大鼠垂体细胞
产品名称 | 大鼠垂体细胞 | 组织来源 | 垂体组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
种属 | 大鼠 | 细胞形态 | 梭形或多角形细胞 |
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常垂体组织。
2)细胞鉴定:LH、FSH与PRL免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:梭形或多角形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基:
我们推荐使用 Delf 原代上皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
垂体是机体的重要的内分泌腺体,由生长激素和促肾上腺皮质激素细胞等细胞构成,在机体的生长发育、生命活动、内分泌调节以及衰老死亡过程中起着重要意义。因此,垂体细胞的体外培养为进一步研究垂体与生殖的神经内分泌调节机制及垂体移植研究等方面提供了基础和前提。
原代培养原理和应用:
一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。
二、原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。
三、原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
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贴壁细胞传代操作步骤:
用移液管或者巴氏吸管吸取培养液;
使用不含钙镁离子的平衡盐溶液(PBS)冲洗细胞1-2次;
弃PBS,加入胰蛋白酶-EDTA消化液(消化液浓度根据各细胞不同有调整),轻轻摇晃培养瓶,使胰酶与细胞表面充分接触,37 ℃孵育2-3 min,加入含血清完全培养基终止消化。
将细胞悬液移入离心管中,800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清,加入预热的完全培养基重悬细胞,轻轻吸打混匀,吹打过程中尽量不要出现气泡。
细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。
悬浮细胞传代操作步骤:
悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。
(1)直接传代法
① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代;
② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3;
③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。
(2)离心传代法
① 将细胞悬液转移到离心管内;
② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清;
③ 使用新鲜的培养基重悬细胞;
④ 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。
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