原代培养原理和应用:
一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。
二、原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。
三、原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
大鼠肠间质细胞
产品名称 | 大鼠肠间质细胞 | 组织来源 | 肠组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
种属 | 大鼠 | 细胞形态 | 梭形细胞 |
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常肠组织。
2) 细胞鉴定:c-kit免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基:
我们推荐使用 Delf 原代间质 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
Cajal间质细胞以网络状分布在消化道肠神经系统末梢与平滑肌细胞之间的一类特殊细胞。胃肠道运动功能的产生和维持是Cajal间质细胞、肠神经系统以及平滑肌细胞三者协同作用的结果。间质细胞不仅能自发产生节律性慢波,而且能介导肠神经系统与平滑肌间的信号调节。
贴壁细胞传代操作步骤:
用移液管或者巴氏吸管吸取培养液;
使用不含钙镁离子的平衡盐溶液(PBS)冲洗细胞1-2次;
弃PBS,加入胰蛋白酶-EDTA消化液(消化液浓度根据各细胞不同有调整),轻轻摇晃培养瓶,使胰酶与细胞表面充分接触,37 ℃孵育2-3 min,加入含血清完全培养基终止消化。
将细胞悬液移入离心管中,800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清,加入预热的完全培养基重悬细胞,轻轻吸打混匀,吹打过程中尽量不要出现气泡。
细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。
悬浮细胞传代操作步骤:
悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。
(1)直接传代法
① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代;
② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3;
③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。
(2)离心传代法
① 将细胞悬液转移到离心管内;
② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清;
③ 使用新鲜的培养基重悬细胞;
④ 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。
公司正在出售的产品:
(-)-Terreic acid 121-40-4 C7H6O4
(R)-Nepicastat HCl 195881-94-8 C14H15F2N3S.HCl
2-Iminopiperidine hydrochloride 16011-96-4 C5H10N2.HCl
ITK inhibitor 439574-61-5 C31H39N5O4S2
[D-Trp7,9,10]-Substance P 89430-38-6 C79H105N21O13S
SKF 81297 hydrobromide 67287-39-2 C16H16ClNO2.HBr
HZ52 1077626-51-7 C24H26ClN3O2S
AKTide-2T 324029-01-8 C74H114N28O20
Acesulfame Potassium 55589-62-3 C4H5NO4S.K
PG 106 944111-22-2 C51H69N13O9
Zebularine 3690/10/6 C9H12N2O5
L-AP5 79055-67-7 C5H12NO5P
OTSSP167 hydrochloride 1431698-10-0 C25H29Cl3N4O2
DuP 697 88149-94-4 C17H12BrFO2S2
CP 471474 210755-45-6 C16H16FN2O5S
小鼠纤维连接蛋白(FN)ELISA试剂盒 ,英文名: FN ELISA Kit
牛乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA检测试剂盒BovineAcetoaceticacid,ACACELISAKit 96T/48T
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)免疫试剂盒 Human 8-Hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG ELISA kit
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RatClusterin,CLUELISA试剂盒大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠肠间质细胞小鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒 ,英文名: CD44 ELISA Kit
大鼠β羟(βOHB)ELISA检测试剂盒RatBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISAKit 96T/48T
人c-jun 免疫试剂盒 Human c-jun ELISA Kit
英文名称MouseIerferonαELISAKit小鼠干扰素α(IFNα)ELISAKit规格:96T/48T
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载玻片细胞线粒体复合物II蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MouseEndotheliallipase,ELELISAKit小鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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