原代培养原理和应用:
一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。
二、原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。
三、原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
小鼠前列腺上皮细胞
产品名称 | 小鼠前列腺上皮细胞 | 组织来源 | 前列腺 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
传代特性 | 可传1-2代 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的小鼠前列腺上皮细胞采用先中性蛋白酶消化、后胶原酶-胰蛋白酶联合消化并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠前列腺上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
细胞简介:
小鼠前列腺上皮细胞分离自前列腺组织;前列腺(Prostate)是雄性特有的性腺器官;前列腺是不成对的实质性器宫,由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过,扼守着尿道上口,所以,前列腺有问题时,排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的,具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是构成精液主要成分;作为内分泌腺,前列腺分泌的激素称为“前列腺素”。前列腺上皮细胞与前列腺的功能关系密切,上皮细胞的损伤是前列腺炎的主要病症,重度的前列腺炎患者的前列腺液内可检测到脱落的上皮细胞,这是上皮细胞损伤的标志。炎症发生时,与炎症相关的一些炎症因子可能发生变化。因此,体外培养前列腺上皮细胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基础。前列腺主要特征如下:①前列腺结构和功能活动均受雄性激素的调控;②基底细胞主要表达高分子量细胞角蛋白(CK-5、CK-14),基底上皮细胞可分化成管腔上皮细胞;③前列腺上皮细胞的培养为研究前列腺的许多重要特性以及化学和激素性致癌作用提供了机会。
贴壁细胞传代操作步骤:
用移液管或者巴氏吸管吸取培养液;
使用不含钙镁离子的平衡盐溶液(PBS)冲洗细胞1-2次;
弃PBS,加入胰蛋白酶-EDTA消化液(消化液浓度根据各细胞不同有调整),轻轻摇晃培养瓶,使胰酶与细胞表面充分接触,37 ℃孵育2-3 min,加入含血清完全培养基终止消化。
将细胞悬液移入离心管中,800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清,加入预热的完全培养基重悬细胞,轻轻吸打混匀,吹打过程中尽量不要出现气泡。
细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。
悬浮细胞传代操作步骤:
悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。
(1)直接传代法
① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代;
② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3;
③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。
(2)离心传代法
① 将细胞悬液转移到离心管内;
② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清;
③ 使用新鲜的培养基重悬细胞;
④ 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。
公司正在出售的产品:
ZM 241385 139180-30-6 C16H15N7O2
GSK1059615 958852-01-2 C18H11N3O2S
Amonafide 69408-81-7 C16H17N3O2
Ziprasidone 146939-27-7 C21H21ClN4OS
Bromoenol lactone 88070-98-8 C16H13BrO2
Proglumide sodium salt 99247-33-3 C18H25N2NaO4
U 93631 152273-12-6 C17H21N3O2
Mequinol 150-76-5 C7H8O2
PD168393 194423-15-9 C17H13BrN4O
Meptazinol HCl 59263-76-2 C15H24ClNO
VO-Ohpic trihydrate 476310-60-8 C12H15N2O11V+
Necrostatin-1 4311-88-0 C13H13N3OS
Cetirizine DiHCl 83881-52-1 C21H27Cl3N2O3
AZD 3965 1448671-31-5 C21H24F3N5O5S
Sulfathiazole 72-14-0 C9H9N3O2S2
小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 ,英文名: aGT ELISA Kit
小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA检测试剂盒MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 96T/48T
人活化素受体样激酶1(ALK1)免疫试剂盒 Human Activin Receptor-Like Kinase 1,ALK1 ELISA Kit
RatCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit大鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
10倍线虫M9缓冲液100毫升
MouseComplemefragme5a,C5aELISA试剂盒小鼠补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠前列腺上皮细胞小鼠FMS样酪酸激酶3配体(Flt3L)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat P-selectin (omein) ELISA Kit 大鼠网膜素(omein)ELISA试剂盒
Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 人促甲状腺素释放激素(H)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCollagen-likeBioproteinⅡ,HCBⅡELISA试剂盒人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织Akt/PKB激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅡELISAKit人免疫球蛋白GFc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human leucine aminopepridase (LAP) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA试剂盒
Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit 人脂0壁酸(LTA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenfactorB,BFELISA试剂盒鸡B因子(BF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞CASPASE-4蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISAKit小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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