细胞膜富集提取物

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细胞膜富集提取物相关的耗材

  • Seahorse XF 细胞膜渗透剂
    Seahorse XF 细胞膜通透剂 (PMP) 是一种专利试剂,可通透化培养基中的完整细胞,可在选择性地靶向细胞质膜的同时保持线粒体膜完整,能够实现对线粒体功能关键组分(包括转运体、酶和电子传递链配合物)的详细表征。该试剂也可用于有关细胞通透的其他实验,例如穿孔膜片、染料负载和肌肉生理学实验。了解关于 XF 技术工作原理的更多信息仅限研究使用。不可用于诊断目的。PMP 可选择性地靶向细胞质膜,性能优于其他基于表面活性剂的通透剂。无需分离线粒体即可研究线粒体功能。仅需极少优化即可对 1.0 nmol/L 的大多数细胞类型进行分析。该产品能够使每次分析获得一致的结果。
  • VWR实验室细胞膜质胶塞
    用于试管或锥形烧瓶中的微生物样本和组织培养的塞子。透气可在最高200℃的温度下进行高温高压灭菌过滤细菌袋装和纸板箱装,易于搬运且节省空间具有特殊形状或标准形状
  • 细胞小室培养板
    细胞小室运用选择指南应用细胞膜孔径ADME(化合物穿过肠上皮细胞屏障转运和渗透)Caco-2、MDCK0.4 μm共培养和细胞分化、细胞成像原代细胞、肿瘤干细胞0.4 μm、1.0 μm大分子或病毒转运、分泌1.0 μm、3.0 μm细胞迁移和侵袭(血管生成)、细胞趋化作用(迁移)或内皮迁移 轴突增生、共培养内皮细胞、白细胞 神经元3.0 μm细胞迁移和侵袭淋巴细胞、巨噬细胞3.0 μm、5.0 μm肿瘤细胞迁移和侵袭 血细胞趋化作用或经内皮细胞迁移、共培养肿瘤衍生细胞、白细胞 肿瘤干细胞、MSCs8.0 μm细胞小室参数规格配套小室数量(个/块板)小室直径(mm)每孔容积(ml)小室内体积(ml)小室膜生长面积(cm² )6孔板6242.61.54.6712孔板12121.50.51.1224孔板126.50.60.10.33100mm皿17513944膜孔径(um)膜密度(孔/cm² )0.41x1081.02x1073.02x1065.04x1058.01x105PET(聚酯)膜带盖产品编号 TC处理产品编号 未TC处理产品名称孔径(μm)膜透明度包装规格个/盒个/箱7231217231316孔细胞小室0.4不透明66072412172413112孔细胞小室0.4不透明1212072512172513124孔细胞小室0.4不透明121207234217234316孔细胞小室1全透明66072442172443112孔细胞小室1全透明1212072542172543124孔细胞小室1全透明121207230217230316孔细胞小室3半透明66072402172403112孔细胞小室3半透明1212072502172503124孔细胞小室3半透明121207233217233316孔细胞小室8全透明66072432172433112孔细胞小室8全透明1212072532172533124孔细胞小室8全透明12120PC(聚碳酸酯)膜带盖产品编号 TC处理产品编号 未TC处理产品名称孔径(μm)膜透明度包装规格个/盒个/箱7231017231116孔细胞小室0.4不透明660724101724111 12孔细胞小室0.4不透明1212072510172511124孔细胞小室0.4不透明121207230017230116孔细胞小室3半透明66072400172401112孔细胞小室3半透明1212072500172501124孔细胞小室3半透明1212072420172421112孔细胞小室5半透明1212072520172521124孔细胞小室5半透明121207233017233116孔细胞小室8半透明66072430172431112孔细胞小室8半透明1212072530172531124孔细胞小室8半透明12120PC(聚碳酸酯)膜(TC处理)产品编号产品名称孔径(μm)膜透明度包装规格个/盒个/箱726001100mm 细胞小室 PC(聚碳酸酯)膜 带盖 TC3半透明110细胞小室在细胞实验中很常用,如:共培养实验、趋化实验、细胞迁移实验、细胞侵袭以及药物转运。其中,通透性支持物可以有效改善极性细胞的培养,因为这些支持物允许细胞从其基底面和顶面分泌和吸收分子,从而以更为自然的方式进行代谢,最大程度的模拟体内环境以培养某些特殊的细胞系。