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[font=宋体][font=宋体]膜联蛋白([/font][font=Calibri]Annexin[/font][font=宋体])是一类分布广泛的钙依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸([/font][font=Calibri]PS[/font][font=宋体])能特异性结合,参与一系列[/font][font=Calibri]Ca2+[/font][font=宋体]依赖型的膜相关的过程,包括细胞的胞吐和内吞作用、囊泡运输、调节血液凝固以及炎症反应等多种生物学事件,在许多人类疾病的发病机制或进展中起着非常重要的作用。膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]Annexin V[/font][font=宋体])染色是检测细胞凋亡的常用方法。[/font][/font][b][font=宋体][font=宋体]膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色原理及应用[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]一、膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色原理[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色,也称为[/font][font=Calibri]Annexin V[/font][font=宋体]染色,是一种用于检测细胞凋亡的方法。其核心原理基于细胞凋亡过程中的一种生物化学变化。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸([/font][font=Calibri]PS[/font][font=宋体])只分布在细胞膜脂质双层的内侧。然而,当细胞开始凋亡时,这一分布会发生改变,磷脂酰丝氨酸会从细胞膜内侧翻到外侧。膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]是一种能够与这种外翻的磷脂酰丝氨酸特异性结合的蛋白。通过结合荧光物质,这种结合可以被检测和观察,从而确定哪些细胞正在经历凋亡。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]二、膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色的应用[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①流式细胞术:膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色常用于流式细胞术中,以检测和分类正常细胞和凋亡细胞。通过流式细胞仪,可以快速分析大量细胞,并准确地识别出凋亡细胞。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]②光学显微镜成像:膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色也可用于光学显微镜成像技术,这使得研究者能够在显微镜下直接观察细胞的形态变化,从而对凋亡过程有更深入的理解。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]③与其他染色方法的结合:膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色可以与其他染色方法如碘化丙啶[/font][font=Calibri](PI)[/font][font=宋体]染色结合使用。[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]是一种能够进入凋亡晚期细胞核的染料,因此可以用于区分凋亡早期和晚期细胞。这种联合使用的方法能提供更全面的细胞凋亡信息。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]④临床应用:膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色在许多临床领域中都有应用,例如肿瘤学、血液学和药理学等。它可以帮助研究者深入理解疾病的发展过程,评估新药物对细胞凋亡的影响,以及监测疾病的进展和治疗的效果。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]总的来说,膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色是一种强大的工具,可以帮助科学家们更好地理解细胞凋亡的过程,从而为疾病的治疗和药物研发提供有价值的信息。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]更多关于膜联蛋白详情可以关注[url=https://cn.sinobiological.com/][b]义翘神州[/b][/url]![/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
蛋白多肽多肽:多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽,它们的分子量低于10,000Da(Dalton,道尔顿),能透过半透膜,不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽(小分子肽);10~50个氨基酸组成的肽称为多肽;由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质。蛋白质:生物体中广泛存在的一类生物大分子,由核酸编码的α氨基酸之间通过α氨基和α羧基形成的肽键连接而成的肽链,经翻译后加工而生成的具有特定立体结构的、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定顺序结合形成一条多肽链,再由一条或一条以上的多肽链按照其特定方式结合合而成的高分子化合物。蛋白偶联KLH/BSA/Ovalbumin etc 偶联小肽/半抗原必须耦合到载体蛋白(KLH,BSA,Ova),才可以获得高效的抗体。一般来说,多肽可以与蛋白偶联的条件如下:1 有一个自由的氨基或羧基2 半胱氨酸上的-SH也可以与载体蛋白偶联目前我公司提供高质量的偶联载体蛋白(KLH,BSA,OVA)[img=,690,300]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902191022256586_4193_3531468_3.jpg!w690x300.jpg[/img]我们主要提供:多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。请移步百度搜“[b]合肥国肽生物[/b]”即可
