小鼠附睾上皮细胞

小鼠附睾上皮细胞

培养信息：

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠附睾上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞↶恰û

方法简介：

实验室分离的小鼠附睾上皮细胞采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的小鼠附睾上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

小鼠附睾上皮细胞分离自附睾组织；附睾（Epididymis）是一个由曲折、细小的管子构成的器官，一端接着输精管（Ductusdeferens），一端接着睾丸（Testis）的曲细精管，具体结构主要包括输出小管和附睾管。附睾紧贴睾丸的上端和后缘，可分为头、体、尾三部。精子离开睾丸后通过输出小管进入附睾。附睾具有暂存精液并分泌附睾液营养精子的功能，以促进精子的进一步成熟附睾的功能是暂存精子，促进精子的进一步成熟。精子在附睾内获得运动能力，总共停留8～17天，最终达到功能上的成熟。在这个过程中，精子除了自身的因素，还受到附睾微环境的影响，这包括了一系列的物理、化学变化和精子形态的改变。可以说，附睾微环境正常稳定是附睾发挥促成熟这一功能的必要条件。若附睾的功能发生异常，精子则不能成熟，引起不育。附睾上皮含有主细胞、基细胞、亮细胞等几种类型细胞。基细胞，其顶部离附睾管腔有一定距离，在附睾各部分，其形态没有差别，一般认为是贮备细胞；另一种主细胞，是维持附睾生理功能的物质基础，在各区段的主细胞形态结构差别很大，这也反映出各区段的生理功能的差异。除上皮细胞外，附睾的管壁组织结构也有规律性的变化，附睾管起始段平滑肌有自发地节律性收缩，而尾部平滑肌就没有这种特点，仅在射精一瞬间出现强烈的节律收缩。作为负责提供适合精子成熟微环境的附睾，具有活跃的分泌与吸收功能。其中，附睾上皮的电解质和水分的转运，对保持附睾内合适的离子浓度和酸碱度，为精子成熟提供适宜的环境起着相当重要的作用。睾丸的支持细胞每天能产生大量睾网液，如一只公羊每天约能分泌40毫升睾网液，而从附睾排出的只不过几百微升，也就是说睾丸分泌液有99%被附睾上皮重新吸收回体内。动物实验表明，结扎输精管时睾丸不会肿胀，但若结扎睾丸输出小管，睾丸第二天就会肿胀，这就充分证实了附睾存在着强有力的吸收功能，但是重新吸收的意义尚不清楚。体外培养附睾上皮细胞对精子的发育、成熟，不孕不育，附睾生理基础功能研究具有重要意义。

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
公司正在出售的产品：

PD 81723  132861-87-1  C14H12F3NOS

Glimepiride  93479-97-1  C24H34N4O5S

Amantadine HCl  665-66-7  C10H17N.HCl

OR-486  7659-29-2  C6H4N2O6

SB-222200  174635-69-9  C26H24N2O

AC 187  151804-77-2  C127H205N37O40

(S)-10-Hydroxycamptothecin  19685-09-7  C20H16N2O5

MS023  1831110-54-3  C17H25N3O

SR 95531 hydrobromide  104104-50-9  C15H17N3O3.HBr

Aclacinomycin A  57576-44-0  C42H53NO15

SR 12813  126411-39-0  C24H42O7P2

LY2409881  946518-60-1  C24H32Cl4N6OS

BL 1249  18200-13-0  C17H17N5

Oleandomycin  3922-90-5  C35H61NO12

Arginase inhibitor 1  1345808-25-4  C13H27BN2O4

小鼠血清淀粉样P物质(SAP)ELISA试剂盒 ，英文名： SAP ELISA Kit

兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒rabbitImmunoglobulinA,IgAELISAKit 96T/48T

犬癌胚抗原(CEA)免疫试剂盒 Canine carcinoembryonic aign,CEA ELISA Kit

英文名称HumanEotaxinELISAKit人噬酸性细胞趋化因子(Eotaxin)规格：96T/48T

大鼠肾上腺总RNA20微克

RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA试剂盒大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠附睾上皮细胞小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒 ，英文名： NAG ELISA Kit

大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA检测试剂盒Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 96T/48T

人ES1蛋白同系物，线粒体(C21orf33/HES1/KNPI)免疫试剂盒 Human C21orf33 ELISA kit

英文名称MouseMyoglobinELISAKit小鼠肌红蛋白(MYO)规格：96T/48T

冰冻切片核酸氧化8-羟基鸟苷(8-OHG)荧光染色测定试剂盒10次

Ratamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA试剂盒大鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human Campylobacter jejuni (PEB1) ELISA Kit 人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒

HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor(NF-KapB)ELISAKit大鼠核因子κB规格：48T/96T

饮料乙醇比色法定量检测试剂盒20次

MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。