摘要:本实验采用高效液相色谱法(HPLC)结合紫外检测器,选择 Venusil® XBP C18(T) 色谱柱(5 μm,
300Å,4.6×150 mm)对维生素 K3 进行了测试。结果表明:在波长为 270 nm,流动相为甲醇,流速
为 1.0mL/min,柱温为 50 ℃
时,测得维生素 K3 峰理论塔板数为 3628(>2000),符合实验要求。
关键词:高效液相色谱法;紫外检测器;甲萘醌;维生素 K3;Venusil® XBP C18(T);色谱柱;
前言
维生素 K3,别名甲萘醌,嫩黄色结晶,有极微辛辣的气味。在空气中稳定,在日
光中分解,溶于氯仿和四氯化碳,不溶于水。可用于饲料添加剂原料,能促进畜禽肝脏
合成凝血酶原,并促进血浆凝血因子在肝脏内合成,为止血剂。
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂与材料
实验用甲醇、异丙醇为色谱纯试剂;
维生素 K3 对照品溶液:由某医药公司提供;
高效液相色谱柱:Venusil® XBP C18(T);5 μm,300 Å,4.6×150 mm。
样品制备
称取本品 50mg,置 1000mL 棕色量瓶中,加异丙醇适量,振摇,异丙醇稀释至刻
度,摇匀,经 0.45μm 滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液。
色谱条件
色谱柱:Venusil® XBP C18(T),5 μm,300 Å,4.6×150 mm;
流动相:甲醇;
流 速:1.0 mL/min;
波 长:270nm;
柱 温:50 ℃;
进样量:30 µL。
结果与讨论
本实验采用 Venusil® XBP C18(T)色谱柱对维生素 K3 对照品溶液进行了测试,由表
2 及下图可知,以甲醇为流动相时,对照品溶液中维生素 K3 峰型较好。
结论
本实验采用 Venusil® XBP C18(T)色谱柱(5 μm,300 Å,4.6×150 mm)对维生素 K3
对照品溶液进行测试,测得维生素 K3 峰理论塔板数为 3628(>2000),满足分析要求。
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