安捷伦 1290 Infinity 二元液相色谱系统（1290 LC）

本应用显示了使用Agilent 1290 Infinity 2D-LC解决方案实现表面活性剂中一系列同源非离子的分离，第一维使用的是HILIC柱，第二维使用的是反相色谱柱。 表面活性剂通常在紫外线下不显示活性检测，因此使用了Agilent 1260 Infinity ELSD。 通过ELSD检测到的化合物可以通过专用的2D-LC软件得到可视化演示。

本文参考针对 13 种醛酮化合物的现有分析方法和 HJ683-2014 标准方法，优化了流动相梯度条件，并考察了不同规格的色谱柱对分离的影响。以 Poroshell 120 SB-C18 色谱柱为例，采用水 (12% THF) 和乙腈作为梯度洗脱液，可以使醛酮化合物-DNPH 获得出色的分离 (R > 2.0)，并使标准品中自带的杂质得到较好的分离。该方法具有较高的检测灵敏度和良好的精密度。在实际样品检测中，借助保留时间的微小差异，可有效避免产生假阳性结果。

用于水中爆炸物痕量检测的 EPA 8330B 方法中的检测方式经历了紫外检测到高效液相色谱检测到液-质联用仪检测的转移，本文使用配置了安捷伦 6460 三重四极杆液-质联用仪 的安捷伦 1290 Infinity 液相色谱，在大气压化学电离源、负离子化模式条件下分析水中 的爆炸物。用本方法分析了水中十一种痕量的爆炸物，检测限在 5-50 ng/L 范围内。使用固相萃取（SPE）C18 萃取柱和聚合物萃取柱用于评价测试。聚合物固相萃取柱具有超高的回收率，范围在 80%-101%（离线固相萃取）。超高压液相色谱/6460 三重四极 杆液质联用系统是检测水中爆炸物的有效方法 。

通过优化在其它三重四极杆平台上开发的方法参数可以充分实现 Agilent 6490 三重四极杆液质联用系统更胜一筹的灵敏度。优化复杂基质样品废水中类固醇的分析方法可以获得低于 1 ng/L（万亿分之一）的灵敏度

对于校准用加标自来水中的大多数目标化合物，该系统能够实现高达 95% 的表观回收率，并且该方法在分析不同类型水样时可获得高度重现的结果。大多数目标化合物的峰面积精度高并具有优异的线性相关性。自动富集处理使常规的三重四极杆质谱仪能够获得更低的检测限并快速完成水样分析，而无需进行耗时的样品前处理或使用 SPE 萃取柱进行离线富集。

该方法充分利用 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统的低延迟体积及其能够在 UHPLC 分离中承受高反压的优势，从而提高了色谱分离度。 Agilent MassHunter 水质筛查 PCDL 是 Agilent MassHunter 定性和定量分析软件中靶向和疑似污染物筛查工作流程的完美补充。

使用Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱和Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统分析了偶氮染料中的禁用的22 种芳香胺和四种偶氮化合物。这种新方法在14 分钟内能完成26种苯胺类化合物的分离，并且具有良好的耐用性和重现性。

使用Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱和Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统分析了偶氮染料中的禁用的22 种芳香胺和四种偶氮化合物。这种新方法在14 分钟内能完成26种苯胺类化合物的分离，并且具有良好的耐用性和重现性。

使用Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱和Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统分析了偶氮染料中的禁用的22 种芳香胺和四种偶氮化合物。这种新方法在14 分钟内能完成26种苯胺类化合物的分离，并且具有良好的耐用性和重现性。

使用Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱和Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统分析了偶氮染料中的禁用的22 种芳香胺和四种偶氮化合物。这种新方法在14 分钟内能完成26种苯胺类化合物的分离，并且具有良好的耐用性和重现性。

使用Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱和Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统分析了偶氮染料中的禁用的22 种芳香胺和四种偶氮化合物。这种新方法在14 分钟内能完成26种苯胺类化合物的分离，并且具有良好的耐用性和重现性。

使用Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱和Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统分析了偶氮染料中的禁用的22 种芳香胺和四种偶氮化合物。这种新方法在14 分钟内能完成26种苯胺类化合物的分离，并且具有良好的耐用性和重现性。

本应用简报介绍了使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案对生物治 疗样品中聚集体的定量分析。Protein A 亲和捕获在第一维中进行，而体积排 阻色谱在第二维中进行。多中心切割用于将样品从第一维转移到第二维。这 项技术能够在一次分析中完成整个表征，无需进行馏分收集和多次进样。