聚碳酸酯(PC)膜孔密度较高,允许通过膜完成更多交换,而且具有极佳的细胞粘附特性,所以适用于转运研究和其他需要实现最佳细胞生长的应用。 另外PC膜也非常适用于屏障分析。 在较长时段内相比其他膜材料,具有更高、更持续且更稳定的跨上皮电阻 (TEER) 值。PC膜无需基质包被即可培养大多数类型细胞。 PET膜PET膜孔密度较低,具有更好的光学清晰度,有利于显微镜细胞观察以及细胞成像。创新的边缘设计,加样方便丰富的配套多孔板选择:6孔、12孔、24孔PC膜:低吸附率,减少小分子蛋白和其他化合物的损失PET膜透明度极佳,具有更好的光学清晰度透明的PET膜方便观察细胞状态PC膜不易撕破或卷曲,且取出小室时操作方便与大部分固定与染色时用的溶剂相容使用指南使用时先将培养液加入到多孔板的孔中,将嵌套放入,再将含有细胞的培养液加入嵌套内部;预先平衡:培养液加入到多孔板中,再加入嵌套,然后放入培养箱中培养至少一个小时,也可以过夜;定期检查培养液体积,并按需补加新鲜培养基。但细胞层可以用基本细胞学方法在嵌套中直接固定和染色。注避免使用可以溶解PC膜的溶剂。在嵌套中直接固定和染色细胞,可以用解剖刀将膜割下做长期保存。注意事项在通透性支持物(膜)上生长的细胞的贴附对于起始接种密度很敏感,所以初次使用应接种不同密度保证最佳生长;培养过程中通过上层和孔之间的空隙取液、加液时一定要小心、缓慢操作、避免膜的损坏; 在培养细胞之前将通透性支持物在培养基中孵育可以改善细胞的贴附和分布。 下层培养液和小室间常会有气泡产生,一旦产生气泡,下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失,所以在接种细胞的时候要特别留心,若产生气泡,要将小室提起,去除气泡,在将小室放进培养板。

细胞膜富集提取物相关的仪器

  • 通过测量细胞膜电容和介质电导率,Aber在开发和使用电介质仪器监测生物质方面有着开创性的工作成果。生物技术市场中,我们最新推出的FUTURA系列产品被认为是在线测定生物反应器中活细胞浓度的有力武器。发酵罐中具有完整质膜的细胞在电场作用下可以作为微型电容器,其质膜的非导电性能够使电荷积聚。由此产生的电容可以被测量,且电容的大小取决于细胞的类型,并与这些活细胞的膜结合体积大小成正比。 Aber的技术可以将电容转换成实时生物量的读数,通常为Cells/mL或者g/L。此外,其他的单位可以由原始电容测量数据计算而得;这与选择的应用有关。 FUTURA也可以测量介质的电导率,单位是毫西门子每厘米(mS/cm)。电导率并不示测量生物量的指标,而是由细胞悬浮液产生化学离子的相关指标,如pH控制及其他发酵过程。
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  • 实时单细胞多模态分析仪功能概述 单细胞研究对于理解细胞的组成、生理行为与功能的多样性具有重要意义,基因组、转录组、蛋白组、代谢组学等分析技术为单细胞研究提供了有力工具。实时单细胞多模态分析仪可以实时、连续、定量检测单个活细胞的小分子含量及酶活性。 核心特点 主要性能 实时单细胞多指标检测:实时检测单个活细胞内小分子含量(如葡萄糖、乳酸、ATP、胆固醇、Ca2+、K+等)及酶活性 (葡萄糖苷酶、鞘磷脂酶、乳酸脱氢酶等),可匹配160余种商品化试剂盒;实时亚细胞原位检测:在亚细胞水平(胞质、胞核、胞膜)实时连续、原位检测;超微量提取、注射:单细胞水平提取细胞器(如溶酶体、线粒体)、胞质进行质谱或其它平台的联用分析;单细胞注射药物、代谢剂等,并进行药效评估;活体水平检测:活体水平实时检测生化指标(用药前后、中医药针灸刺激前后)的变化。 技术原理 电信号检测 通过电探头对细胞释放的电活性物质进行检测,如过氧化氢、一氧化氮、多巴胺、超氧阴离子等物质。 通过试剂盒的量化级联反应产生的过氧化氢等电活性物质,实现单细胞小分子含量或酶活性的检测。 荧光信号检测 光探头传输激发光激发预染色细胞,通过光学检测系统收集细胞发射的荧光信号,荧光信号强弱反映细胞预染色指标的含量,可实现细胞整体或亚细胞激发检测。 通过单细胞超微量提取注射,向单个活细胞注射荧光检测试剂盒,光探头传输激发光激发细胞的生化反应产物而产生荧光,荧光信号强弱反映细胞内相应的小分子含量或酶活。 