冻存器具

德国VITLAB量器具少量库存特价促销数量有限，售完为止，勿失良机，预购从速。咨询电话：021-51693889，传真：021-61304216量筒规格　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　特价10ml量筒 B级（材质PMP、PP、SAN），最小刻度0.2ml 　　　14.00 25ml量筒 B级（材质PMP、PP），最小刻度0.5ml 　　　　　　　18.00 50ml量筒 B级（材质PMP、PP、SAN），最小刻度1ml 　　　　　22.00 100ml量筒 B级（材质PMP、PP、SAN），最小刻度1ml 　　　　　30.00 250ml量筒 B级（材质PP、SAN），最小刻度2ml 　　　　　　　　45.00 500ml量筒 B级（材质SAN），最小刻度5ml 　　　　　　　　　　70.00 1000ml量筒 B级（材质PP），最小刻度10ml 　　　　　　　　　　80.00 2000ml量筒 B级（材质PMP、PP），最小刻度20ml 　　　　　　　150.00 容量瓶规格　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　特价容量瓶 B级 25ml PP 3　　　　　　　　　　　　　5.00 容量瓶 B级 50ml（材质PMP) 　　　　　　　　　　54.00 容量瓶 B级 250ml（材质 PP、PMP) 　　　　　　　60.00 容量瓶 B级 500ml（材质 PP、PMP) 　　　　　　　65.00 容量瓶 B级 1000ml（材质 PP、PMP) 　　　　　　75.00 带柄烧杯规格　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　特价250ml带柄烧杯（材质PP、SAN），最小刻度5ml 　　　　12.00 500ml带柄烧杯（材质PP），最小刻度10ml 　　　　　　13.00 1000ml带柄烧杯（材质PP、SAN），最小刻度10ml 　　　20.00 2L PP带柄烧杯（蓝色刻度），最小刻度20ml 　　　　　　40.00 3L PP带柄烧杯（蓝色刻度），最小刻度50ml 　　　　　　57.00 规格　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　特价滴定管 B级 25ml（材质 PTFE）最小刻度 0.05ml 　　　　420.00 滴定管 B级 50ml（材质 PTFE）最小刻度 0.10ml 　　　　440.00 刻度移液管 1ml（材质 PS） 最小刻度 0.01ml 　　　　　2.00 刻度移液管 2ml（材质 PS） 最小刻度 0.01ml 　　　　　2.00 刻度移液管 5ml（材质 PS） 最小刻度 0.10ml　　　　　 3.00 刻度移液管 1ml（材质 PP） 最小刻度 0.10ml 　　　　　45.00

p　　从上海市质量技术监督局官网获悉，近期，浦东新区市场监管局(质量发展局)开展环境监测用计量器具专项检查，这是浦东新区范围内首次对此类计量器具开展排摸检查。/pp　　本次检查共涉及辖区内17家环境监测单位和28家重点排污企业，以企业自查和执法检查相结合的方式，对在用的大气、水、土壤、噪声等环境监测领域计量器具的配备、检定和管理情况进行重点检查。除1家企业已确认停产，其余均递交了自查报告。根据自查情况，浦东新区市场监管局(质量发展局)与区环保局组成了联合检查组，抽取了8家环境监测单位和5家重点排污企业，开展现场检查。/pp　　经查，环境监测单位总体情况较好，计量器具台账清晰、计量管理人员计量检定意识清楚，检定校准基本按照检定周期计划表开展，其检查前强制检定率为97.0%，检查后经整改，受检率达100%，存在的主要问题是少数计量器具超周期检定。重点排污企业计量器具管理不够完善，存在的主要问题是管理人员对强制检定、检定和校准的概念模糊，部分应强制检定的计量器具采用校准。其检查前强制检定率为87.1%，检查后经整改，受检率达100%。针对检查中发现的问题，已责令企业立即进行整改，目前，企业整改已基本完成。/p

