关注
已关注
已认证
粉丝量 0
采购咨询：400-629-8889
售后咨询：400-820-3278
利用甲酸作为离子对试剂进行 LC/MS 肽谱分析——使用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱
2018/10/10 16:45
阅读：561
分享：
方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统
型号： 1290 Infinity II
产地： 德国
品牌： 安捷伦
面议
参考报价
联系电话
Agilent 6545 Q-TOF 液质联用系统
型号： 6545
产地： 新加坡
品牌： 安捷伦
面议
参考报价
联系电话
Agilent 1290 Infinity II Multisampler
型号： 1290 Infinity II Multisampler
产地： 德国
品牌： 安捷伦
面议
参考报价
联系电话
方案详情：
前言
肽谱分析是表征生物治疗蛋白质不可或缺的工具，该方法广泛运用于生物药物蛋白质的生产过程，以确保产品在各生产阶段的完整性和稳定性。利用 LC/MS 进行肽谱分析是表征肽段修饰的首选技术。稳定且重现性高的 LC/MS 方法，是成功实现肽谱分析分离的关键。因此，需要对 LC/MS 分离参数进行全面的研究。
分析复杂蛋白质酶解物的过程中，如何实现肽段的高效、高分离度分离是一项巨大的挑战。甲酸是一种兼容质谱的离子对试剂，常用于 LC/MS 方法中，可实现灵敏检测。然而，甲酸也会导致峰形展宽，从而使肽段发生共洗脱。除此之外，流动相含甲酸的现有 LC/MS 方法具有峰容量小、峰展宽以及对相似肽段分离度差的限制。选择正确的反相色谱柱和 LC/MS 方法，对肽谱分离的成功十分重要。
Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱专为高效的肽段分离而设计。HPH Poroshell 填料包覆了一层带正电荷的改性表面基团。采用 C18 配基的表面多孔颗粒填料表面带电，可改善峰形并提高峰容量。最佳孔径 (120 A) 和粒径 (2.7 μm) 能够以低色谱柱反压提供类似 UHPLC 的性能。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱还可以与含甲酸的流动相兼容，在与质谱联用时可提供出色的峰形。
本应用简报展示了 AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱在用含甲酸的流动相对单克隆抗体 (mAb) 进行肽谱分离时显示出的卓越性能。本文通过研究流速、梯度时间和温度等不同的填料影响因素，开发出了实现最佳肽段分离的 LC/MS 方法。并对峰容量、峰宽、峰面积、峰高、重现性和序列覆盖率等肽谱分析的关键要素进行了评价。
结论
• Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱使用兼容质谱的甲酸改性流动相条件，可获得高峰容量和尖锐窄峰
• 质谱兼容的 AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱可实现高序列覆盖率的出色肽谱分离
• AdvanceBio Peptide Plus 表面多孔色谱柱在低背压下运行，从而使 HPLC 和 UHPLC 系统都可进行肽谱分离
• 采用 AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱的 LC/MS 肽谱分析方法具有出色的重现性，这一性质对于肽谱分析至关重要
下载本篇解决方案：
更多
应用 QuEChERS 方法结合 Agilent 7000 系列三重四极杆气质联用仪测定甜菜中 的多农药残留
本文介绍了一种用于分析甜菜中 267 种农药的简便、高通量方法。该方法将 QuEChERS 样品前处理方法与 Agilent 7000 系列三重四极杆气质联用系统相结合，并通过基质匹配标样校准进行定量，以降低基质干扰引起的定量偏差。结果表明，该方法在 2–200 μg/kg 的基质加标浓度范围内具有良好的线性关系。绝大部分目标农药化合物的定量限 (LOQ) 低至2 μg/kg，灵敏度高。加标回收率测试表明，在 2、5、10、100 和 200 μg/kg 的加标浓度下，大部分农药化合物的回收率在 80%–120% 的范围内 (n = 5) ，且相对标准偏差 (RSD)低于 10%。该方法适用于对甜菜中的多种农药残留进行常规分析。
食品/农产品
2024/05/13
使用 Agilent BioTek Synergy Neo2 Hybrid 多功能微孔板检测仪测定脂质纳米颗粒表观 pKa
脂质纳米颗粒 (LNPs) 已被用作各种有效载荷的递送系统。本应用简报展示了 Agilent BioTek Synergy Neo2 Hybrid 多功能微孔板检测仪用于测定 mRNA LNPs 表观 pKa 的实用性。
制药/生物制药
2024/05/13
使用 ICP-OES 结合自动稀释测定锂盐中的多种元素
使用 Agilent 5800 VDV ICP-OES 和 Agilent ADS 2 自动稀释器自动分析锂离子电池前驱体化学品
能源/新能源
2024/05/13
使用配备高级稀释系统的 ICP-MS 对 高基质样品进行高效分析
在用 Agilent 7850 ICP-MS 分析前，使用 Agilent ADS 2 对沉积物和土壤进行自动稀释
环保
2024/05/13
