原代培养原理和应用:
一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。
二、原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。
三、原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
小鼠颌下腺上皮细胞
产品名称 | 小鼠颌下腺上皮细胞 | 组织来源 | 颌下腺组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
传代特性 | 可传1-2代 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的小鼠颌下腺上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠颌下腺上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
细胞简介:
小鼠颌下腺上皮细胞分离自颌下腺组织;颌下腺是下颌部的唾液腺,左右各一个。颌下腺属于唾液腺的一种,主要的功能就是分泌唾液。机体共有三大唾液腺,包括腮腺、颌下腺及舌下腺。颌下腺位于下颌骨的下方,接近下颌骨弯曲角附近,所以也叫下颌下腺(下颌骨下方的唾液腺),左右各一,由舌下舌系带两侧处伸出颌下腺排泄管,主要分泌黏液和浆液状性质的唾液。颌下腺上皮细胞是一种高度分化的上皮细胞,在体外难以长期存活和保持分化状态;颌下腺的主要病理变化有:①颌下腺炎;②颌下腺囊肿;③颌下腺肿;④颌下腺结石。
贴壁细胞传代操作步骤:
用移液管或者巴氏吸管吸取培养液;
使用不含钙镁离子的平衡盐溶液(PBS)冲洗细胞1-2次;
弃PBS,加入胰蛋白酶-EDTA消化液(消化液浓度根据各细胞不同有调整),轻轻摇晃培养瓶,使胰酶与细胞表面充分接触,37 ℃孵育2-3 min,加入含血清完全培养基终止消化。
将细胞悬液移入离心管中,800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清,加入预热的完全培养基重悬细胞,轻轻吸打混匀,吹打过程中尽量不要出现气泡。
细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。
悬浮细胞传代操作步骤:
悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。
(1)直接传代法
① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代;
② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3;
③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。
(2)离心传代法
① 将细胞悬液转移到离心管内;
② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清;
③ 使用新鲜的培养基重悬细胞;
④ 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。
公司正在出售的产品:
Ifenprodil hemitartrate 23210-58-4 C21H27NO2.½C4H6O6
ISX 9 832115-62-5 C11H10N2O2S
AMD 3465 185991-24-6 C24H38N6
Laquinimod (ABR-215062) 248281-84-7 C19H17ClN2O3
Proxyphylline 603-00-9 C10H14N4O3
EMD-1214063 1100598-32-0 C29H28N6O2
Irbesartan 138402-11-6 C25H28N6O
4EGI-1 315706-13-9 C18H12Cl2N4O4S
Sulfamethoxypyridazine 80-35-3 C11H12N4O3S
Nutlin-3a chiral 675576-98-4 C30H30Cl2N4O4
Rizatriptan Benzoate 145202-66-0 C15H19N5.C7H6O2
Phenformin HCl 834-28-6 C10H16ClN5
6-Aminonicotinamide 329-89-5 C6H7N3O
SB 216763 280744-09-4 C19H12Cl2N2O2
VU 0255035 1135243-19-4 C18H20N6O3S2
小鼠血管生成素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA试剂盒 ,英文名: ANGⅡ ELISA Kit
小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA检测试剂盒Mousebonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit 96T/48T
人肌养蛋白(dysophin)免疫试剂盒 Human dysophin ELISA Kit
Ratc-JunN-terminalkinases,JNKELISAKit大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
10倍is浓缩缓冲溶液100毫升
MouseClusterofdiffereiation3,CD3ELISA试剂盒小鼠CD3分子(CD3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠颌下腺上皮细胞小鼠L-型电压依赖钙离子通道α1S亚基(CACNα1S)ELISA试剂盒 ,英文名: CACNα1S ELISA Kit
人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA检测试剂盒Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 96T/48T
大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫试剂盒 Rat Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA Kit
CLIAKitforYKL-40/CGP-39human软骨糖蛋白39(人)规格:48T/96T
硫氧还蛋白还原酶(thioredoxieductase)活性比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitFcγRⅢ/CD16人免疫球蛋白GFc段受体Ⅲ规格:48T/96T
小鼠血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human leukocyte aigen C (HLA-C) ELISA Kit 人类白细胞抗原C(HLA-C)ELISA试剂盒
HumanL-phenylalanine,LPAELISAKit 人苯氨酸(LPA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
rabbitImmunoglobulinM,IgMELISA试剂盒兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
油菜样品处理试剂盒20次
Mouseierferon-inducibleprotein10,IP-10ELISAKit小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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