生物药物的表征可能非常复杂且广泛，以评估所有重要的质量属性。 在线2D-LC分析提供了多种不同的分析方法的组合，可在一次运行中监控不同的参数。 本应用指南显示了聚集分析与一维尺寸排阻色谱的结合，然后是离子交换色谱第二维电荷变化分析的组合。 中心切割2D-LC可将峰从第一维在线转移到第二维，从而允许在13分钟内进行高精度的聚集分析和电荷变化谱分析，并提供两种最重要的质量属性的组合在线分析。 此外，高分辨率采样2D-LC可检测共洗脱化合物并提供准确的通过将整个1D峰面积转移到第二维进行2D-LC定量。

由亚磷酰胺化学法合成的寡核苷酸通常使用离子对反相液相色谱 (IP-RPLC) 和阴离子交换色谱进行分析和纯化。在 IP-RPLC 分析中，阴离子交换纯化馏分的高含盐量会削弱寡核苷酸参与离子配对的能力。这就需要在 IP-RPLC 分析之前对样品进行脱盐，这一步骤通常使用离心过滤器手动完成。本应用简报展示了高盐浓度溶液中寡核苷酸的直接二维液相色谱分析：在第一维(1D) 中进行在线脱盐，随后在第二维 (2D) 中进行 IP-RPLC 分析。在该设置中，二维液相色谱的使用提高了工作流程速度，同时避免了手动的样品前处理过程。

在药物和精细化学品的开发和生产过程中，杂质分析非常重要。本应用表明多中心切割二维液相色谱非常适用于药物和精细化学品杂质分析的方法开发。使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案，经第一维分离后所检测到的每一个峰都被中心切割并转移到具有不同选择性的第二维进行进一步分离。此方法能发现可能存在的共洗脱化合物。此外，通过向样品添加疑似杂质还可确证对杂质的鉴别。

中草药（CHM）的认证是一项艰巨的任务，这一事实可归因于植物和CHM中使用的制剂的高度复杂性以及各个植物的自然变异性。 通常，色谱指纹图谱被认为是最有效的方法之一。 作为分析中国传统处方的一个例子，本应用指南显示了四物汤以及四物汤中所含各个草药的全面二维液相色谱分析。 对于每种草药，选择特征成分峰，然后创建模板。 模板与在四物汤中检测到的峰相匹配，以研究检测传统中药中各个草药的特征成分的可能性。 另外，检测了从四物汤遗漏和替换一种草药后模板匹配的变化。

Agilent 6495B 三重四极杆液质联用系统的质量数范围达 3000 u，分析高 m/z 子离子的 MRM 离子对时优异的重现性。在复杂的消解物样品中，使用高 m/z 母离子或子离子的优势之一是这些离子的背景噪音更低。此外，分析结果具有优异的精密度和准确性。

Agilent 1290 Infinity LC 系统可实现优异的色谱分离，Agilent 6550 Q-TOF 提供了高分辨率精确质量 MS/MS 数据。 此外，Mass MetaSite 软件非常有助于系统、可靠地鉴定代谢物结构。

Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统在高效液相色谱和超高液相色谱中的应用中具有重要地位。与市场上其它系统相比，它的能力范围更广（如压力和流速不同组合的能力），并且可以使用具有不同规格和填料粒径的色谱柱。二极管阵列检测器先进的光学设计，使其具有宽的动态范围和高灵敏度，这在检测精细化学品中的微量杂质时非常重要。这些优点可通过分析包括磺胺类药物、硝基呋喃类药物和孔雀石绿等鱼类用药的主成分 及其相关杂质进行说明。很多药物都可用于治疗装饰或宠物鱼疾病，但其中许多药物都是禁用或受限制的。即使在食用鱼中有残留，其含量也应很低或者不能被高效液相色谱的紫外检测器检测到。本文展示了其中一些药物并详述了一种与 MS 兼容的快速分析分离方法。许多鱼类用药广告中宣传的“药品质量”成份，可能只是意味药品生产及其质量控制的步骤。当对这些产品进行分析时，我们期望产品中的相关杂质含量很低，符合药品质量生产的目标。该系统具有高耐压性，可以使用甲醇、乙腈作为流动相，以比较两种溶剂的选择性。本文采用 3.0 mm × 50 mm Poroshell 120 色谱柱，在 1 mL/min 流速下运行 3 min 的简单梯度，包括最后洗脱出人为添加的邻苯二甲酸酯的时间，共用不到 5 min 的时间即可完 成所有的分离检测。

薄层层析 (TLC) 是化学合成与天然产物提取常用的分离方法，对层析展开的斑点进行定性分析有助于监测合成实验的进展、指导天然产物的提取。传统的薄层层析斑点鉴定往往比较繁琐，需要将斑点挖出，并经过溶解、过滤和浓缩等前处理步骤后，再进样至液质联用系统中进行检测。 本文所述方法采用薄层斑点在线快速萃取并直接进入离子源的方式定性分析斑点，大幅缩短了传统鉴定流程所需的时间，每个斑点在 1.5 分钟内即可完成分析。另外，该方法直接对薄层板上的斑点原位采样，在每个样品分析完成后，经过简单的流路反吹即可进行下一个样品的分析，使复杂的薄层斑点鉴定工作成为高通量流水线式分析过程。