经典应用 肿瘤细胞代谢 肿瘤细胞异质性研究,包括糖代谢、脂代谢、蛋白代谢相关的小分子和酶活分析;结合抑制实验,研究肿瘤细胞代谢过程中关键激活酶,为抗癌药物研发提供理论基础;通过抗癌新药直接刺激细胞或配合专用探头实现细胞内送药,评估其对单细胞内代谢参数指标的影响。 代表文献1) Zheng XT, Yang HB, Li CM. Optical detection of single cell lactate release for cancer metabolic analysis. Anal Chem. 2010 Jun 15 82(12):5082-7. (DOI: 10.1021/ac100074n)2) Pan R, Xu M, Jiang D, Burgess JD, Chen HY. Nanokit for single-cell electrochemical analyses. Proc Natl Acad Sci USA. 2016 Oct 11 113(41):11436-11440. (DOI: 10.1073/pnas.1609618113)3) Zheng XT, Li CM. Single living cell detection of telomerase over-expression for cancer detection by an optical fiber nanobiosensor. Biosens Bioelectron. 2010 Feb 15 25(6):1548-52.. (DOI:10.1016/j.bios.2009.11.008)4) Zheng XT, Hu W, Wang H, Yang H, Zhou W, Li CM. Bifunctional electro-optical nanoprobe to real-time detect local biochemical processes in single cells. Biosens Bioelectron. 2011 Jul 15 26(11):4484-90.(DOI:10.1016/j.bios.2011.05.007) 新药研究 新药研究离不开细胞学实验,实时单细胞多模态分析仪在药物研究中的常见应用:药物的极性和分子量会影响其透过细胞膜的效率,如果药物的细胞膜透性较低或未知,可以单细胞内定点注射药物并实时检测药效相关指标(Ca2+和ROS等),可以反映药物发挥作用的潜在位置;为了理解药物作用机制,需要预先判断可能的转运体、药物靶点、及涉及到的关键代谢酶,然后通过实时单细胞多模态分析仪进行验证,由于是实时的,可以添加相关抑制剂或增强剂直接进行判断验证;用于单细胞亚细胞水平的定向给药及实时原位检测药物作用效果,提供亚细胞水平药物-细胞相互作用研究的重要工具,实现单细胞层面药物保护性研究和抑制性研究,可为药物载体的单细胞层面载药能力研究和亚细胞层面的定位提供选择性平台。 代表文献 1)Xin T Z , Peng C , Chang M L . Anticancer Efficacy and Subcellular Site of Action Investigated by Real‐Time Monitoring of Cellular Responses to Localized Drug Delivery in Single Cells[J]. Small, 2012, 8(17):2670-2674. (DOI: 10.1002/smll.201102636)2)Yuning Han, Bin Hu, Mingyu Wang, Yang Yang, Li Zhang, Juan Zhou*, Jinghua Chen*. pH-Sensitive Tumor-Targeted Hyperbranched System Based on Glycogen Nanoparticles for Liver Cancer Therapy, Applied Materials Today, 2020, 18, 100521.(DOI: 10.1016/j.apmt.2019.100521) 神经领域应用 单细胞胞质的超微量抽提,和质谱平台联用完成递质成分的分析;纳米级探头实现单个神经细胞或脑组织的小分子电化学检测。 