细胞代谢过程

BT/BAR双联试剂条详情BAR基因是抗除草剂基因，其编码表达的产物PAT蛋白，能使草丁磷对植物无毒作用。BT是苏云金芽孢杆菌在代谢过程中产生的一种杀虫蛋白，作为生物农药广泛使用在蔬菜、瓜果等作物上。通过根癌农杆菌介导等方法将Bt基因转入棉花植株的细胞中后，棉株体内也能合成Bt杀虫蛋白。特点 一根试条、一份样本，检测多种转基因成分 一次操作、一眼判断，提高 效率而节省时间 一次检测、多种转基因，规避潜在其他风险 灵敏度高、稳定性好、原装进口、简便快捷订购信息 产品名称货号描述规格BT/BARcomboA07-20-413BT/BAR快速检测100条/盒

Biolife CS10细胞冻存液美国Biolife品牌CryoStor临床级即用型冻存液产品都预先配制了USP级DMSO，这是一种渗透性冷冻保护剂，有助于减轻冰的形成造成的损害。在广泛的细胞类型中，CryoStor配方已被证明比商业和家庭酿造的等渗和细胞外配方更有效地减少保存后的凋亡和坏死。CryoStor产品符合 USP 无菌和 USP 内毒素检测标准，并按cGMP生产。CryoStor CS10预先配制了10%的DMSO，在冷冻、储存和解冻过程中为需要10% DMSO的细胞和组织提供了安全、保护的环境。通过调节对低温保存过程的分子生物学反应，CryoStor提供了增强的细胞活力和功能，同时消除了血清、蛋白质或高水平的细胞毒性制剂的需求。产品特点:&bull 单独的Biolife品牌标签&bull 预配置（10%DMSO）&bull 无血清&bull 无蛋白&bull USP级别/高质量组分&bull cGMP 制造&bull FDA 药物主文件备案&bull 无菌、内毒素,以及细胞放行测试产品规格:产品参数：Jurkat T细胞微球悬浮在指定的低温培养基中，然后放置在2 ml 冻存管中，并在2-8℃下孵育15分钟。然后将cryovials转移到无LN2-程序降温仪以-1℃/分钟的速度冷冻保存。在达到-70℃后，将样品转移到LN2储存至少24小时。样品在指定条件下解冻，用CGM(1:10稀释)重悬，在37℃和5% CO2下转移到培养箱。在NucleoCounter NC-3000成像细胞仪(ChemoMetec，丹麦)上使用Via-1盒，根据膜完整性评估立即和解冻后24小时内的细胞存活率和计数。图1-Jurkat T细胞的活力是基于在解冻后24小时内使用膜完整性测定进行评估。图2-使用膜完整性试验评估了解冻后Jurkat T细胞的可见复苏率和扩增性能。结论：1-解冻后立即对细胞活率和数量进行分析并不能反映冷冻保存过程成功与否。未优化的冷冻培养基的不良影响可能要到解冻后的24-48小时才能检测到，这归因于低温保存诱导的延迟性细胞死亡(DOCD)。另一方面，优化的低温保存介质的加入可以防止DOCD的发生 因此，减少了变异性，更准确地估计了解冻后的生存和增殖。2-低温贮藏前的补料时间和培养基的变化对低温贮藏过程的结果有重要影响。这可能是由于一些参数，包括在冷冻前活力试验中没有出现的压力积累，但与DOCS结合，导致解冻后活力和功能的显著损失。3-冰成核的随机性本质上导致了细胞在低温保存过程中所承受的低温保存诱导应力的变化。因此适当的成核对模型T细胞的生存能力和增殖能力有显著影响。4-在37°C介质中稀释(类似于患者给药情景)是解冻后的最佳稀释实践。强烈建议，为了分析目的，细胞也应在温暖介质中稀释，以尽量减少在洗涤过程中渗透细胞的肿胀和溶解。使用方法：1. 将待冷冻保存的细胞重悬置于悬浮液中(机械或酶法解离)2. 对细胞进行离心3. 去除上清液-注意:尽可能多地去除培养基，以减少冷冻液的稀释。4. 添加冷(2°-8°C) 的cryostor冻存液。细胞浓度按照常规细胞培养方案0.5-10*106细胞/mL(可能更高)。