原代培养原理和应用:
一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。
二、原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。
三、原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
猪主动脉内皮细胞
产品名称 | 猪主动脉内皮细胞 | 组织来源 | 主动脉组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
传代特性 | 可传2-3代 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的猪主动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的猪主动脉内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
细胞简介:
猪主动脉内皮细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞,可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态,当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管的发生。因此,主动脉内皮细胞已成为研究心血管发病机制及不可缺少的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞,由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统,由心脏直至小的微血管。
贴壁细胞传代操作步骤:
用移液管或者巴氏吸管吸取培养液;
使用不含钙镁离子的平衡盐溶液(PBS)冲洗细胞1-2次;
弃PBS,加入胰蛋白酶-EDTA消化液(消化液浓度根据各细胞不同有调整),轻轻摇晃培养瓶,使胰酶与细胞表面充分接触,37 ℃孵育2-3 min,加入含血清完全培养基终止消化。
将细胞悬液移入离心管中,800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清,加入预热的完全培养基重悬细胞,轻轻吸打混匀,吹打过程中尽量不要出现气泡。
细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。
悬浮细胞传代操作步骤:
悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。
(1)直接传代法
① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代;
② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3;
③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。
(2)离心传代法
① 将细胞悬液转移到离心管内;
② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清;
③ 使用新鲜的培养基重悬细胞;
④ 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。
公司正在出售的产品:
PF 945863 893556-85-9 C44H65N5O10
Filipin III 480-49-9 C35H58O11
PD 161570 192705-80-9 C26H35Cl2N7O
Droxidopa 23651-95-8 C9H11NO5
Amiloride HCl dihydrate 17440-83-4 C6H8ClN7O.HCl.2H2O
DSP-4 40616-75-9 C11H15BrClN.HCl
CUDA 479413-68-8 C19H36N2O3
Trovafloxacin mesylate 147059-75-4 C20H15F3N4O3.CH3SO3H
LY 303511 154447-38-8 C19H18N2O2
iMAC2 335166-36-4 C19H20Br2FN3.2HCl
TC-I 15 916734-43-5 C23H28N4O6S2
RG 13022 136831-48-6 C16H14N2O2
Cyclizine 2HCl 5897-18-7 C18H22N2.2HCl
L-Kynurenine 2922-83-0 C10H12N2O3
SNC 162 178803-51-5 C27H37N3O
小鼠腺病毒IgG抗体(ADV IgG)ELISA试剂盒 ,英文名: ADV IgG ELISA Kit
小鼠白介素7(IL-7)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin-7,IL-7ELISAkit 96T/48T
人红细胞生成素(EPO)免疫试剂盒 Human Erythropoietin,EPO ELISA Kit
RatC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit大鼠C型尿肽(CNP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
3,4-二氢嘧啶同衍生物Monasol(K-ATPase抑制剂)
MouseCyclosporineA,CsAELISA试剂盒小鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
猪主动脉内皮细胞小鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat pepsin (Pepsin) ELISA Kit 大鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒
Humancatecholamine,CAELISAKit 人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCompleme1q,C1qELISA试剂盒人补体1q(C1q)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量检测试剂盒20次
Humanpunjecellaoaibody,PCA-1/YoELISAKit人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat cyclic guanosine monophosphate (cGMP) ELISA Kit 大鼠环0酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒
Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Chickenβ-lactamaseELISA试剂盒鸡β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞βAMYLOID蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MouseEotaxin1ELISAKit小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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