大鼠表皮干细胞

大鼠表皮干细胞

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常皮肤组织。

2)细胞鉴定：p63与细胞角蛋白-14（CK-14）免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 角质形成 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。

细胞简介：

角质形成细胞在基底层有一亚群，即表皮干细胞，它通过对称或不对称分裂产生短暂扩增细胞，短暂扩增细胞经过几代扩增后便成为终末分化的表皮角质细胞。表皮是一个可以持续自我更新的组织，因此表皮干细胞具有足够的增殖潜力，表皮干细胞不仅在体内平衡和创伤修复中其关键作用，而且是肿瘤发生和基因治疗的主要靶标。

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
公司正在出售的产品：

PTC209 HBr  1217022-63-3  C17H13Br2N5OS.HBr

Ethinyl Estradiol  57-63-6  C20H24O2

E-3810  1058137-23-7  C26H25N3O4

B-Raf inhibitor  1315330-11-0  C29H31F3N6O2

Acetyl-Calpastatin (184-210) (human)  123714-50-1  C142H230N36O44S

Endoxifen  112093-28-4  C25H27NO2

RO4987655  874101-00-5  C20H19F3IN3O5

KPT-276  1421919-75-6  C16H10F8N4O

Deltorphin I  122752-15-2  C37H52N8O10

ENMD-2076 L-(+)-Tartaric acid  1291074-87-7  C25H31N7O6

Bisindolylmaleimide II  137592-45-1  C27H26N4O2

BAY 61-3606 dihydrochloride  648903-57-5  C20H20Cl2N6O3

CCMQ  132623-44-0  C12H9NO4

5,15-DPP  22112-89-6  C32H22N4

Gambogic Acid  2752-65-0  C38H44O8

小鼠酰NA合成酶复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)ELISA试剂盒 ，英文名： AIMP1 ELISA Kit

人胸腺表达趋化因子(TECK/CCL25)ELISA检测试剂盒Humahymusexpressedchemokine,TECKELISAKit 96T/48T

大鼠角化细胞生长因子(KGF)免疫试剂盒 Rat Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit

英文名称RatSubstancePELISAKit大鼠P物质(SP)规格：96T/48T

咖啡糖精(saccharin)含量紫外光谱法定量检测试剂盒20次

ELISAKitHyp人羟脯氨酸规格：48T/96T

大鼠表皮干细胞小鼠CD45分子(CD45)ELISA试剂盒 ，英文名： CD45 ELISA Kit

大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA检测试剂盒Ratansforminggrowthfactorsβ2,TGFβ2ELISAKit 96T/48T

人Coll2-1 免疫试剂盒 人Coll2-1 ELISA Kit

英文名称MouseIerferongammaELISAKit小鼠干扰素γ(IFNγ)ELISAKit规格：96T/48T

冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB间接检测试剂盒(含HRP二抗)20次

Ratapelin12,AP12ELISA试剂盒大鼠apelin12(AP12)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠羧甲基赖酸(CML)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒

HumanIerleukin1βconveingenzyme,ICEELISAKit 人白介素1β转换酶(ICE)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

DeerInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISA试剂盒胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞线粒体复合物III蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。