DMSO是预先混合在cryostor冻存液中且冻存液中不含添加剂。5-预冷冻:细胞悬液在2°-8°C下孵育约10分钟。6-冷冻成核:在-80°C冷冻样品(许多protocol推荐交替使用-70°C和-80°C环境来处理样本)。对大多数哺乳动物细胞系统推荐使用程序降温仪来控制速率冷冻(-1°C/min)，如果使用冷冻装置或异丙醇容器则应提前容器预冷至2°-8°c，使用异丙醇容器的冷冻时间(-80°C)建议约为4小时，或不超过一夜。样品内的冰成核应在大约-5°C下开始，使用可控速率冷冻机上的液氮爆裂程序设置，或在大约15-20分钟后对冷冻液/样品容器进行机械搅拌(轻弹或轻敲)。7.储存:将样品放入储存室，在液氮温度下(低于-130°C)储存样品。样品储存在-80°C仅建议短期储存(数周至数月)。8.解冻:在37°C水浴或同类似的机械解冻装置中快速解冻样品，样品融化时应轻轻地旋转样品，直到所有可见的冰都融化。在冰冻箱中，1ml样品的大约解冻时间为2-3分钟。不允许样品在冷冻温度(0-10°C)以上加热。冷冻瓶从浴液中取出时，摸起来应该是凉的。不建议被动解冻。9.立即用培养基或等效等渗介质稀释细胞/冷冻液混合物。稀释程序可以在一个步骤中完成。稀释介质应在20°C至37°C之间。建议稀释比为1:10(样品与介质)或更大。10. 应用合适的配置下种细胞。11.将细胞放入培养条件或立即使用。12.解冻后进行24小时生存能力评估。注:为了获得低温保存后细胞活力的准确测量，应在解冻后24小时进行评估，并与非冷冻对照样本进行比较。*样品解冻后立即使用膜完整性指标(如台盼蓝)进行评估，以比较分析样品细胞产量和存活率，这往往导致对细胞存活率的测量不准确。建议采用活/死荧光分析或代谢分析(MTT或alamarBlue*)更准确地评估可行回收率。CryoStor产品在环境温度下运输。收到后，保存在2°-8°C，避光，直到准备使用Biolife CS5 细胞冻存液美国Biolife品牌CryoStor临床级即用型冻存液产品都预先配制了USP级DMSO，这是一种渗透性冷冻保护剂，有助于减轻冰的形成造成的损害。在广泛的细胞类型中，CryoStor配方已被证明比商业和家庭酿造的等渗和细胞外配方更有效地减少保存后的凋亡和坏死。CryoStor产品符合 USP 无菌和 USP 内毒素检测标准，并按cGMP生产。CryoStor CS5预先配制了10%的DMSO，在冷冻、储存和解冻过程中为需要10% DMSO的细胞和组织提供了安全、保护的环境。通过调节对低温保存过程的分子生物学反应，CryoStor提供了增强的细胞活力和功能，同时消除了血清、蛋白质或高水平的细胞毒性制剂的需求。产品特点:&bull 单独的Biolife品牌标签&bull 预配置（5%DMSO）&bull 无血清&bull 无蛋白&bull USP级别/高质量组分&bull cGMP 制造&bull FDA 药物主文件备案&bull 无菌、内毒素,以及细胞放行测试产品规格:产品数据：Jurkat T细胞微球悬浮在指定的低温培养基中，然后放置在2 ml 冻存管中，并在2-8℃下孵育15分钟。然后将cryovials转移到无LN2-程序降温仪以-1℃/分钟的速度冷冻保存。在达到-70℃后，将样品转移到LN2储存至少24小时。样品在指定条件下解冻，用CGM(1:10稀释)重悬，在37℃和5% CO2下转移到培养箱。在NucleoCounter NC-3000成像细胞仪(ChemoMetec，丹麦)上使用Via-1盒，根据膜完整性评估立即和解冻后24小时内的细胞存活率和计数。图1-Jurkat T细胞的活力是基于在解冻后24小时内使用膜完整性测定进行评估。图2-使用膜完整性试验评估了解冻后Jurkat T细胞的可见复苏率和扩增性能。1-解冻后立即对细胞活率和数量进行分析并不能反映冷冻保存过程成功与否。