代表文献 1)Molecular profiling of single axons and dendrites in living neurons using electrosyringe-assisted electrospray mass spectrometry[J]. Analyst, 2019, 144 2) Development of Au Disk Nanoelectrode Down to 3 nm in Radius for Detection of Dopamine Release from a Single Cell[J]. Analytical Chemistry, 2015, 87(11):5531.3)Electrochemically Probing Dynamics of Ascorbate during Cytotoxic Edema in Living Rat Brain[J]. Journal of the American Chemical Society, 2020, 142(45):19012-19016. 活体研究 中医药领域,可对特定穴位血清素(5-羟色胺)、一氧化氮、乙酰胆碱、抗坏血酸等关键指标的实时监测,可配合组织解剖学实验,研究不同组织类型的指标差异,辅助针灸机理研究;活体动物模型在体检测,辅助肿瘤疾病药物研究。 代表文献 1)Li, YT., Tang, LN., Ning, Y. et al. In vivo Monitoring of Serotonin by Nanomaterial Functionalized Acupuncture Needle. Sci Rep 6, 28018 (2016). 2)Tang, L., Li, Y., Xie, H. et al. A sensitive acupuncture needle microsensor for real-time monitoring of nitric oxide in acupoints of rats. Sci Rep 7, 6446 (2017). 3)Tang, L., Du, D., Yang, F. et al. Preparation of Graphene-Modified Acupuncture Needle and Its Application in Detecting Neurotransmitters. Sci Rep 5, 11627 (2015).
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  • 产品简介SPRm200系统将光学显微镜与分子互作技术相结合,专为观察和测量细胞膜表面蛋白和其他目标分子结合亲和力及动力学常数,为分子相互作用的研究开辟了新的前沿。SPRm200无需对观察目标进行标记,可以实时定量的进行检测。可同时可视化观察细胞结构和局部结合活性。无需提取细胞膜蛋白,即可在正常活细胞状态下观察和测量药物和膜蛋白的实时相互作用。探测器测量每个像素的SPR响应,并将其映射到SPR图像中。在每个像素处,记录一个传感图,从而提供更多的局部信息。SPRM使在自然条件下研究细胞表面膜蛋白与其他目标分子结合和相互作用成为可能。SPRm200凭借其卓越的灵敏度和稳定性,还可测量细菌和病毒相互作用的结合活性,同时可用于开发输送纳米药物的新方法。产品特点In vitro & 无标记 膜蛋白分子相互作用动力学检测光学显微镜与高分辨率表面等离子共振检测器同时成像,可用于自然环境下,单细胞或多细胞表面蛋白受体与药物分子相互作用筛选与分析。实时&定量同步于SPR测量的光学成像亲和力测定、动力学常数分析通过框选不同的细胞,可以分别获取不同区域的传感器数据,实现对单个细胞表面蛋白分子亲和力的测定。 纳米粒子检测仪器将光以共振角投射到传感器上,沿金属膜表面产生可传播的表面等离子体波。当纳米颗粒与传感器表面待检物结合时,它在SP波中充当散射中心,形成印记图案,印记比实际大小高出100倍。这种放大的印记能够检测到小于光学衍射极限的颗粒,通过测量和绘制这些印记,可以监测和研究纳米级别尺度的结合活性。SPR图像中印记图案的出现和强度变化提供了关于传感器表面待检物与纳米颗粒之间的亲和力,以及待检物与介质中的其他分子的相互作用的丰富信息。细菌和抗生素由细菌细胞纳米运动引起的波动可以对细胞代谢进行深入研究。当将抗生素(PMB)添加到细胞SPR分析池中,细菌细胞的波动急剧减少,从而提示PMB与细胞膜蛋白结合的亲和力。