色谱适应验

1.介绍沙星类（Quinones，QNs）抗生素（图-1）是一类人工合成的新型杀菌性抗菌药物，具有抗菌谱广、抗菌活性强、与其他抗菌药物无交叉耐药性以及毒副作用小、价格低廉等特点，被大量用于治疗和预防水生动物疾病及促生长。但研究表明，所使用的抗生素仅20%～30%被鱼类吸收，大部分进入环境中，而这部分抗生素再次进入食物链，可能导致养殖环境中病菌耐药性的产生，导致二次污染。这不仅影响到水产养殖业的健康发展，而且还威胁着生态环境的安全。水样中残留喹诺酮类抗生素，通过饮用进入人体，可能对人体肝脏功能造成严重损伤。因此，建立水环境中这类药物的检测方法尤为重要。目前，喹诺酮类药物残留检测方法，主要包括HPLC-UV、HPLC-FD、HPLC-DVD、LC-MS/MS、LC-ESI-MS/MS，另外还有荧光光谱法、毛细管电泳法和酶联免疫法等。图-1. 16种沙星类抗生素的结构式本实验选择MCX阳离子交换柱进行富集、净化，超高压液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）联用技术检测，建立了环境水样中高灵敏的分析方法，该方法有望应用于水产养殖中。关键字：全自动固相萃取；高效液相色谱-串联质谱；抗生素2.仪器、试剂以及耗材Reeko Fotector Plus全自动固相萃取仪（睿科）MCX 固相萃取柱（Oasis，200 mg/6 mL）高效液相色谱：（HPLC）Agilent 1260，质谱检测器（MS）Agilent 6410氮气吹干装置：Reeko AutoEVA-60全自动平行浓缩仪甲醇，乙腈（TEDIA 色谱纯）；甲酸，氨水（优级纯）3.样品制备与净化3.1 固相萃取净化条件全自动固相萃取仪睿科Fotector Plus 60位固相萃取柱MCX（Waters，200 mg/6 mL）活化甲醇淋洗pH=4.0 的甲酸水溶液洗脱5%的氨水甲醇溶液3.2 富集净化依次用甲醇（10mL）和水（10mL）以5.0mL/min的速率活化/平衡和淋洗固相萃取柱，备用。取纯净水样200mL，如为加标样品，请加入标准品（100 μL，100 ppb），加入EDTA-MCIlvaine缓冲溶剂（50mL，0.1 mol/L）调节水环境的pH为4，以5mL/min的速率经固相萃取小柱富集后；用甲酸水溶液（pH=4.0）10 mL以10 mL/min速率淋洗；气推后用10 mL的5%氨水甲醇以1.0mL/min的速率洗脱。收集的样品在25 ℃，5 psi条件下浓缩至近干，流动相乙腈-水溶液（10：90，v/v，0.1 %甲酸）定容至1.0mL，供LC/MS-MS分析。全自动固相萃取方法见图-2。图-2. Fotector Plus水中沙星抗生素固相萃取方法4.液质检测条件4.1 色谱柱条件4.2 MRM参数表-1. 16种抗生素的串联质谱检测参数4.3 16种沙星类抗生素的保留时间谱图5.样品测试5.1基质效应验证取纯净水样，按照上述的样品处理步骤后，氮吹至近干，加入标准使用液（1ppm，20 μL），定容成1mL，供LC/MS-MS检测。如果基质加标浓度准确，则可以直接用标准曲线对样品进行定量；如果不准确，请使用含有基质的工作曲线进行定量。选择定量离子的峰面积作为纵坐标，浓度作为横坐标，做相关曲线，曲线为线性回归，各点权重相等，拟合出工作曲线，要求R20.99；此曲线两周需要重新配置一次。5.2 样品基质加标测试对桶装纯净水和生活废水进行加标实验，加标浓度为低浓度（25 ng/L）、中浓度（50 ng/L）和高浓度（100 ng/L），结果如表-2所示：除了恩诺沙星和司帕沙星在76.9%~79.4%外，大部分的加标回收率在82.5%~114.2 %之间，RSD 1.5%~16.6%。该方法能够实现对水样中16种喹诺酮抗生素进行检测。表-2 不同水样的加标回收率5.3 不同类型固相萃取柱对沙星类化合物的富集效果取纯净水为样品，加标的质量浓度分别为50 ng/L，按照上述方法，进行4平行样测定，考察该方法的不同固相萃取柱的回收率和重现性，分析结果如图-4所示：纯净水中抗生素的平均回收率分布在65.00%-91.38%（HLB），71.21%-152.28%（MAX）和77.41 % -123.21 %（MCX）。