小鼠输尿管上皮细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

小鼠输尿管上皮细胞

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的小鼠输尿管上皮细胞采用先中性蛋白酶消化、然后机械分离法使输尿管分层、最后胶原酶消化，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠输尿管上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

小鼠输尿管上皮细胞分离自输尿管组织；输尿管上接肾盂，下连膀胱，是一对细长的管道，呈扁圆柱状，位于腹膜后，为一肌肉粘膜所组成管状结构，沿腰大肌内侧的前方垂直下降进入骨盆。输尿管有三个狭窄部：一个在肾盂与输尿管移行处（输尿管起始处）；一个在越过小骨盆入口处；最后一个在进入膀胱壁的内部。这些狭窄是结石、血块及坏死组织容易停留的部位。输尿管——膀胱连接处有一种特殊结构，即瓦耳代尔鞘，它能有效地防止膀胱内尿液返流到输尿管。临床上将输尿管分为上、中、下三段，也可称为腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自肾盂输尿管交界处，到跨越髂动脉处；盆段，自髂动脉到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁内斜行至膀胱粘膜、输尿管开口。输尿管管壁分为4层，黏膜层、固有层、肌层、外膜。黏膜层表面为移行上皮，约有4-5层细胞；固有层由细密的结缔组织构成，内含胶原纤维和少量弹性纤维；输尿管肌层主要由内纵和外环两层平滑肌组成；外膜为疏松结缔组织，营养血管由外膜进入输尿管。其中，输尿管上皮细胞主要分布于黏膜层。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

Roscovitine (Seliciclib,CYC202)  186692-46-6  C19H26N6O

Radicicol  12772-57-5  C18H17ClO6

ML 9 hydrochloride  105637-50-1  C15H17ClN2O2S.HCl

Avosentan  290815-26-8  C23H21N5O5S

TMPH hydrochloride  849461-91-2  C16H31NO2.HCl

7-Chlorokynurenic acid sodium salt  1263094-00-3  C10H5ClNNaO3

SNS-032 (BMS-387032)  345627-80-7  C17H24N4O2S2

UBP 282  544697-47-4  C15H15N3O6

Glucocorticoid receptor agonist  1245526-82-2  C20H20F4N2O2

Cetrorelix  120287-85-6  C70H92ClN17O14

UDP disodium salt  27821-45-0  C9H12N2Na2O12P2

BAM 22P  76622-26-9  C130H184N38O31S2

IPI-504 (Retaspimycin hydrochloride)  857402-63-2  C31H46ClN3O8

PC-766B  108375-77-5  C43H68O12

HEPES  7365-45-9  C8H18N2O4S

小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒 ，英文名： TSLP ELISA Kit

兔子胰岛素(INS)ELISA检测试剂盒rabbitInsulin,INSELISAKit 96T/48T

犬2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)免疫试剂盒 Canine 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA Kit

英文名称HumanCoicoseroneELISAKit人皮质同(Coicoserone)规格：96T/48T

蛋白酶/0酸酶完全抑制混合液抑制蛋白破坏性生物酶活性

RatMelatonin,MT/MLTELISA试剂盒大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠输尿管上皮细胞小鼠D-二聚体(D2D)ELISA试剂盒 ，英文名： D2D ELISA Kit

人尿激酶(UK)ELISA检测试剂盒Humanurokinase,UKELISAKit 96T/48T

大鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫试剂盒 Rat orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit

CLIAKitforVEGFR-1/Flt1(MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1)ELISAKit小鼠血管内皮细胞生长因子受体1规格：48T/96T

免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒(含AP二抗)20次

ELISAKitMS人褪黑色素规格：48T/96T

小鼠胃泌素(Gas)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human phosphatidylinositol aibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgM) ELISA Kit 人0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA试剂盒

HumanElastaseELISAKit 人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin18,IL-18ELISA试剂盒鸡白介素18(IL-18)ELISA试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒规格：96T/48T