未优化的冷冻培养基的不良影响可能要到解冻后的24-48小时才能检测到，这归因于低温保存诱导的延迟性细胞死亡(DOCD)。另一方面，优化的低温保存介质的加入可以防止DOCD的发生 因此，减少了变异性，更准确地估计了解冻后的生存和增殖。2-低温贮藏前的补料时间和培养基的变化对低温贮藏过程的结果有重要影响。这可能是由于一些参数，包括在冷冻前活力试验中没有出现的压力积累，但与DOCS结合，导致解冻后活力和功能的显著损失。3-冰成核的随机性本质上导致了细胞在低温保存过程中所承受的低温保存诱导应力的变化。因此适当的成核对模型T细胞的生存能力和增殖能力有显著影响。4-在37°C介质中稀释(类似于患者给药情景)是解冻后的最佳稀释实践。强烈建议，为了分析目的，细胞也应在温暖介质中稀释，以尽量减少在洗涤过程中渗透细胞的肿胀和溶解。1. 将待冷冻保存的细胞重悬置于悬浮液中(机械或酶法解离)2. 对细胞进行离心3. 去除上清液-注意:尽可能多地去除培养基，以减少冷冻液的稀释。4. 添加冷(2°-8°C) 的cryostor冻存液。细胞浓度按照常规细胞培养方案0.5-10*106细胞/mL(可能更高)。DMSO是预先混合在cryostor冻存液中且冻存液中不含添加剂。5-预冷冻:细胞悬液在2°-8°C下孵育约10分钟。6-冷冻成核:在-80°C冷冻样品(许多protocol推荐交替使用-70°C和-80°C环境来处理样本)。对大多数哺乳动物细胞系统推荐使用程序降温仪来控制速率冷冻(-1°C/min)，如果使用冷冻装置或异丙醇容器则应提前容器预冷至2°-8°c，使用异丙醇容器的冷冻时间(-80°C)建议约为4小时，或不超过一夜。样品内的冰成核应在大约-5°C下开始，使用可控速率冷冻机上的液氮爆裂程序设置，或在大约15-20分钟后对冷冻液/样品容器进行机械搅拌(轻弹或轻敲)。7.储存:将样品放入储存室，在液氮温度下(低于-130°C)储存样品。样品储存在-80°C仅建议短期储存(数周至数月)。8.解冻:在37°C水浴或同类似的机械解冻装置中快速解冻样品，样品融化时应轻轻地旋转样品，直到所有可见的冰都融化。在冰冻箱中，1ml样品的大约解冻时间为2-3分钟。不允许样品在冷冻温度(0-10°C)以上加热。冷冻瓶从浴液中取出时，摸起来应该是凉的。不建议被动解冻。9.立即用培养基或等效等渗介质稀释细胞/冷冻液混合物。稀释程序可以在一个步骤中完成。稀释介质应在20°C至37°C之间。建议稀释比为1:10(样品与介质)或更大。10. 应用合适的配置下种细胞。11.将细胞放入培养条件或立即使用。12.解冻后进行24小时生存能力评估。注:为了获得低温保存后细胞活力的准确测量，应在解冻后24小时进行评估，并与非冷冻对照样本进行比较。*样品解冻后立即使用膜完整性指标(如台盼蓝)进行评估，以比较分析样品细胞产量和存活率，这往往导致对细胞存活率的测量不准确。建议采用活/死荧光分析或代谢分析(MTT或alamarBlue*)更准确地评估可行回收率。CryoStor产品在环境温度下运输。收到后，保存在2°-8°C，避光，直到准备使用Biolife CS2 细胞冻存液美国Biolife品牌CryoStor临床级即用型冻存液产品都预先配制了USP级DMSO，这是一种渗透性冷冻保护剂，有助于减轻冰的形成造成的损害。在广泛的细胞类型中，CryoStor配方已被证明比商业和家庭酿造的等渗和细胞外配方更有效地减少保存后的凋亡和坏死。CryoStor产品符合 USP 无菌和 USP 内毒素检测标准，并按cGMP生产。CryoStor CS5预先配制了2%的DMSO，在冷冻、储存和解冻过程中为需要2% DMSO的细胞和组织提供了安全、保护的环境。通过调节对低温保存过程的分子生物学反应，CryoStor提供了增强的细胞活力和功能，同时消除了血清、蛋白质或高水平的细胞毒性制剂的需求。