一、程序冻存步骤△（需梯度降温）1、配置冻存液，冻存液推荐配比：55%（基础培养基）+40%(血清)+5%（DMSO）或90%胎牛血清+10%DMSO；推荐使用澳睿赛通用血清型程序冻存液，货号ORCPB0436；2、制备好的细胞悬液计数，计算总细胞量；3、细胞离心后尽量吸干净上清，离心转速1200rpm（250g）3min；4、加入配置好的冻存液重悬，调整细胞浓度为3×106~1×107cells/mL；5、分装入冻存管，一个冻存管分装1~1.5毫升；6、推荐使用程序降温盒，分装好的冻存管转入程序降温盒后直接放入-80℃冰箱过夜；7、如没有程序降温盒，则按下列顺序依次降温：室温→4℃20min→-20℃30min→-80℃过夜→液氮保存，注意转移过程中要保冷，避免产生温差或冻存管融化；8、从-80℃冰箱取出冻存管迅速转移到液氮长期保存。△注意事项：1、DMSO配制的时候会放热，一定要等冻存液冷却后使用，避免灼伤细胞；2、细胞离心后尽量吸干净上清液，减少培养基残留，避免稀释冻存液；3、不建议手动梯度降温，温度不稳定，容易降低存活率；4、注意程序降温盒内异丙醇的量必须高于最低刻度线；冻存5次后异丙醇需要更换一次，以免影响冻存效果；程序降温盒需恢复到室温以后才能继续使用，不能从冰箱拿出来直接使用；5、细胞悬液加入冻存液以后尽量短时间的在常温放置，DMSO常温下对细胞损伤大，分装完成后立即转入程序降温盒放到-80度冰箱，不需要放4度；6、-80度冻存过夜后可以转入液氮长期保存，转入液氮的过程需要对冻存盒进行保冷，不要长时间在常温暴露，避免冻存管融化；7、若没有液氮罐，存放在-80度的时候一定要放靠里面的位置，避免开关冰箱导致温度不稳定。8、细胞冻存后应取出一管复苏，检测细胞的存活率。理论上细胞可在液氮内长期保存，为稳妥起见可在细胞冻存半年后复苏培养，观察细胞生长情况，再继续冻存；二、非程序冻存步骤△（需使用无血清冻存液）1、冻存液丛冰箱提前拿出回温到室温，推荐澳睿赛无血清细胞冻存液，货号ORC90100；2、制备好的细胞悬液计数，计算总细胞量；3、细胞离心后尽量吸干净上清，离心转速1200rpm（250g）3min；4、加入无血清细胞冻存液（ORC90100）重悬，调整细胞浓度为3×106~1×107cells/mL；5、分装入冻存管，一个冻存管分装1~1.5毫升；6、分装好的冻存管直接转入-80度冰箱过夜，不需要程序降温盒；7、转入液氮途中需将冻存管做好保冷措施，避免直接暴露于常温，快速转入液氮罐进行长期保存；△注意事项：1、由于没有使用冻存盒，在转入液氮的过程中一定要对冻存管做好保冷措施，不能直接用手拿，可以用干冰或者少量液氮保护后转移，操作过程注意安全；2、转移过程要快，避免冻存管暴露于常温后融化；3、若没有液氮罐，存放在-80度冰箱的时候一定要放靠里面的位置，避免开关冰箱导致温度不稳定；三、细胞复苏步骤1、将水浴锅预热至37℃，准备好干净的一次性PE手套，一个无菌离心管内加入9ml无菌培养基；2、将细胞从液氮罐中取出放入PE手套中，迅速没入水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1分钟内全部溶解为宜；3、在超净台中将复苏好的细胞液加入到装有新鲜培养基的离心管内，1200rpm/min离心3分钟，离心完毕去掉上清；4、用适量与细胞对映的完全培养基重悬细胞，接入到无菌容器中（培养瓶或培养皿），补充培养基到适宜，放入培养箱培养；△注意事项：1、水浴锅的位置如果与液氮罐不是一个房间，需要对冻存管进行保冷后转移到水浴锅旁，避免路途细胞表面融化；2、细胞溶解过程快速摇晃以加速溶解；3、已溶解的冻存细胞尽量短时间的在常温存放，尽快离心去除DMSO；4、贴壁细胞复苏24小时后观察，若密度达到80%，则正常传代；若密度不到80%则继续培养到48小时再换液；5、悬浮细胞复苏3天内不建议离心换液；6、对DMSO不敏感的细胞在复苏时也可不离心，减少操作步骤，也可降低污染的几率。将解冻的细胞悬液直接转移至T25细胞瓶内，补加新鲜培养基，放入温箱内培养。但培养12~24h后必须换新鲜的培养基，移除死细胞。