谷物中离心完成后，不可放置过长时间，否则谷物容易重新吸水，可能导致提取液的浓度过高，使样品的回收率偏高，影响测试结果。5.固相萃取进行提取液净化前，特别对于偏酸或偏碱性样品，应用PBS缓冲溶液（pH=7.4）进行稀释后上机，否则可能会导致回收率偏低。总结1. 采用高通量全自动固相萃取仪法，准确性、重复性、再现性均满足符合GB 5009.209-2016 要求。2. 采用Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪对样品进行检测能同步进行6个样品净化，连续自动处理60个样品，做样通量高；同时可无人值守，提高了工作效率。此外还可避免工作人员因操作失误导致的检测偏差。3. 睿科 Auto Prep 200全自动液体工作站可实现混标、标准曲线的自动配制，全程无需人为值守，让实验人员远离有毒有害的化学物质。4. 睿科Auto EVA 80 全自动平行浓缩仪处理通量高，80个样品可同时进行氮吹，实验平行性好；采用氮吹针自动追随液面的设计，无需手动调节氮吹针且耗气量小，省时省力。

伴随市场竞争越来越激烈，科技研发在企业发展中所占的地位越来越重要。科技研发不断使企业焕发新活力，使企业持续保持有利竞争优势，推动企业长久、稳定发展。国内知名玉米油品牌长寿花自创立之初便深知科研对企业发展的重要性，开启了民企研发的先河，在国内民企行业首次建立了研发中心。　　据了解，长寿花在发展之初便致力研发符合消费者需求的高品质玉米油。为此，长寿花不断对技术进行创新，不断建设生产线，并首开国家民营企业研发之先河建立了国内领先的专业研发中心，为我国民营企业的研发之路指明了方向。研发中心内配置了先进的研发设备，特聘专业研发人才指导研发工作，不断增强长寿花的自身研发实力 同时研发中心的建立为长寿花持续、稳定走在自主研发道路上提供了可靠保障。　　　　自此之后，长寿花的科技研发之路越来越顺利、越走越宽广，在研发方面所投入的力量越来越大。继首个研发中心之后，长寿花又斥巨资建设了高标准的国家级实验，该实验室总面积2300平方米，主要负责油脂成品的生产检验及出厂检验。经过不断发展，该实验室的设备已达到国际一流水平，拥有高效液相色谱仪、安捷伦气相色谱仪、近红外分析仪、原子吸收光谱仪、可见紫外分光光度计等120余台(套)设备，先进设备为长寿花研发人员快速提供了准确的检测数据，确保玉米油研发工作顺利、稳定进行，为长寿花持续走在行业发展前沿提供了坚实可靠的科技保障。　　除此之外，长寿花还为科研提供大力的资金支持，每年以不低于销售收入5%的资金投入到企业技术中心的建设和研发中，保证玉米油各项科研工作有序开展，从而为消费者提供质量安全、品质一流的健康、营养玉米油。　　长寿花创新发展在国内民营企业领域首个建立专业研发中心既开创了自己的专业研发之路，同时也为后续研发工作的开展提供了有利保障，使品牌影响力不断提升，稳居国内玉米油行业发展前列。

一组3个样本，从左至右分别为地沟油原始油、脱色处理后的油、脱臭处理后的油，图中包含了煎炸老油、泔水油、阴沟油等各个种类组别。从感官上看，不少样本的地沟油经过脱色脱臭精炼处理后，几近正规食用油。　　东方网记者吴颖10月20日报道：浑浊发臭的地沟油经过精炼，竟然符合国家食用油标准。一段时间以来，公众把视角聚焦地沟油检测标准。东方网记者了解到，上海科研机构已经初步建立一种快速筛查法，能够在1-2分钟内对地沟油进行简单筛选，专家同时预计“近期要形成百分之百科学准确的、具备执法依据的检测标准还非常困难”。　　地沟油“变身”麻油可能性大　　业内人士告诉东方网记者，地沟油返回餐桌要经过收集、运输、初炼、流通、精炼、再流通等多个环节，目前收购一吨原始地沟油的花费在4000、5000元左右，而从事地沟油精炼的地下工厂出厂价8000元左右，加之炼耗部分，精炼工厂每吨油利润空间在千元上下。　　