产品特点:&bull 单独的Biolife品牌标签&bull 预配置（5%DMSO）&bull 无血清&bull 无蛋白&bull USP级别/高质量组分&bull cGMP 制造&bull FDA 药物主文件备案&bull 无菌、内毒素,以及细胞放行测试产品规格：使用方法：1. 将待冷冻保存的细胞重悬置于悬浮液中(机械或酶法解离)2. 对细胞进行离心3. 去除上清液-注意:尽可能多地去除培养基，以减少冷冻液的稀释。4. 添加冷(2°-8°C) 的cryostor冻存液。细胞浓度按照常规细胞培养方案0.5-10*106细胞/mL(可能更高)。DMSO是预先混合在cryostor冻存液中且冻存液中不含添加剂。5-预冷冻:细胞悬液在2°-8°C下孵育约10分钟。6-冷冻成核:在-80°C冷冻样品(许多protocol推荐交替使用-70°C和-80°C环境来处理样本)。对大多数哺乳动物细胞系统推荐使用程序降温仪来控制速率冷冻(-1°C/min)，如果使用冷冻装置或异丙醇容器则应提前容器预冷至2°-8°c，使用异丙醇容器的冷冻时间(-80°C)建议约为4小时，或不超过一夜。样品内的冰成核应在大约-5°C下开始，使用可控速率冷冻机上的液氮爆裂程序设置，或在大约15-20分钟后对冷冻液/样品容器进行机械搅拌(轻弹或轻敲)。7.储存:将样品放入储存室，在液氮温度下(低于-130°C)储存样品。样品储存在-80°C仅建议短期储存(数周至数月)。8.解冻:在37°C水浴或同类似的机械解冻装置中快速解冻样品，样品融化时应轻轻地旋转样品，直到所有可见的冰都融化。在冰冻箱中，1ml样品的大约解冻时间为2-3分钟。不允许样品在冷冻温度(0-10°C)以上加热。冷冻瓶从浴液中取出时，摸起来应该是凉的。不建议被动解冻。9.立即用培养基或等效等渗介质稀释细胞/冷冻液混合物。稀释程序可以在一个步骤中完成。稀释介质应在20°C至37°C之间。建议稀释比为1:10(样品与介质)或更大。10. 应用合适的配置下种细胞。11.将细胞放入培养条件或立即使用。12.解冻后进行24小时生存能力评估。注:为了获得低温保存后细胞活力的准确测量，应在解冻后24小时进行评估，并与非冷冻对照样本进行比较。*样品解冻后立即使用膜完整性指标(如台盼蓝)进行评估，以比较分析样品细胞产量和存活率，这往往导致对细胞存活率的测量不准确。建议采用活/死荧光分析或代谢分析(MTT或alamarBlue*)更准确地评估可行回收率。CryoStor产品在环境温度下运输。收到后，保存在2°-8°C，避光，直到准备使用

细胞小室运用选择指南应用细胞膜孔径ADME（化合物穿过肠上皮细胞屏障转运和渗透）Caco-2、MDCK0.4 μm共培养和细胞分化、细胞成像原代细胞、肿瘤干细胞0.4 μm、1.0 μm大分子或病毒转运、分泌1.0 μm、3.0 μm细胞迁移和侵袭（血管生成）、细胞趋化作用（迁移）或内皮迁移 轴突增生、共培养内皮细胞、白细胞 神经元3.0 μm细胞迁移和侵袭淋巴细胞、巨噬细胞3.0 μm、5.0 μm肿瘤细胞迁移和侵袭 血细胞趋化作用或经内皮细胞迁移、共培养肿瘤衍生细胞、白细胞 肿瘤干细胞、MSCs8.0 μm细胞小室参数规格配套小室数量（个/块板）小室直径(mm)每孔容积(ml)小室内体积(ml)小室膜生长面积(cm² )6孔板6242.61.54.6712孔板12121.50.51.1224孔板126.50.60.10.33100mm皿17513944膜孔径(um)膜密度（孔/cm² ）0.41x1081.02x1073.02x1065.04x1058.01x105PET（聚酯）膜带盖产品编号 TC处理产品编号 