本研究采用 Agilent ValueLab QuEChERS 提取包 (EN 15662) 和净化包（EN 15662 一般 水果蔬菜）结合液相色谱-串联质谱法 (LC/MS/MS) 分析葡萄中的 47 种代表性农药残留。 结果显示，在两种加标浓度下 99% 的农药回收率数据处于 80%–120% 之间，且所有 RSD 均低于 20%。与相应的 Agilent Bond Elut QuEChERS 产品相比，ValueLab QuEChERS 采 用相同的操作步骤并获得了类似的结果。此外，与三款竞品相比，ValueLab QuEChERS 表现出明显更出色的性能。

有关食品中维生素 A、D、E 分析的新国家标准方法[1] 从 2017 年 6 月 23 日起实施，覆盖 了婴幼儿食品、乳品、肉与肉制品、食用植物油、坚果、豆类和辣椒粉等多种食品基质。 但是该标准方法中规定的样品前处理过程极其复杂、测定方法多样（同一成分有不同的检 测方法）、检测周期长、目标化合物回收率低且重复性差，极大降低了分析效率。为解决 该国标方法所存在的难点和不足，需要开发一种同时测定维生素 A、D、E 的稳定高效的 二维液相色谱方法。 本方法参照现有的文献方法[2-4]，基于二维液相色谱并串联在线固相萃取 (online SPE) 技 术，成功建立了食品中维生素 A (VA)、维生素 D (VD) 及三种维生素 E (VE) 异构体的中心切 割快速分析方法。此方法将前处理皂化液直接进样，省去了液液萃取等复杂的前处理过 程。第一维液相色谱对 VA 和 VE 进行分析，同时对 VD 进行初步净化；第二维液相色谱对 VD 进一步分离，整个分析过程只需一次进样，即可完成样品中 VA、VD 和 VE 的测定。该 方法不仅可以节省大量的样品前处理时间，同时可以避免复杂的样品前处理过程导致的回 收率不稳定现象。实验结果准确、重现性好，表明该方法可以用于多种食品基质中脂溶性 维生素的常规快速检测。 实验结果表明，新的维生素检测方法具有以下优势： – 样品分析通量大幅提高。皂化液直接进样方法与国标方法相比，样品前处理时间由原来的 2–3 小时缩短为 30 分钟左右，分析通量 提高 5 倍以上 – 省去了前处理提取步骤，溶剂使用量大大减少，降低了实验成本，也避免有机试剂对实验人员造成危害。阀切换方法代替繁琐 的净化、浓缩等过程，自动化程度大幅提高 – 按照国标方法的检测低限浓度，考察方法的灵敏度，分析图谱表 明所有物质在最低限均有良好响应

啤酒是一种成分非常复杂的酒精饮料，以水、大麦芽或小麦芽为主要原料，并添加啤酒花酿造而成。啤酒花中的 a-酸在麦汁煮沸的过程中形成异-a-酸，异-a-酸是啤酒典型苦味的主要来源。本应用简报展示了使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案对不同类型的啤酒进行全二维液相色谱分析。分别在第一维碱性与第二维酸性 pH 值条件下使用 C18 色谱柱获得了良好的正交性。通过与标准物质进行对比分析及质谱检测，鉴定出啤酒中的苦味化合物。非靶向多样品分析（指纹图谱分析）能够对所分析不同啤酒类型进行分类。

Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统在高效液相色谱和超高液相色谱中的应用中具有重要地位。与市场上其它系统相比，它的能力范围更广（如压力和流速不同组合的能力），并且可以使用具有不同规格和填料粒径的色谱柱。二极管阵列检测器先进的光学设计可提供宽动态范围和高灵敏度，这在监测天然和合成的食品调味料时非常重要。这些优点可通过分析干辣椒、酱汁和香料中的主要辣椒碱类成分得进行说明。辣椒科中 红辣椒的主成分辣椒素被认为是红辣椒的“辛辣”成分。辣椒碱类成分包括 8 种或更多种化合物，它们可使人感到调味料中的辛辣味道。辣椒素或合成辣椒素（诺香草胺）也已用于外用膏剂，用来缓解关节炎、瘙痒、神经性及其它疾病。核心结构是酚，其主要差异在疏水烷基链上。该系统具有高耐压性，可使用甲醇、乙腈作为流动相，以比较两种溶剂的选择性。本 文评价包括全多孔的 1.8 µm 填料和表面多孔的 2.7 µm 填料在内的不同色谱柱。