对于地沟油重返餐桌的去向，据透露其“变身”麻油的可能性很大。“一吨食用大豆油价格万元，一吨麻油可以卖到27000元左右，更重要的是麻油颜色深重，又有气味掩盖。”　　东方网记者采访发现，不合理的烹饪习惯和合法企业违法勾当也直接助推了地沟油重返餐桌。　　在物质贫乏的年代，普通家庭对食用油倍加珍惜，煎炒烹炸常常反复用油。据悉，如今即便在五星级大酒店也依然保留了使用老油的习惯，“如果老油颜色深了，饭店都会自己过滤，或者用于红烧等重色味的菜，最后还可以用来炸辣椒油。”酒店饭店的初衷，除了节约成本，还因为老油香气足，尤为符合国人的餐饮需求。　　此外，相关部门执法过程中发现，一些具有正规经营资质的厂家或公司在“环保、科技”合法外衣的掩护下，干起了违法勾当。此前，上海就曾查处多起相关案件，不法分子以提炼柴油等各种名目掩饰非法收购倒卖地沟油。据了解，在外省市某些地区，一些合法生产企业也涉足地沟油勾当。“饲料油厂正常业务就会接触地沟油，大型油罐车进出厂区十分正常，厂里经过精炼和脱脂的油基本达到合格食用油标准，转手下家就有可能重返餐桌，厂方还可以以不了解客户购买后的产品去向来推卸责任。”　　精炼地沟油多数符合食用油标准　　地沟油横行市场，科学检测就素手无策了吗？　　学界对地沟油定义尚无定论，广义的概念为一切废弃食用油，具体主要包括来自餐厨废油脂的泔水油(或称潲水油)、煎炸老油、阴沟油三大类。在上海市粮食科学研究所实验室，东方网记者看到了9种一组分类放置的地沟油，分别为泔水油、煎炸老油、阴沟油的原油及经过脱色、脱臭处理的精炼油。从感官判断，经过脱色、脱臭处理的精炼地沟油清澈透亮，几乎和正规食用油没有区别。　　研究人员介绍，从2010年7月开始，上海市科委正式立项研究“地沟油”检测方法，建立了国内最大规模的地沟油样品库。截至目前，课题组收集样品逾千个，其中既有原始地沟油，也有在上百个市场流通的疑似精炼地沟油，尤其对上海及周边江浙地区基本达到全覆盖。　　“绝大多数的地沟油经过过滤、脱色、脱臭精炼处理后，都能够达到国家食用油标准。”实验显示，对照现行的国家《食用植物油卫生标准》(GB 2716-2005)，精炼地沟油酸价、过氧化值等理化指标非常接近或完全达到国家标准。而现有的各种地沟油检测方法都存在一定缺陷，或特征指标专一性不强，或检测灵敏度不高，或检测准确性不高，无一能成为地沟油掺伪检测的有效监管工具。　　2分钟快速筛查法初步形成　　油脂氧化程度可以反映油脂质量劣变和新鲜度，何种指标能够对地沟油进行差异化鉴别？据介绍，地沟油加工过程能够去除游离脂肪酸，降解或转换氢过氧化物，传统检测油脂劣化的酸价、过氧化值等指标难以发挥作用。为此，上海市粮食科学研究所在国内率先提出、基本论证了地沟油特征指标——氧化甘油三酯聚合物，并建立了检测方法。实验表明，氧化甘油三酯聚合物在地沟油精炼过程中“只增不减”，特别是据此对精炼煎炸老油与精炼阴沟油检测准确率几近100%。　　不过，研究人员坦言，这种方法对泔水油的检测还没有完全的把握，特别是对氧化程度不高的泔水油，加之不法商贩往往将精炼地沟油与好油掺混，在检测过程中可能误判。　　在研究高等级检测方法的同时，上海市粮食科学研究所还锁定快速筛选法的研究。目前，一种2分钟快速筛查地沟油的方法初步形成。科研人员采用低场核磁技术，检测了上百个样品的老油和阴沟油，准确率几乎100%，对泔水油的准确率在70%左右。配合正在研制中的快速检测仪器，这种方法对日后一线执法工作帮助较大。　　“未来地沟油的检测可能采取多种指标组合。”专家判断，“真正要形成具备执法依据的检测技术还需时日”，“在有科学准确的仲裁检测方法作为支撑之前，快速筛选法也难以单独发挥大作用”。