应用研究方向1.小分子药物(200Da)与单细胞或多细胞结合筛选与分析2.细胞精度统计学分布分析,研究细胞异质性差异3.抗体药物与单细胞或多细胞结合的筛选4.细菌或病毒与抗菌性药物的相互作用5.其他分子细胞/活细胞层面原位研究应用实例小分子药物常用药物中,小分子药物可占总量98%,小分子药物通常是信号传导抑制剂,它能够特异性地阻断肿瘤生长、增殖过程中所必需的信号传导通路,从而达到治疗的目的。1. 小分子药物与HEK 293细胞GPR39受体相互作用2. 小分子药物与细胞ASIC 酸敏感离子通道受体相互作用研究3. 肽与A549细胞的相互作用4. CP-D细胞相互作用5. WGA与CHO细胞的相互作用抗体药物1. 单克隆抗体(mAb)疗法已成为治疗癌症、自身免疫性疾病、哮喘和许多其他疾病的既定方法。2. 人神经胶质瘤细胞(H4)抗体结合的测定3. A431细胞的EGFR结合亲和力 基于病毒、细菌载体分子互作的研究1.快速ASTs实验2. 通过SPRM电化学阻抗分析,测量了传感器表面病毒肽配体和不同GPCR受体的结合动力学常数参数
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  • 如何从哺乳动物的血液中提取红细胞膜
    生物膜的研究发展迅速,要研究生物膜的组成、结构及功能,首先必须分离出纯净的细胞膜。分离状态下的哺乳动物的红细胞膜,一般称为“血影”。哺乳动物的红细胞中没有通常真核生物细胞内所含有的任何细胞器,容易制备得到纯粹的细胞膜,取材方面来源也十分方便,是研究细胞膜的好材料。
  • 人抗肝细胞膜抗体(LMA)检测试剂盒
    人抗肝细胞膜抗体(LMA)检测试剂盒人抗肝细胞膜抗体(LMA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗肝细胞膜抗体(LMA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗肝细胞膜抗体(LMA)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人抗肝细胞膜抗体(LMA)抗原、生物素化的人抗肝细胞膜抗体(LMA)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗肝细胞膜抗体(LMA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)检测试剂盒
    人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)检测试剂盒人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)抗原、生物素化的人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度

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  • 【转帖】细胞膜蛋白激光检测技术研制成功

    将在药物开发进程中发挥重要作用2011年03月26日 来源: 科技日报 作者: 常丽君  本报讯 据每日科学网近日报道,美国范德堡大学研究人员开发出一种新型激光技术,可检测细胞膜上的蛋白质和其它多种生物分子之间的相互反应。这种检测将在药物开发进程中发挥重要作用。   人类细胞中约有7000种蛋白质,其中30%在细胞膜上,控制细胞分子运作机制的信号有60%—70%由这些膜蛋白产生,因此当前市场上约一半的药物都是瞄准细胞膜蛋白。但因为膜蛋白很难提纯,科学家在研究它们的结构时面临很多困难。现有的检测膜手段大多是将膜蛋白从其所处环境中分离,或用不同方式如荧光标签加以修改,以分析它们的活性。这些方法不仅昂贵耗时,还可能会影响目标膜蛋白的功能。  范德堡大学化学生物研究院化学教授达里尔·波恩霍普领导的研究小组和斯克里普斯研究院合作,开发了一种名为“后向散射干涉仪”(BSI)的新型激光技术,能精确检测出膜蛋白和自然界中各种分子之间的结合力。  BSI操作起来很简单,只要把两种分子混合装入一个充满液体的显微镜小盒中,用一束类似于条形码扫描仪的红色激光照射,就能测出它们之间的结合力。