本应用简报介绍了真菌毒素及相关代谢物精确质量谱库的创建及其在食品中真菌毒素筛查领域的应用。与 Agilent 1290 Infinity 液相色谱联用的 Agilent 6550 iFunnel Q-TOF LC/MS 在正离子和负离子电喷雾模式下运行，系统采用双电喷雾安捷伦喷射流技术。在一种或两种离子化模式下采集大量真菌毒素及相关代谢物的精确质量数谱图，并采集所有相关离子形态的精确质量数谱图。对有 44 种指示物加标的三种不同基质进行萃取。在靶向 MS/MS 和全离子 MS/MS 采集模式下对样品进行分析。本研究证明了两种采集模式与高效数据分析工作流程和真菌毒素及相关代谢物个人化合物数据库与谱库 (PCDL) 联用，对复杂基质中真菌毒素筛查和验证的价值。

本应用简报介绍了用于测定杏仁、榛子、花生和开心果中的 191 种真菌毒素及其他真菌代谢物和验证测定结果的多目标方法的开发。除受欧盟监管的所有真菌毒素以外，该方法还涉及到常在食品中发现的许多真菌毒素。该方法包括酸化的乙腈-水混合液的简单萃 取、原萃取液的稀释以及 UHPLC/MS/MS 的测定。采用溶剂标准品对所有化合物进行校准。 此外，本应用简报还介绍了对四种测试基质中 65 种最重要的真菌毒素进行的部分验证工作。该方法表现出优异的灵敏度，能够检出花生中低至 0.04 µg/kg 的恩镰孢菌素 B3，并 具有良好的重现性，大多数分析物的标准偏差均小于 10%。大约 60% 的基质-分析物组 合获得了 70% - 120% 的表观回收率。回收率较低的原因包括萃取回收率较低（例如伏马 菌素类）或几种较早流出的分析物所存在的信号抑制。少数情况下存在信号增强效应， 因此导致表观回收率较高。 该方法适用于受天然污染的坚果样品分析，总共能够鉴定出 40 种不同的真菌代谢物。有趣的是，最常检出的毒素并非当前受欧盟监管的化合物，而是白僵菌素、恩镰孢菌素 B 和巨孢子素。污染最严重的榛子样品中包含 26 种不同的毒素。全部结果在 Varga 等人的文章中有更详细的介绍。

使用Agilent 1290 Infinity 2D-LC解决方案研究脂质成分血浆和诱导痰样本。 进行多次心脏切割首先实现了基于HILIC的全自动脂质（亚）类类型的分馏馏分的尺寸和在线转移到高分辨率反相中第二维的UHPLC色谱柱用于分离组成员疏水性。 脂质的检测和鉴定使用安捷伦精确质量Q-TOF LC / MS系统可以显着减少进入质谱仪的脂质数量在给定的时间。 这样可以减少错误识别和错误量化的风险由于干扰同量异位脂质或脂质同位素而产生的复杂脂质样品。

事实表明，生物样品的基质效应是造成液质联用 (LC/MS) 方法的不稳定与不准确性的原因。在本研究中，我们开发出了一种用于分析人血浆中花青素苷代谢物的方法。此外，我们通过提取人血浆中五种不同花青素苷代谢物比较了蛋白质沉淀 (PPT) 与固相萃取 (SPE) 这两种不同的样品前处理技术。血液样品采集自饮用草莓饮料（40 g 冷冻干燥草莓粉）0、2 及 3 小时后的健康女性志愿者（年龄 20 - 35 岁）。采用 PPT 方法时，在血浆 (500 µL) 中加入酸化乙腈 (1.5 mL)，然后涡旋并离心。收集上清液并用氮气吹干，以待进行三重四极杆液质联用分析。采用 SPE 技术时，先将稀释后的血浆样品加载至 SPE 管 （Agilent Bond Elut Plexa，3 mL）中，然后用水冲洗，最后收集酸化甲醇的洗脱液。将收集的洗脱液在氮气下吹干，以待进行三重四极杆液质联用分析。采用三重四极杆液质联用系统对花青素苷类/代谢物（矢车菊素-3-葡萄糖苷 (C3G)、矢车菊素-3-芸香糖苷 (C3R)、天竺葵素-3-葡萄糖苷 (P3G)、天竺葵素-3-芸香糖苷 (P3R) 及天竺葵素葡糖苷酸 (PG)）进行鉴定与定量分析。

Agilent Bravo 自动化液体处理平台可以实施任意单相型脂质萃取方法，产生的样品适用于脂质组学 中的 LC/MS/MS 分析。使用 Agilent Bravo 的自动化处理可提高方法通量，并表现出始终如一的分析精度。本实验方案降低了样品前处理时间，从而大大减少脂质分析的成本/样品量。