HLB回收率普遍偏低，MAX柱中沙星的回收率偏高，培氟沙星和氧氟沙星的回收率均超过了140 %，而且MAX柱需要在水样中加入氢氧化钠，容易造成水样中金属离子的水解沉淀，容易造成管路的堵塞。相比之下MCX柱的平行性比HLB柱和MAX好，回收率大部分在90 %-110%之间，除了恩诺沙星回收率偏低，只有77.41 %。图-4. 三种柱子的回收率对比6.结果与讨论6.1 对于16种沙星类化合物在水中的富集方法，应考虑实验过程中基质对化合物检测的干扰。此步的干扰不仅来自于水样中杂质干扰，同时商业化的固相萃取小柱，使用的色谱级溶液等等都存在干扰杂质，因此需要进行基质效应确认，以避免前处理富集过程中存在基质效应。6.2 氮吹浓缩过程中应控制吹干程度，不可过分干燥。6.3 对于沙星类的两性化合物，在pH=7.0左右时，主要以带负电荷的形式存在水溶液中，此时进行富集，固相小柱无法对目标物进行吸附。因此需要进行pH调节至4.0左右，使其成为带铵根的正离子，利于下一步进行阳离子交换柱富集。6.4 淋洗时采用甲酸酸化的水溶液，利于将固相萃取小柱中残留的EDTA除去，避免其在后续的洗脱液中干扰沙星类化合物的检测。

2013年1月22日，中国上海 &mdash &mdash 科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技（以下简称：赛默飞）近日推出全新的便携式能谱仪&mdash &mdash Thermo Scientific RIIDEye便携式能谱仪-发现、查明核辐射，服务核安全。可满足现场快速核素分析的要求，提供丰富的测量信息，适应于广泛的辐射测量应用领域。该仪器可精确识别放射性核素；并实时显示剂量率，可进行特殊核材料（SNM）探测；具有ANSI要求的88种核素的核素库，可扩展至125种。该仪器具有QCC专利谱分析技术，Hysteresis专利技术以及专业的Quantum谱分析软件。 RIIDEye G型号为 2〃x 2〃NaI探测器 RIIDEye GN型号为2〃x 2〃 NaI探测器+1〃x 1/8〃6LiI(Eu)中子探测器 RIIDEye Hi-Res为1.5〃x 1.5〃 LaBr探测器&mdash &mdash 分辨率高，对于662keV峰的典型分辨率为3%。更多信息请登陆http://www.thermo.com.cn/Product6543.html 关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技（纽约证交所代码： TMO）是科学服务领域的世界领导者。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。公司年销售额120亿美元，员工约39,000人。主要客户类型包括：医药和生物技术公司、医院和临床诊断实验室、大学、科研院所和政府机构，以及环境与过程控制行业。借助于Thermo Scientific、Fisher Scientific和Unity&trade Lab Services三个首要品牌，我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合，为客户、股东和员工创造价值。我们的产品和服务帮助客户解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战，促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。欲了解更多信息，请浏览公司网站：www.thermofisher.com关于赛默飞中国赛默飞世尔科技进入中国发展已有30年，在中国的总部设于上海，并在北京、广州、香港、成都、沈阳、西安等地设立了分公司，目前已有2200名员工、5家生产工厂、5个应用开发中心、2个客户体验中心以及1个技术中心，成为中国分析科学领域最大的外资企业。赛默飞的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等，提供实验室综合解决方案，为各行各业的客户服务。赛默飞在北京和上海共设立了5个应用开发中心，将世界级的前沿技术和产品带给国内客户，并提供应用开发与培训等多项服务；位于上海的中国技术中心结合国内市场的需求和国外先进技术，研发适合中国的技术和产品；遍布全国的维修服务网点和特别成立的维修服务中心，旨在提高售后服务的质量和效率。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息，请登录www.thermofisher.cn