小盒的几何形状调整合适后,激光就会产生干涉图案,而这种干涉图案对分子之间的反应非常敏感。如果分子开始互相作用,图案就开始变换。  为了检验BSI的准确性,研究人员制造了一种含有GM1小蛋白质的合成膜,霍乱毒素要进入细胞,主要结合对象就是这种小蛋白质。他们把霍乱毒素B和这些膜混合,检测出的结合力结果与用其他方法所得到的结果一致。为了进一步确认,他们还用了一种和胸腺癌相关的天然分离膜和3种分别与疼痛、发炎和神经传导素GABA(用于放松、睡眠和调节紧张)相关的蛋白质膜进行检验,把包含这些蛋白质的膜和对应结合分子相混合,用BSI技术测得的值也和用其他方法得到的结果一样。  此外,该技术进入商业化也前景广阔,范德堡大学对新型激光检测技术已申请了专利,并已获得3项批准。他们还专门成立了一家分子传感公司对新技术进行独家开发。

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  • IVIS视角 | 穿上 “细胞膜吉利服”的纳米载体在体内必将威力大增
    众所周知,多功能纳米载体可以有效识别肿瘤细胞并且在体外具有良好的抗肿瘤效果。但是目光转向体内,这些纳米载体往往在免疫系统的攻击下集体失灵。因为,人体免疫系统将会感知纳米载体的入侵,并且非常努力的把我们精心设计的载体清除掉。一旦纳米载体被清除掉,药物就很难到达目标肿瘤区域,很难实现杀伤肿瘤的效果。因此,纳米医学的一个非常重要的课题就是在不破坏免疫系统的前提下,让纳米载体躲避免疫系统的攻击。传统的解决方案我们都是通过在纳米载体表面携带各种伪装工具,尽量和免疫细胞捉迷藏,能躲则躲,绝不露面。但是这些载体也很容易迷路, 到达深层肿瘤部位的很少,并且在和免疫系统的斗智斗勇中,还会激发免疫系统产生新的抗体从而加速纳米载体的清除,因此很难达到治疗的效果。而随着仿生纳米医学的发展,科学家们可以让纳米载体穿上“吉利服”,不但可以在免疫系统中潜伏下来,还可以大摇大摆的从免疫细胞的眼皮底下蒙混过关,发挥极大功效。这种“吉利服”就是细胞膜提取物,不同种类细胞提取的细胞膜包覆在纳米载体表面还可以表现出特殊的功效,像红细胞膜或者一些免疫细胞膜可以提高纳米载体的体内循环时间,肿瘤细胞膜可以特异识别同源肿瘤等。穿上“细胞膜吉利服”之后,纳米载体将显现各方面的优势和潜力,从而成为近年来多功能纳米载体领域的研究热点之一。1、T细胞膜包裹下仿生纳米药物的免疫识别增强通过糖代谢技术,获取嵌入叠氮基团(N3)的功能化T细胞,并提取功能化T细胞膜包裹在吲哚菁绿/聚合物纳米载体表面,构建仿生纳米光敏剂。功能化T细胞膜上不但原本的抗原受体可以赋予纳米光敏剂识别肿瘤细胞的能力,并且N3基团可以识别肿瘤细胞糖代谢靶点,从而实现纳米载体在肿瘤内部的富集,通过小动物光学成像可以清楚的看到T细胞膜包裹下仿生纳米药物在肿瘤部位的靶向作用,从而进一步实现肿瘤的精准可视化治疗。功能化T细胞膜仿生纳米颗粒实现特异性的肿瘤靶向和精准光热治疗参考文献:T Cell Membrane Mimicking Nanoparticles with Bioorthogonal Targeting and Immune Recognition for Enhanced Photothermal Therapy. Advanced Science. 2019: 1900251.2、生物学重编程全抗原细胞膜助力纳米疫苗的研发将肿瘤细胞和树突细胞融合细胞的生物学重编程细胞膜包覆在金属有机化合物表面,构建肿瘤疫苗可以在融合细胞膜表面表达大量免疫刺激分子,从而使得包裹融合细胞膜的纳米载体像抗原呈递细胞一样直接作用T细胞从而激活免疫反应。通过小动物光学成像,可以看到重编程细胞膜包覆的纳米载体在体内长循环到达肿瘤部位的过程。到达肿瘤部位的纳米载体还可以被树突细胞识别,从而诱导树突细胞成熟,增强免疫效果,最终消除肿瘤,从而拓展肿瘤治疗平台。生物学重编程细胞膜包裹纳米载体的过程以及肿瘤免疫的激活参考文献: Cytomembrane nanovaccines show therapeutic effects by mimicking tumor cells and antigen presenting cells. Nature Communications. 2019, 10(1): 3199.3、肿瘤细胞膜包裹的黑磷纳米载体拓宽光热肿瘤免疫治疗手术切除的肿瘤组织含有对患者特异性的新抗原,是成为制备个体化肿瘤疫苗最好的材料来源。