木质素含量检测试剂盒 紫外分光光度法

木质素含量检测试剂盒说明书

紫外分光光度法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

规格：50T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液配制：

1. 试剂三：自备，石油醚，约需要 30mL。

2. 试剂四：该试剂具有强挥发性和一定的毒性，注意在通风橱操作并且每次用完用封口膜密封保存。

3. 试剂五：试剂有腐蚀性，注意防护。

产品说明：

木质素是构成植物细胞壁的成分之一，具有使细胞相连的作用。木质素存在于木质组织中，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁，为次生壁主要成分。

木质素中的酚羟基发生乙酰化后在280nm处有特征吸收峰，280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵、EP管、封口膜、冰乙酸、石油醚、30-50目筛和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

样本 80℃烘干至恒重，研磨，过 30-50 目筛，称取约 5mg 于 1.5mL EP 管中。

二、测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至280nm，冰乙酸调零。

2、 操作表（在1.5mL离心管中依次加入下列试剂）：

乙酰化：

三、木质素含量计算

木质素含量（mg/g）=ΔA÷ε÷d×V检测÷（V上清×W÷V乙酰化）=2.184×ΔA÷W

木质素的百分含量（%）=木质素含量÷1000×100 %=0.2184×ΔA÷W

V乙酰化：乙酰化反应体积，1.02mL；ε：木质素消光系数，23.35mL/mg/cm；d：比色皿光径，1cm；V上清：

上清液体积，0.02mL；V检测：检测体积，1mL；W：样本质量，g；1000：换算系数，1g=1000mg。

注意事项：

1. 试剂四有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出。

2. 加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人身伤害。

3. 冰乙酸具有强刺激性，建议操作过程全部在通风橱内操作。

4. 取上清加冰乙酸步骤根据自己样本乙酰化程度，冰乙酸的用量可调整，保证吸光值在0.1-0.8之间即可，并在公式中参与计算。

5. 由于冰乙酸具有挥发性，建议用比色皿进行测定实验。实验混匀后必须立即测定！

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！