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采用 Agilent Bravo 自动化液体处理平台的半自动化脂质萃取方案
2018/06/24 20:50
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent Bravo 自动液体处理平台
型号： Bravo
产地： 美国
品牌： 安捷伦
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安捷伦 1290 Infinity 二元液相色谱系统（1290 LC）
型号： 1290 Infinity 二元
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
此前，研究人员已开发出协助进行脂质组学样品前处理的自动化方案。这些流程旨在最大程度减少大量样品处理造成的人为误差，以及缩短样品前处理耗费的时间。本应用简报介绍了使用 Agilent Bravo 自动化液体处理平台对人血浆中磷脂和鞘脂进行半自动化萃取。操作流程包括将起始物料（通常将血浆置于 1.5 mL 的试管中运送）转移至 96 孔板中，可用于保存或脂质萃取。如果用于脂质萃取，向样品中加入丁醇/甲醇 (BuMe) 混合物。在脂质萃取流程中，尽管仍需要将样品手动转移至超声处理仪和离心机中，但本文报道的方案可对大量样品进行统一处理，从而缩短样品前处理时间并得到较高重现性（根据安捷伦 UHPLC/MS/MS 系统分析萃取脂质所得的结果）。
前言
脂质组学是代谢组学的一个分支，致力于鉴定生物体中存在的所有脂质，并了解其合成、调节和作用。
随着液质联用系统的不断发展，基于质谱的脂质组学分析受到了越来越多的关注。研究人员现已经开发出多种方法，可对具有重要生物学意义的脂质进行常规分析和定量检测1。然而，用于从生物样品中萃取脂质的样品前处理技术通常繁琐耗时，而且采用的仍然是 20 世纪 50 年代建立的技术2。
脂质组学实验室通常需要对大量样品进行前处理（如用于大型流行病学研究），这种情况下采用标准的手动前处理就不太现实。本应用简报介绍了使用 Agilent Bravo 自动化液体处理平台建立用于人血浆中脂质萃取的半自动高通量方法。实验结果表明，此流程达到的精度相当于甚至优于传统手动方法的精密度，同时缩短了实验时间，降低了实验成本。另外，脂质萃取方案中需要使用强挥发性和高毒性的有机溶剂，而使用自动工作站可提高实验室的安全性。
结论
结果表明，Agilent Bravo 自动化液体处理平台可以实施任意单相型脂质萃取方法，产生的样品适用于脂质组学中的 LC/MS/MS 分析。使用 AgilentBravo 的自动化处理可提高方法通量，并表现出始终如一的分析精度。96 个样品使用手动方法需要的前处理时间为 8 小时左右，而自动化方法仅需要 2 小时。据估计，分析实验室中 60%-80% 的工作和运行成本都在分析设备进样前的样品前处理中产生，因此本实验方案可大大减少脂质分析的成本/样品量。
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