作者利用细胞膜封装的方式在二维光热黑磷量子点(BPQDs)表面包裹肿瘤组织的细胞膜,从而制备具有光热效应的纳米肿瘤疫苗(BPQD-CCNVs),并且把纳米肿瘤疫苗和集落刺激因子(GM-CSF)装入热敏水凝胶中。皮下注射水凝胶后可以在红外光的作用下持续释放纳米疫苗以及集落刺激因子,招募并激活DC细胞,从而捕获肿瘤抗原并激活肿瘤特异性T细胞。同时,尾静脉注射PD-1抑制剂,阻断PD-1/PD-L1免疫检查点通路,增强T细胞抗肿瘤免疫应答效应。通过活体光学成像我们可以对肿瘤进行生物发光标记,从而长期连续监测肿瘤在体内的发展情况。实验结果表明通过光热免疫治疗可以有效清除实体肿瘤同时抑制术后转移的复发。(A)光热肿瘤免疫实验设计思路;(B)FITC标记的水凝胶在体内的降解情况;(C)个性化光热肿瘤免疫治疗可以有效抑制术后实体肿瘤的复发;(D)个性化光热肿瘤免疫治疗可以有效抑制术后肿瘤的转移。参考文献:Surgical Tumor-Derived Personalized Photothermal Vaccine Formulation for Cancer Immunotherapy. ACS nano. 2019, 13(3): 2956-2968.珀金埃尔默拥有先进的分子影像技术,其小动物活体成像系统为生物医学的各种研究领域(包括肿瘤、干细胞、传染病、炎症、免疫性疾病、神经疾病、心血管疾病、代谢疾病、基因治疗、纳米材料、新药研发、植物学等)提供了完整的成像解决方案。点击链接,获取相关产品及应用资料:https://account.custouch.com/perkinelmer/site/#/list/15?_wxr_1564535099232&refresh=true关于珀金埃尔默:珀金埃尔默致力于为创建更健康的世界而持续创新。我们为诊断、生命科学、食品及应用市场推出独特的解决方案,助力科学家、研究人员和临床医生解决最棘手的科学和医疗难题。凭借深厚的市场了解和技术专长,我们助力客户更早地获得更准确的洞见。在全球,我们拥有12500名专业技术人员,服务于150多个国家,时刻专注于帮助客户打造更健康的家庭,改善人类生活质量。2018年,珀金埃尔默年营收达到约28亿美元,为标准普尔500指数中的一员,纽交所上市代号1-877-PKI-NYSE。了解更多有关珀金埃尔默的信息,请访问www.perkinelmer.com.cn。
  • 细胞膜色谱法,一种全新的生物亲和色谱
    p  药物与受体相互作用研究在药物研发过程中发挥着非常重要的作用,其研究方法的便捷程度以及准确度直接影响a title="" style="color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href="http://www.instrument.com.cn/application/industry-S22.html" target="_self"span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong药物研发/strong/span/a的效率。一般研究药物受体的相互作用均采用放射配基结合分析法和亲和色谱法,但因放射配基结合分析法操作复杂,需要制备特定的放射性配基,使应用受到一定的限制 而通常的亲和色谱法需要制备一定数量及一定纯度的受体,难度较大,且可能会影响受体对药物的选择性。/pp  1996 年,西安交通大学贺浪冲教授提出细胞膜色谱法(cell membrane chromatography,CMC),经过20 年的不断发展,CMC法已逐步成为研究药物与膜受体亲和作用的有力工具之一。CMC系统将完整的细胞膜包覆于硅胶表面,在仿生理条件下制备成色谱柱进行成分受体相互作用研究,可以快速筛选中药复杂体系中的活性成分,并准确计算出其与受体间的配位亲和常数。/pp  近日,西安交通大学王嗣岑教授等人在《药学进展》杂志发表文章“ 细胞膜色谱法用于药物与受体相互作用研究进展”,详细介绍了细胞膜色谱法的前世今生及相关应用。/pp  传统的CMC方法经历了2 次“更新换代”:首先,原CMC 模型中分离鉴别采用离线方式完成,即通过筛选发现在特定细胞膜固定相上有保留的中药部位,采用人工方法将保留组分接收并进行下一步分离及鉴定。