[font=宋体][font=宋体]跨膜蛋白([/font][font=Calibri]TMEM[/font][font=宋体])是一种跨越细胞质膜的蛋白家族,允许细胞[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]细胞和细胞[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]环境之间的联系。结构决定性质,性质决定功能,一般单次跨膜主要起锚定作用,多次跨膜能形成疏水孔道,发挥运输的功能。这里我们将讨论膜蛋白的结构,并说明它们与脂质双分子层的不同关联方式。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]对膜成分而言,脂质分子数多,但膜蛋白质量较大[/font][/font][font=宋体][font=宋体]我们知道,脂质双分子层提供了细胞膜的基本结构,并作为膜两侧分子的渗透屏障,但是大多数膜的功能其实是由膜蛋白完成的。在动物中,蛋白质约占大多数质膜质量的[/font][font=Calibri]50%[/font][font=宋体],其余是脂质加上糖脂和糖基化蛋白中相对较少的碳水化合物。然而,由于脂质分子比蛋白质小得多,细胞膜通常含有的脂质分子大约是蛋白质分子的[/font][font=Calibri]50[/font][font=宋体]倍。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]不同类型的膜蛋白发挥诸多功能[/font][/font][font=宋体]膜蛋白不仅通过脂质双分子层运输特定的营养物质、代谢产物和离子;它们还有许多其他功能:有些将膜固定在两侧的大分子上;有些能作为受体,检测细胞环境中的化学信号,并将其传递到细胞内部;还有一些作为酶发挥功能,催化特定反应。每种类型的细胞膜都含有不同的蛋白质,反映了特定细胞膜的特殊功能。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]蛋白质可以通过多种方式与膜的脂双层相关联[/font][/font][font=宋体][font=宋体]直接附着在脂质双分子层上的蛋白质(如图[/font][font=Calibri]3-A,B,C[/font][font=宋体])只有用洗涤剂破坏双分子层才能被去除,这种蛋白质被称为膜内在蛋白,其余的膜蛋白称为膜外周蛋白(如图[/font][font=Calibri]3-D[/font][font=宋体]),它们可以通过更温和的提取过程从膜中释放出来,这一过程会干扰蛋白质与蛋白质之间的相互作用,但会使脂质双层结构保持完整。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]许多膜蛋白穿过脂双层,部分区域位于双层膜的两侧[/font][font=Calibri](A)[/font][font=宋体]。这些跨膜蛋白具有疏水性和亲水性区域。它们的疏水区域位于双层膜的内部,紧靠着脂质分子的疏水尾部。它们的亲水性区域暴露在膜的两侧的水环境中。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]有的膜蛋白几乎完全位于胞质,与脂质双分子层相互作用的是蛋白表面的[/font][font=宋体]α螺旋结构[/font][font=Calibri](B)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]有些蛋白质完全位于双层膜外(内侧或外层),仅通过一个或多个共价附着的脂类基团与膜相关联[/font][font=Calibri](C)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]还有些蛋白质通过与膜蛋白的相互作用,间接地与膜表面相结合[/font][font=Calibri](D)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]多肽通常以α螺旋的形式穿过脂双层[/font][/font][font=宋体][font=宋体]对于许多跨膜蛋白,多肽链只穿过膜一次,这些蛋白质中有许多是细胞外信号的受体。形成[/font][font=Calibri]a[/font][font=宋体]螺旋的氨基酸的疏水侧链与磷脂分子的疏水烃尾相接触,多肽主链的亲水部分在螺旋内部相互形成氢键。一个完全穿过膜的α螺旋结构需要包含[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]个氨基酸。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]膜蛋白[/font][font=Calibri]x[/font][font=宋体]射线结晶学的进展使许多膜蛋白的三维结构得以确定。根据这些主要特征构建模型(片段包含约[/font][font=Calibri]20-30[/font][font=宋体]个氨基酸、具有高度疏水性),通常可以从蛋白质的氨基酸序列预测多肽链的哪些部分延伸到脂双层。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5. [/font][font=宋体]跨膜α螺旋常和其他α螺旋互作或组合形成孔道[/font][/font][font=宋体][font=宋体]有的跨膜蛋白形成水通道,允许水溶性分子穿过膜,这样的孔道不能由具有单一的、均匀疏水的、跨膜螺旋结构的蛋白质形成。形成孔隙的蛋白质更为复杂,通常具有一系列的[/font][font=宋体]α螺旋多次穿过双层膜。许多单通道膜蛋白形成同源或异源二聚体,这些二聚体由两个跨膜螺旋之间的非共价、但强而特异的相互作用结合在一起,这些螺旋的疏水氨基酸序列包含指导蛋白质[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]蛋白质相互作用的信息。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在有些包含多个跨膜结构的蛋白质中,跨膜区域是由包含疏水性和亲水性氨基酸侧链的螺旋形成的。这些氨基酸的排列使得疏水侧链落在螺旋的一侧,而亲水侧链则集中在螺旋的另一侧。在脂双层疏水环境中,这类[/font][font=宋体]α螺旋呈环状并排排列,疏水侧链暴露于膜的脂质上,亲水侧链通过脂质双层形成亲水孔的内衬。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6. [/font][font=宋体]一些β折叠片多次跨膜形成大的离子通道[/font][/font][font=宋体][font=宋体]虽然到目前为止,[/font][font=宋体]α螺旋是多肽链穿过脂双层的最常见的形式,某些多肽链却是以β折叠穿过脂双层。膜蛋白以β折叠片的形式穿过脂质双分子层,被弯曲成圆柱形,形成一个开放式的桶状结构,称为β折叠桶。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]β片层的数目变化较大,少的可以有[/font][font=Calibri]8[/font][font=宋体]个,多的可以多达[/font][font=Calibri]22[/font][font=宋体]个。面朝桶内的氨基酸侧链主要是亲水的,而桶外的那些接触脂双层疏水核心的侧链则完全是疏水的。与α螺旋不同,β折叠桶只能形成宽的通道,因为β折叠片弯曲成桶的紧密程度是有限制的,不如α螺旋灵活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]综上,膜的功能主要体现在膜蛋白的多样性上,膜蛋白的结构决定其功能。不同功能的膜蛋白其结构基础存在差异,因此其与膜骨架的关联方式也有不同。像膜偶联受体、膜偶联酶这些膜蛋白可能通过单次跨膜或者共价修饰,就能锚定在膜上实现其功能。而作用于底物转运的膜蛋白必须提供一个较大的亲水孔道,才能使水溶性的带电离子等底物通过,因此不同的[/font][font=宋体]α螺旋之间倾向于互作,或者同一个蛋白具有多个互作的α螺旋,或者通过β折叠形成桶状孔隙发挥功能。根据跨膜蛋白的疏水特性及跨膜区域的结构特点,可以对跨膜蛋白及其跨膜区段进行预测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][b]义翘神州提供三大[/b][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白[/b][/url][b]制备平台,有[/b][/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台、去垢剂技术平台、[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台,详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font][font=Calibri] [/font]