8月29日，济郑高铁山东段启动联调联试。在这段全长170公里设计时速350公里的铁路沿线，600多台探测仪在全天候、无死角地监控着线路的营运环境。这些“电子哨兵”来自和普威视光电股份有限公司，公司上榜山东省民营企业创新潜力百强，是济南市新一代信息技术产业的重要力量。“鹰眼”神器护卫40多条高铁在自然界，翱翔长空的雄鹰凭借一双锐利的眼睛，能够从高空俯冲而下准确捕捉到地面猎物。科学研究表明，与人类的眼睛相比，鹰眼不仅看得更远更清晰，而且还看得更多更丰富。除了视野上的差距外，鹰眼不仅可以看到人类能看到的可见光，还可以看到紫外线和红外线等其他波长范围内的光线。和普威视的特种光电产品具备远超鹰眼的能力。创立于2011年，和普威视是国内最早涉足激光夜视、红外热成像等特种光电技术的高新技术企业之一。公司专注于全天候多光谱智能成像技术的研究与开发，综合运用多光谱成像手段以及基于AI的图像分析处理技术，为用户提供远距离、高清晰、智能化、多用途、全天候、复杂环境下的综合光电系统解决方案。和普威视研制的非制冷热成像摄像机，可实现22700米范围内搜索观察；激光摄像机，夜视距离可达3000米，最高可达400万像素分辨率。对于时速三百多公里的高铁来说，及时发现并处置线路上的安全问题十分重要。和普威视的产品凭借先进技术优势，已为40多条高路铁路放哨护卫。技术工人在调试摄像镜头低空防卫系统防护10多项重大活动近年来随着安全防护形势的变化，在一些重大活动中低空防卫越来越有必要。严密的低空防卫，同样需要一双“火眼金睛”。和普威视副总经理张鑫介绍，在重大活动中如果有无人机入侵，公司研制的低空防卫系统可以实现探测预警、跟踪识别、无线电反制以及导航诱骗，甚至还能对飞手进行定位。和普威视产品已承担过国内10多项重大活动的低空预警任务，这些活动包括国庆70周年阅兵、建党100周年阅兵、上海国际马拉松、中非合作论坛、青岛上合峰会等。和普威视自主研制的综合光电系统融合了高清可见光、红外热成像、激光夜视中的两种或以上技术，实现了可适应白天、夜晚、雨、雪、雾、霾等全天候环境，兼备大范围覆盖及重点目标跟踪监控的目的。和普威视推动“人工智能+特种光电”“超高清视频+工业互联网”的深度融合，促进产业迭代升级，新一代光电产品以红外热成像、激光夜视技术为核心，以人工智能关键共性技术为依托，优化组合各种技术优势，促进视频图像识别、深度学习、生物特征识别、智能控制与传感、智能算法的跨界创新应用。和普威视车间内的焊接区硬科技和高成长引来融资超亿元和普威视是国家级专精特新“小巨人”企业、省瞪羚企业和制造业单项冠军企业，拥有多个省市研发平台。参与制定了轨道交通行业激光夜视等技术标准，连续获得省科技进步奖、省企业技术创新奖。取得国家专利89项，著作权69项。和普威视旗下产品，可以在零下45摄氏度低温条件下连续工作12小时。其AI视频分析技术支持对5×5像素以下的小目标实现入侵告警检测，支持对15×15像素以下的超小目标进行检测识别，支持检测人、车、船、动物、鸟、无人机、空飘物、飞机、起落架等各种目标。技术工人在车间内组装产品近三年来，和普威视营业收入增幅年均30%左右，利润总额增长率年均超100%。今年8月，和普威视上榜山东民营企业创新潜力百强。硬科技和高成长性赢得了资本的青睐。2016年，山东华宸股权投资基金投资1000万元。2019年，山东科融天使创业投资基金等投资3500万元。2021年，毅达资本、山东新动能股权基金等投资9000万元。和普威视董事会秘书王卫光告诉记者，公司总部于2021年从北京迁至济南，希望在北交所上市，募集资金将用于巩固并拉长产业链，持续提高公司产品和技术的核心竞争力。