十几年来通过对CMC 模型的改造,现已成功构建集“ 活性识别- 色谱分离- 分析鉴定”于一体的CMC/HPLC(GC)/MS 在线二维分析系统 利用“ 双捕集环” 和“ 双富集柱”交替富集- 分析模式,将原有色谱系统成功改造为新的在线二维分析系统 并成功研制了在线阀控切换装置,真正实现了高通量筛选。其次,原CMC法中,靶细胞是通过生物组织和一般培养方法获得的,其细胞膜上的非“目标”受体的表达数量很多,而“目标”受体表达数量有限且不可控,由此建立的CMC 法对配体的特异性、敏感性和选择性受到了不同程度的限制。近年来,随着生物技术的不断发展,研究者利用现代分子生物学手段,利用外源重组质粒构建了稳定高表达野生型表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、血管内皮生长因子受体(vascular epidermal growth factor receptor,VEGFR)、成纤维生长因子受体-1 (fibroblast growth factor receptor-1,FGFR-1)等受体的人胚肾HEK293 细胞株,并以相应受体选择性拮抗剂为对照样品,成功建立了受体高表达CMC模型,发现了苦参、独活、虎杖、黄芪、川乌和红毛七中选择性作用于上述受体的活性组分 分子药理学实验证明筛选得到的化合物可以抑制相应受体蛋白的表达,并具有剂量依赖性。/pp  药物-受体的亲和作用直接影响药物的代谢过程及药效学,细胞膜色谱作为一种全新的生物亲和色谱,实现了高效液相色谱分离和受体药理学的有机结合,用于表征药物- 受体的亲和作用并求解药物作用的解离常数。但这个过程往往不是几种简单理想的模型能够准确描述,所以如何避免测定中的干扰、增强方法的专属性是今后研究的重点所在。此外,细胞膜色谱有其特殊性,载体表面的细胞膜活性随时间不断衰减, 因此如何将亲和色谱理论应用到细胞膜色谱法中,在较短的时间内观察配体在细胞膜固定相上的保留特征,建立快速表征药物– 受体亲和作用的研究方法,也是一个非常重要的研究课题。/ppbr//p
  • 细胞膜层析新法弥补显微技术衍射缺陷
    最近,加州大学伯克利分校的Jay Groves及其团队开发出了一种新型层析技术用于研究细胞膜。  Groves解释说:&ldquo 我们开发出的是一种嵌于细胞膜的纳米点阵列平台,当其在一个活细胞的细胞膜中运作时,它将提供一种用于探测和操纵细胞膜组件的物理手段,包括信号簇。  截至目前为止,科学家主要通过各种显微镜研究细胞膜。受限于光的衍射作用,常规的显微技术很难观察比250nm更小尺寸的结构,然而,大部分细胞膜的成分,如蛋白质受体都比250nm要小。近年来,一些可以突破衍射障碍的超高分辨率显微技术问世,但这些技术更适合观察个体的静态图像,不能成为探测不断移动和变化中的细胞膜的理想技术。因此,科学家们需要一种用于细胞膜研究的全新技术。基于尺寸的新型层析技术并首次用于研究活细胞  由Groves及其团队开发的这种技术,首先需要创建一种含有蛋白质的人工脂质膜,在金纳米颗粒阵列沉积在细胞膜表面之前,这些人工膜将在细胞表面与受体结合。下一步,对细胞表面的受体进行荧光标记,然后让该细胞无限靠近人工膜,这使得人工膜中的蛋白质和细胞膜中的受体彼此捆绑结合。  通常情况下,受体在细胞膜的周围不断移动。但现在它们与人工膜中的蛋白质结合,其运动是受金纳米颗粒阵列约束的。只有当受体比金纳米颗粒之间的间隙更小时,他们才能够移动,而荧光标记物将显示出任何的移动轨迹。通过改变金纳米颗粒之间的距离,Groves及其团队可以测定受体的尺寸和研究影响受体功能的运动。  这是一种基于尺寸的新型层析技术并首次用于研究活细胞,Groves及其团队通过该方法研究免疫系统中T细胞表面的受体。这些T细胞受体(TCRs)包括聚集的蛋白质团簇,当遇到蛋白质抗原时,它们可以捆绑结合。通过人工膜以附着不同浓度的抗原,改变金纳米颗粒之间的距离,Groves及其团队发现,团簇的大小取决于抗原浓度,浓度越高越利于形成更大的团簇。Jay Groves  &ldquo T细胞受体微簇信号系统已经借助传统的光学显微镜有了很充分研究,但这部分是我们过去所不了解的。&rdquo Groves 表示:&ldquo 这是一种原理性的证据,它表明通过合成材料连接活细胞是实现细胞的分子级控制的另一个步骤。&rdquo (编译:刘玉兰)
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