未TC处理产品名称孔径(μm)膜透明度包装规格个/盒个/箱7231217231316孔细胞小室0.4不透明66072412172413112孔细胞小室0.4不透明1212072512172513124孔细胞小室0.4不透明121207234217234316孔细胞小室1全透明66072442172443112孔细胞小室1全透明1212072542172543124孔细胞小室1全透明121207230217230316孔细胞小室3半透明66072402172403112孔细胞小室3半透明1212072502172503124孔细胞小室3半透明121207233217233316孔细胞小室8全透明66072432172433112孔细胞小室8全透明1212072532172533124孔细胞小室8全透明12120PC（聚碳酸酯）膜带盖产品编号 TC处理产品编号 未TC处理产品名称孔径(μm)膜透明度包装规格个/盒个/箱7231017231116孔细胞小室0.4不透明660724101724111 12孔细胞小室0.4不透明1212072510172511124孔细胞小室0.4不透明121207230017230116孔细胞小室3半透明66072400172401112孔细胞小室3半透明1212072500172501124孔细胞小室3半透明1212072420172421112孔细胞小室5半透明1212072520172521124孔细胞小室5半透明121207233017233116孔细胞小室8半透明66072430172431112孔细胞小室8半透明1212072530172531124孔细胞小室8半透明12120PC（聚碳酸酯）膜（TC处理）产品编号产品名称孔径(μm）膜透明度包装规格个/盒个/箱726001100mm 细胞小室 PC（聚碳酸酯）膜 带盖 TC3半透明110细胞小室在细胞实验中很常用，如：共培养实验、趋化实验、细胞迁移实验、细胞侵袭以及药物转运。其中，通透性支持物可以有效改善极性细胞的培养，因为这些支持物允许细胞从其基底面和顶面分泌和吸收分子，从而以更为自然的方式进行代谢，最大程度的模拟体内环境以培养某些特殊的细胞系。聚碳酸酯（PC）膜孔密度较高，允许通过膜完成更多交换，而且具有极佳的细胞粘附特性，所以适用于转运研究和其他需要实现最佳细胞生长的应用。 另外PC膜也非常适用于屏障分析。 在较长时段内相比其他膜材料，具有更高、更持续且更稳定的跨上皮电阻 (TEER) 值。PC膜无需基质包被即可培养大多数类型细胞。 PET膜PET膜孔密度较低，具有更好的光学清晰度，有利于显微镜细胞观察以及细胞成像。创新的边缘设计，加样方便丰富的配套多孔板选择：6孔、12孔、24孔PC膜：低吸附率，减少小分子蛋白和其他化合物的损失PET膜透明度极佳，具有更好的光学清晰度透明的PET膜方便观察细胞状态PC膜不易撕破或卷曲，且取出小室时操作方便与大部分固定与染色时用的溶剂相容使用指南使用时先将培养液加入到多孔板的孔中，将嵌套放入，再将含有细胞的培养液加入嵌套内部；预先平衡：培养液加入到多孔板中，再加入嵌套，然后放入培养箱中培养至少一个小时，也可以过夜；定期检查培养液体积，并按需补加新鲜培养基。但细胞层可以用基本细胞学方法在嵌套中直接固定和染色。注避免使用可以溶解PC膜的溶剂。在嵌套中直接固定和染色细胞，可以用解剖刀将膜割下做长期保存。注意事项在通透性支持物（膜）上生长的细胞的贴附对于起始接种密度很敏感，所以初次使用应接种不同密度保证最佳生长；培养过程中通过上层和孔之间的空隙取液、加液时一定要小心、缓慢操作、避免膜的损坏； 在培养细胞之前将通透性支持物在培养基中孵育可以改善细胞的贴附和分布。 下层培养液和小室间常会有气泡产生，一旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失，所以在接种细胞的时候要特别留心，若产生气泡，要将小室提起，去除气泡，在将小室放进培养板。